黑龙江省自然科学基金(C201013)
- 作品数：9 被引量：13H指数：3
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- 黄芩单细胞克隆愈伤组织酯酶同工酶及过氧化物同工酶酶谱分析被引量：1
- 2015年
- 以黄芩单细胞克隆愈伤组织为试材,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)法,通过分析酯酶同工酶(EST)和过氧化物同工酶(POD)的酶带,研究黄芩单细胞克隆愈伤组织与亲本愈伤组织的遗传特性与品系差异。结果表明:黄芩不同品系单细胞克隆愈伤组织EST谱带间具3个带区特征,最多谱带数品系为4条,最少谱带数品系为3条,其中1号、2号、3号谱带为黄芩单细胞克隆愈伤组织的特征谱带;POD谱带间具4个带区特征,其中1号、3号和7号酶带为特征谱带,EST和POD谱带的有无、宽窄、颜色深浅,相对迁移率大小均不尽相同。黄芩单细胞克隆愈伤组织与亲本细胞愈伤组织既具有亲缘特征又具有品系差异,以期为单细胞克隆品系的遗传特性和品系鉴别提供理论参考。
- 刘丽杰林立东张东向
- 关键词：黄芩愈伤组织酯酶同工酶过氧化物同工酶酶谱
- 黄芩悬浮细胞培养过程中黄芩苷含量与苯丙氨酸解氨酶活性分析被引量：4
- 2014年
- 以黄芩悬浮细胞为试材,研究了悬浮培养过程中黄芩苷含量与苯丙氨酸解氨酶活性变化,采用均匀设计法分析了不同激素配比对黄芩生物量积累的影响。结果表明:黄芩细胞悬浮系生长呈较典型的"S形"曲线,黄芩苷变化与生物量积累基本一致;在黄芩悬浮培养周期中,苯丙氨酸解氨酶的活性强弱与黄芩苷的积累有一定相关性,培养第12天时活性最强。经均匀设计实验法得到最适宜黄芩悬浮培养生物量积累的激素配比为MS培养基附加6-BA 0.75mg/L,NAA0.5mg/L,KT 1.5mg/L。
- 张东向赵静刘丽杰焦战战张令昂毕宇
- 关键词：黄芩悬浮细胞培养黄芩苷PAL
- 黄芩悬浮细胞培养过程中黄芩苷与蛋白质含量相关性分析被引量：1
- 2015年
- 以黄芩悬浮细胞为材料研究其生长过程中蛋白质含量变化规律及与黄芩苷次生合成之间的关系. 结果表明,在黄芩悬浮细胞生长周期（21 d）内,蛋白质含量的高低与黄芩苷的积累呈正相关.在黄芩悬浮细胞生长周期的前6 d,悬浮细胞处于潜伏期,蛋白质含量低水平表达,黄芩苷合成缓慢; 6～18 d,悬浮细胞处于生长期,蛋白质的含量高水平表达,合成速率较快,这期间黄芩苷也迅速合成; 18～21 d,悬浮细胞进入稳定期,此时蛋白质含量处于稳定期,黄芩苷合成也几乎停止. 同时采用L9（34）正交试验研究培养基中6-BA、碳源、氮源、pH的配比对蛋白质含量表达的影响,结果表明碳磷源（NH4＋）对蛋白质的表达影响最大.
- 张东向焦战战张令昂邱全权赵静刘丽洁
- 关键词：黄芩悬浮细胞黄芩苷蛋白质含量正交试验
- 黄芩悬浮细胞培养过程中黄芩苷含量与POD活性的相关性分析被引量：1
- 2016年
- 以黄芩悬浮细胞为材料,研究其生长过程中过氧化物酶（POD）活性变化规律及其与黄芩苷次生合成之间的关系。结果表明,在黄芩悬浮细胞生长周期（21 d）内,POD活性与黄芩苷的积累呈正相关。在黄芩悬浮细胞生长周期的前6 d,悬浮细胞处于适应期,POD低水平表达,黄芩苷合成缓慢;6～15 d,悬浮细胞处于增长期,POD高水平表达,并到达最大值,期间黄芩苷迅速合成;15～21 d,悬浮细胞进入饱和期,此时POD活性降低,黄芩苷合成几乎停止。采用L9（34）正交表优化培养基中6-BA、碳源、氮源、pH的配比,筛选POD活性表达最优的培养条件为：6-BA 3 mg/L、碳源15 g/L蔗糖＋15 g/L葡萄糖、氮源（NH4＋）30 mmol/L、pH 5.6。
- 张东向焦战战张令昂李升林孟庆伟刘丽洁
- 关键词：悬浮细胞黄芩苷过氧化物酶活性
- 不同激素配比对三岛柴胡悬浮细胞生长发育的影响被引量：2
- 2012年
- [目的]研究不同配比激素对三岛柴胡悬浮细胞生长发育的影响。[方法]采用均匀设计试验方法,对三岛柴胡悬浮细胞培养基的激素进行优化,并以最优激素配方为基础拟合三岛柴胡悬浮细胞培养中鲜重、干重与培养时间的关系曲线。[结果]三岛柴胡悬浮细胞培养的最优激素配方为:N6+0.5 mg/L NAA+0.75 mg/L 6-BA+1.5 mg/L KT;细胞鲜重与培养时间的关系拟合方程为Y=5.703 6X2-41.429X+136.44;细胞干重与培养时间的关系拟合方程为Y=2.021 8X2-22.595X+57.19。[结论]试验为研究三岛柴胡细胞和实现其大规模培养奠定了基础。
- 张东向徐爽史绍林矫艳玲
- 关键词：悬浮细胞培养
- 黄芩愈伤组织中黄芩苷与过氧化物酶活性相关性分析被引量：3
- 2013年
- 以黄芩愈伤组织为试材,研究了其生长过程中过氧化物酶活性变化规律及其与黄芩苷次生合成之间的关系。结果表明:在黄芩愈伤组织生长周期(27d)内,过氧化物酶的活性高低与黄芩苷的积累呈正相关性。在黄芩愈伤组织生长周期的前15d,愈伤组织处于生长期,过氧化物酶活性低水平表达,黄芩苷合成缓慢;15～21d,愈伤组织处于稳定期,过氧化物酶的活性高水平表达,并到达最大值,期间黄芩苷迅速合成,也达到最大值;21～27d,愈伤组织进入衰老期,而此时的过氧化酶活性降低,黄芩苷合成几乎停止。采用L9(34)正交表优化培养基中6-BA、碳源、氮源、pH的配比,筛选过氧化物酶活性表达最优的培养条件为:6-BA 2mg/L,碳源:20g蔗糖+10g葡萄糖,氮源(NH4+)30mmol/L,pH 6.0。
- 焦战战张东向赵静贾宾孟庆伟张超
- 关键词：黄芩愈伤组织黄芩苷正交设计
- 中药黄芩的悬浮培养及过氧化物同工酶酶谱分析被引量：1
- 2014年
- 以黄芩悬浮细胞为实验材料,研究黄芩悬浮培养过程中悬浮培养液pH值、电导率值、蔗糖质量分数,并对不同培养时间测定过氧化物同工酶酶谱进行分析,确定次生代谢产物黄芩苷与培养液及同工酶的关系.结果表明,在黄芩悬浮培养周期中,过氧化物酶酶谱变化与次生代谢产物黄芩苷的积累呈正相关,黄芩悬浮培养14 d过氧化物酶活性最强,黄芩悬浮培养第15天时,黄芩苷质量浓度最高.悬浮培养液pH值、电导率值、蔗糖质量分数随黄芩苷累积均有相应变化.
- 赵静张东向焦战战张令昂毕宇
- 关键词：黄芩苷过氧化物同工酶
- 黄芩毛状根的诱导及响应面法优化培养条件被引量：2
- 2012年
- [目的]应用响应面法优化黄芩毛状根的培养条件。[方法]利用发根农杆菌1.2556感染黄芩获得毛状根,在单因素试验的基础上,利用Box-Benhnkcn设计和响应面分析法对影响黄芩毛状根生长的培养条件(培养时间、温度、摇床转速和接种量)进行分析,优选最佳培养条件。[结果]毛状根在无外源激素的MS培养基上自主生长,表现出典型的发根特征。毛状根的最优培养条件为:培养时间24.95 d、温度27.4℃、摇床转速123.69 r/min、接种量0.500 g;在此条件下,黄芩毛状根的生长量为(fm)9.271 28 g/瓶。[结论]该研究优化了黄芩毛状根的培养条件,为黄芩的进一步开发利用提供了依据。
- 张东向李红波王志刚莫继先高美玲刘丽杰林立东
- 关键词：毛状根响应面法
- 几种物理因素对黄芩细胞悬浮系生长与黄芩苷含量变化的影响被引量：3
- 2014年
- 为建立稳定的黄芩细胞悬浮系,采用悬浮细胞培养技术,研究了接种量、光照与否和pH值等3种物理因素对黄芩细胞悬浮系生长与黄芩苷含量变化的影响。结果表明,黄芩细胞悬浮系浊度随培养时间呈现"S"形变化曲线;采用MS基本培养基,添加0.2 mg·L-1 2,4-D、2.0 mg·L-1 6-BA和3%蔗糖,选取1.0 g·L-1的接种量、pH 5.8,并在25℃条件下进行暗培养,最有利于黄芩苷的积累,黄芩苷含量最高可达7.425μg·g-1FW。
- 顾长海张东向刘丽杰赵静卢蓉蓉王洪杰佟鑫鑫
- 关键词：黄芩接种量PH黄芩苷
