国家自然科学基金(81173285)
- 作品数：5 被引量：61H指数：4
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- 相关机构：广东省中医院深圳市中医院广州中医药大学第一附属医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 鹿茸归经与早期骨关节炎软骨靶器官TGF-β受体的相关性研究被引量：10
- 2014年
- 目的:观察鹿茸归经与骨关节炎软骨靶器官TGF-βRⅠ、TGF-βRⅡ的关联性。方法:选择3月龄健康雌性SD大鼠100只,体质量(200±20)g。常规喂养1周后,采用经典Hulth方法造模,造模后6周,行病理学观察,确认造模成功,按体质量分层随机数字表法分成4组:鹿茸低剂量组、鹿茸高剂量组、盐水组、模型组,于灌胃后2、4、6周,分别取大鼠双侧膝关节软骨,采用荧光定量PCR和蛋白免疫印迹杂交方法分别检测TGF-βRⅠm RNA、TGF-βRⅡm RNA和蛋白表达。结果:各组大鼠TGF-βRⅠ、TGF-RβⅡm RNA和蛋白随时间变化的趋势有显著差异(P<0.01);与模型组比较,鹿茸低、高剂量组TGF-βRⅠm RNA、TGF-βRⅡm RNA和蛋白的表达量显著增加(P<0.01)。结论:鹿茸通过归经靶向作用于软骨细胞膜上的TGF-βRⅠ、TGF-βRⅡ受体,引起软骨靶器官组织受体的表达上调,促进了TGF-β信号通路的转导而起到修复软骨的作用。软骨细胞膜上的TGF-βRⅠ和TGF-βRⅡ受体可能是鹿茸作用的靶点之一。
- 牛维孙志涛林定坤李想郭达魏秋实周驰
- 关键词：骨关节炎鹿茸归经软骨
- 不同方法提取SD大鼠膝关节软骨组织的总RNA被引量：2
- 2014年
- 背景:目前文献报道的软骨RNA提取有多钟方法,国内文献报道多为经典Trizol法,在实验中发现该方法提取的RNA并不能满足后续实验的需要。目的:探索不同方法提取SD大鼠软骨组织总RNA的区别。方法:选取3月龄SD大鼠9只,分别采用Rneasy Lipid Tissue Kit、RNAout试剂盒和经典Trizol法对软骨组织进行总RNA提取,并通过RNA琼脂糖凝胶电泳检测RNA的完整性,以探寻软骨总RNA最佳提取方案。结果与结论:Trizol法提取的RNA A260/A280值为1.58,说明纯度不高;RNAout法提取的RNA,由于软骨含有大量的蛋白多糖和胶原,也不能满足后续实验的需要;RNeasyMini Kit法和肝(Trizol)法提取RNA的A260/A280值分别为2.00和1.98,说明提取的总RNA或核酸的纯度高。RNA的完整性电泳结果显示,RNeasyMini Kit法、RNAout法和肝(Trizol)法可见28 s、18 s及5 s条带,而Trizol法未见任何条带,RNAout法28 s和18 s条带不清楚。结果提示Rneasy Lipid Tissue Kit法获得的总RNA纯度高、完整性和稳定性好,并能成功反转录合成双链c DNA,而RNAout试剂盒和经典Trizol法获得的总RNA不能满足后续实验需要。
- 孙志涛牛维何升华林定坤
- 关键词：软骨RNA提取国家自然科学基金
- 单味药鹿茸调控大鼠骨关节炎软骨组织Smad2、3表达的研究被引量：20
- 2014年
- 目的观察单味中药鹿茸对大鼠骨关节炎(osteoarthritis,OA)软骨靶器官Smad2、3表达的影响。方法选择3个月龄健康雌性SD大鼠100只,体质量(200±20)g。常规喂养1周后,随机数字表法分成5组:鹿茸低剂量组、鹿茸高剂量组、盐水组、模型组及正常组,每组20只。除正常组外采用经典Hulth方法造模,造模后6周,行病理学观察,确认造模成功,鹿茸低剂量组按0.021 g/100 g给药,鹿茸高剂量组按0.084g/100 g给药,盐水组每天灌服相应的生理盐水,正常组及模型组不予任何处理。于灌胃后2、4、6周,分别取大鼠双侧膝关节软骨,采用免疫组织化学、荧光定量-PCR和蛋白免疫印迹杂交方法分别检测Smad2、3 mRNA和蛋白表达。结果病理观察可见成功制备OA模型,免疫组织化学可见Smad2、3蛋白在软骨层广泛表达,且定位于软骨细胞膜内。与模型组比较,鹿茸低、高剂量组在灌胃后2、4、6周Smad2、3 mRNA表达量明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与同组灌胃后4周比较,灌胃后6周,鹿茸高、低剂量组的Smad2、3mRNA表达量有所下降,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,鹿茸低、高剂量组Smad2、3蛋白在灌胃后2、4周时,其在软骨细胞中的表达量有明显的升高,差异有统计学意义(P<0.01);与同组灌胃后2周比较,鹿茸低、高剂量组灌胃后4周升高更显著,差异有统计学意义(P<0.01);与同组灌胃后4周比较,灌胃后6周时鹿茸低、高剂量组Smad2、3蛋白表达降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 (1)鹿茸通过调控软骨细胞内Smad2、3基因和蛋白的表达而起到修复软骨的作用。(2)软骨细胞内的Smad2、3基因表达及蛋白水平的上调可能是OA发病的重要机制之一。
- 牛维孙志涛曹学伟汪睦勋严正郭达樊粤光
- 关键词：骨关节炎鹿茸SMADSMAD归经
- 古人治疗“骨痹”用药规律研究被引量：28
- 2016年
- 目的:探讨古代医家关于骨痹(骨关节炎)内治方药的遣方用药规律。方法:借助"电子版《中华医典》数据库",分别以骨痹、膝痛、膝痹等为关键词检索,并用Excel表格建立数据库,用SPSS 18.0软件进行统计,通过对方剂中药物的功效和归经进行频数统计,从而分析不同种类药物的运用情况。同时,采用系统聚类分析对药物进行聚类统计,并运用中医药理论对结果进行分析。结果:共收集到骨痹内治方剂162首,纳入88首,药物功效使用频率分析结果显示,补虚药、解表药、活血化瘀药、祛风湿药、温里药和祛湿药的总使用频率达到79.2%,是构成治疗骨痹的常用药物;归经药物使用频率分析结果显示,入肾经的药物最多,频率为21.4%,其次是归肝经和脾经的药物分别占17.9%;根据高频数使用药物的聚类分析结果,并结合其功效,可以将这些药物聚为6类,多以滋补肝肾、活血通络、温里散寒等为法进行药物组合。结论:古人在临证运药治疗"骨痹"时,始终以肝肾亏虚为"骨痹"的发病根本原则为指导,多选用归肝、肾、脾经的药物,以滋阴补肾、活血化瘀、温里除湿、补虚活络等为法进行药物组合,在治疗"肝肾亏虚"之本时,兼以活血、温里、通络、祛湿以治其标。
- 孙志涛牛维
- 关键词：骨痹骨关节炎方药
- 单味中药鹿茸调控骨关节炎软骨组织TGF-β_1表达的研究被引量：9
- 2014年
- 目的研究单味中药鹿茸对骨关节炎(OA)软骨组织TGF-β1的调控作用。方法选择3月龄SPF级健康雌性SD大鼠100只,体质量(200±20)g,常规喂养1周后,采用经典Hulth方法造模,造模成功后,按体质量分层随机数字表法分成5组:鹿茸低剂量组、鹿茸高剂量组、盐水组、模型组、正常组,于灌胃后2周、4周、6周,分别取大鼠膝关节软骨,采用荧光定量-PCR和蛋白免疫印迹杂交方法分别检测TGF-β1mRNA和蛋白表达。结果鹿茸低剂量、高剂量组在灌胃后2、4、6周,TGF-β1mRNA和蛋白表达量逐步增加,且表达量均高于其它组,差异显著(P<0.01)。结论鹿茸能够提高软骨组织中TGF-β1基因和蛋白的表达量,起到促进软骨细胞增殖、分化的作用;鹿茸通过上调TGF-β1的表达,促进了其信号向核内的转导。
- 牛维孙志涛汪睦勋徐挺挺李想樊粤光
- 关键词：骨关节炎鹿茸软骨
