江苏省国际科技合作项目(BZ2007078)
- 作品数：1 被引量：8H指数：1
- 相关作者：于杰淼曹鹏蔡雪婷卢悟广王旻更多>>
- 相关机构：中国药科大学江苏省中医药研究院更多>>
- 发文基金：江苏省国际科技合作项目江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- SUMO-BMP7融合蛋白的表达及纯化被引量：8
- 2009年
- 采用融合表达技术,将BMP-7与SUMO(Small ubiquitin-related modifier)基因通过PCR技术连接起来,组成SUMO-BMP7基因片段,双酶切后插入到pET28a载体中克隆,挑取单克隆进行酶切及菌落PCR检测,提取检测结果为阳性的质粒,转化进大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。SUMO属于小泛素样修饰因子,具有帮助蛋白质折叠的作用,可提高目的蛋白的表达量和增加目的蛋白的可溶性,经特异性酶切后,目的蛋白能够得到天然的N末端;结果:表达后经超声、Ni-NTA纯化得到SUMO-BMP7融合蛋白。确定了可溶性SUMO-BMP7适宜的诱导温度、诱导时间和IPTG浓度,得到了电泳纯度大约98%的SUMO-BMP7融合蛋白;获得的可溶性融合蛋白,具有很高的表达量。分离纯化后,SDS-PAGE纯度可达到98%左右。为其下一步的酶切和活性研究提供基础。
- 于杰淼曹鹏卢悟广蔡雪婷张娟王旻
- 关键词：骨形态发生蛋白7克隆纯化
