国家重点实验室开放基金(SKL2007SR06)
- 作品数：13 被引量：53H指数：5
- 相关作者：何晨阳吴茂森陈华民傅本重管文静更多>>
- 相关机构：中国农业科学院植物保护研究所东北农业大学内蒙古农业大学更多>>
- 发文基金：国家重点实验室开放基金国家自然科学基金国家公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学理学更多>>
- 水稻白叶枯病菌TCS应答调节子GacAxoo的分子克隆及其原核表达
- 水稻白叶枯病菌（Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xoo）双组分调控系统应答调节子GacAxoo参与了对毒性和运动性的调控。本研究扩增和克隆了全长的gacAxoo基因,构建了原核表达载体,在大肠杆...
- 傅本重吴茂森何晨阳
- 关键词：基因克隆原核表达水稻白叶枯病菌
- 文献传递
- 转录调控因子OxyRxoo对水稻白叶枯病菌H2O2降解途径的调控作用被引量：4
- 2009年
- 【目的】为了阐明水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzaepv.oryzae,简称Xoo)转录调控因子OxyRxoo对过氧化氢(H2O2)降解途径的调控作用。【方法】本研究对推导的H2O2识别调控基因oxyRxoo进行了基因克隆、序列分析、缺失突变和互补试验及其相关表型的鉴定。【结果】克隆的oxyRxoo基因序列与其它几种病原黄单胞菌的同源序列高度保守。OxyRxoo是LysR家族成员之一,具有PBPb结构域和DNA结合保守结构域(HTH)。用标记交换法构建了△oxyRxoo基因缺失突变体。与野生型菌株PXO99A相比,尽管△oxyRxoo在离体培养条件下的生长无明显变化,但H2O2抗性显著地降低,过氧化物酶(CAT)活性明显下降,基因互补可以使之恢复;过氧化物酶基因表达下调,oxyRxoo自身表达显著上调。【结论】OxyRxoo作为一个重要转录调控因子,调控了Xoo的H2O2降解途径。
- 张建唐高洁吴茂森陈华民何晨阳
- 关键词：水稻白叶枯病菌H2O2降解过氧化物酶
- H_2O_2对水稻白叶枯病菌过氧化氢酶相关基因crg表达的诱导作用被引量：4
- 2009年
- 为了阐明H2O2对水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzaepv.oryzae,Xoo)过氧化氢酶(CAT)相关基因(crg)表达的诱导作用,本研究定量分析了在水稻细胞-Xoo互作体系及其加入H2O2清除剂CAT后H2O2产量和crg表达;外源添加H2O2后的病菌生长和crg表达。结果表明:在互作条件下,H2O2含量稳定增加,10 h可达到峰值;在互作6 h时crg显著地被诱导表达;加入CAT显著地降低了H2O2含量和crg表达;在外源H2O2胁迫条件下,H2O2以浓度效应的方式影响病菌增殖,显著地诱导了catB和srpA表达。因此,Xoo-水稻互作导致了H2O2的发生。无论是互作产生的还是外源的H2O2均显著地诱导了Xoocrg表达,从而活化了H2O2降解途径。
- 周建波吴茂森胡俊何晨阳
- 关键词：H2O2水稻白叶枯病菌
- 水稻C端结合蛋白家族基因OsCtBP-A的克隆及表达分析被引量：1
- 2009年
- 利用5′-RACE方法克隆了在水稻与白叶枯病菌(Xanthomonas oryzaepv.oryzae,简称Xoo)互作过程中下调表达的水稻C端结合蛋白家族基因OsCtBP-A的全长序列。通过生物信息学方法分析了该基因及编码蛋白质的结构特征,OsCtBP-A由424氨基酸组成,N端具有2-Hacid_dh_C保守结构域,C端具有植物CtBPs家族特有的NLS和PEST基序,氨基酸序列与拟南芥和牵牛花CtBPs同源物的同源性为63%;基因启动子区推测具有ABA和SA应答调控元件。OsCtBP-A基因对不同信号分子应答的RTQ-PCR分析表明,水杨酸(SA)、茉莉酸甲酯(MeJA)、乙烯(ETH)和脱落酸(ABA)处理水稻后均能诱导该基因的转录表达,但诱导能力有所差异,其中ABA诱导活性最强。
- 李磊吴茂森李广旭何晨阳
- 关键词：水稻基因表达信号分子实时定量PCR
- 用原子吸收光谱法测定水稻白叶枯病菌rpfFxoo基因缺失突变体铁元素吸收被引量：1
- 2010年
- 铁元素吸收是细菌生长的重要限制因素之一。前期研究推测在水稻白叶枯病菌(Xanthomonasoryzaepv.oryzae,简称Xoo)中rpfFxoo基因可能参与Fe元素的代谢。通过同源重组法,获得了Xoo基因缺失突变体ΔrpfFxoo;利用原子吸收光谱法测定Xoo野生型菌株PXO99A和ΔrpfFxoo对Fe元素的吸收。结果表明,通过对工作条件的优化,使样品平均回收率达到99.7%,相对标准偏差(RSD)为1.89;随着培养时间的延长,PXO99A和ΔrpfFxoo对Fe元素吸收不断增加,ΔrpfFxoo中Fe元素的含量显著低于PXO99A(P<0.05),证明rpfFxoo与铁元素的代谢有关。
- 孙蕾吴茂森何晨阳
- 关键词：水稻白叶枯病菌原子吸收光谱法
- 水稻白叶枯病菌在离体培养条件下生物膜形成的检测被引量：7
- 2010年
- 分析了不同培养和测试条件(塑料和玻璃表面、培养时间、培养温度和培养基)对水稻白叶枯病菌(Xan-thomonas oryzaepv.oryzae,Xoo)生物膜形成的影响,并测定了不同地区来源的Xoo野生型菌株、基因缺失突变体的生物膜形成。结果表明,在聚苯乙烯表面生长、用M210培养基在23℃下静止培养24 h是Xoo生物膜形成比较适宜的条件;不同地区来源的菌株生物膜形成能力不同;鞭毛相关基因fleQxoo、fliExoo和rbfCxoo以及H2O2降解调控基因oxyRxoo的缺失突变均影响生物膜形成。
- 傅本重吴茂森陈华民何晨阳
- 关键词：水稻白叶枯病菌生物膜形成基因突变
- 受病原细菌诱导表达增强的水稻转录因子基因OsBTF3的分子鉴定被引量：13
- 2009年
- 【目的】分子克隆和定性分析受水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xoo)诱导的水稻转录因子基因OsBTF3。【方法】用生物信息学和RT-PCR方法鉴定和分离OsBTF3基因全长cDNA序列;用原核表达和亚细胞定位方法分析产物表达及其定位;用RT-Q-PCR方法分析基因的组织表达特性和对Xoo侵染的的应答表达。【结果】从水稻品种日本晴cDNA中克隆了OsBTF3全长序列,它编码具有175个氨基酸的蛋白质,具有核定位信号和NAC保守结构域;OsBTF3与其它植物BTF3序列同源性可达79%～88%;在大肠杆菌中表达产生一个与预测分子量大小一致的27kD蛋白质;OsBTF3::GFP融合蛋白主要在细胞核和细胞膜出现;OsBTF3基因在水稻不同发育期和组织中均有表达,但显著地受Xoo侵染的诱导而增强。【结论】成功分离了一个受Xoo诱导表达增强的水稻转录因子基因OsBTF3;OsBTF3主要定位于细胞核和细胞膜,可能在水稻感病性表达中起调控作用。
- 李广旭吴茂森吴静何晨阳
- 关键词：水稻基因克隆感病性
- 转录激活因子FleQxoo原核表达及其与鞭毛基体基因fliExoo启动子的结合
- 2009年
- 为了阐明转录激活因子FleQxoo对水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzaepv.oryzae,Xoo)鞭毛基体基因fliExoo的转录调控机理,本研究用PCR方法从Xoo野生型菌株PXO99A中克隆了fleQxoo基因,构建了原核表达载体pET21-fleQ-xoo,在大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中进行了诱导表达,通过Ni-NTA亲和层析纯化得到FleQxoo蛋白;EMSA检测到FleQ-xoo与鞭毛基体基因启动子fliExoo-p片段的特异结合作用。这些结果为阐明FleQxoo直接调控鞭毛基体基因fliExoo的转录提供了分子证据。
- 傅本重吴茂森陈华民何晨阳
- 关键词：水稻白叶枯病菌原核表达EMSA
- 一个受病原菌抑制的水稻结合蛋白基因OsCtBP-A的分离及其表达分析
- ＜正＞C端结合蛋白（CtBPs）家族成员在动物发育过程中具有转录辅阻遏物的作用,可特异性地结合DNA转录阻遏物。拟南芥AN与CtBPs抑制转录功能相似,但缺乏CtBPs中保守的结构特征。AN基因能够调节叶细胞宽度,影响叶...
- 李磊吴茂森吴静柏亚男李广旭陈华民何晨阳
- 关键词：水稻基因表达信号分子
- 文献传递
- 水稻白叶枯病菌核苷酸信号受体蛋白Clpxoo的分子鉴定及其功能被引量：9
- 2009年
- 【目的】本文的目的为阐明水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv. oryzae,简称Xoo)核苷酸信号途径及其作用机理。【方法】本研究对推导的信号受体蛋白Clpxoo进行了基因克隆、序列分析、缺失突变和互补及其相关表型的鉴定。【结果】克隆的clpxoo基因序列与大肠杆菌crp和铜绿假单胞菌vfr的同源性较高,与其它几种病原黄单胞菌clp高度保守。Clpxoo序列N端具有环化核苷酸cNMP结合结构域(CAP-ED),C端具有保守的DNA结合结构域(HTH-CRP)。用双交换法构建了基因缺失突变体(△clpxoo)。与野生型菌株PXO99A相比,△clpxoo的运动性、胞外多糖产生能力和对H2O2的抗性均显著降低,基因互补可使之部分恢复;△clpxoo胞外酶产生和对烟草致敏性无显著改变。【结论】Clpxoo可能作为全局性的保守调控因子之一,调控了Xoo的鞭毛运动性、胞外多糖产生和对H2O2的抗性。
- 管文静吴茂森何晨阳
- 关键词：毒性水稻白叶枯病菌
