浙江省科技厅新苗人才计划(2013R413039)
- 作品数：1 被引量：5H指数：1
- 相关作者：李敏潘秀珍王晶杜骁杰王长军更多>>
- 相关机构：温州医科大学中国人民解放军南京军区军事医学研究所更多>>
- 发文基金：浙江省科技厅新苗人才计划南京军区医学科技创新课题江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Sao蛋白多克隆抗体制备鉴定及促全血杀菌作用被引量：5
- 2014年
- 目的制备2型猪链球菌(S.suis 2)表面抗原一(Sao)重组蛋白的多克隆抗体,鉴定其免疫学特性。方法通过PCR从2型猪链球菌中国强毒株05ZYH33基因组中扩增基因Sao,构建重组表达质粒pET28a-Sao,转化E.coli BL21,异丙基硫代半乳糖苷诱导表达目的蛋白,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定表达产物,His亲和层析柱纯化重组蛋白,利用纯化后Sao蛋白制备多克隆抗体,间接酶联免疫吸附试验检测抗体效价,Western blot鉴定抗体特异性,评价Sao多克隆抗体的促全血杀菌作用。结果构建的重组质粒可以在宿主菌中高效表达,纯化后获得的重组蛋白纯度可达90%;间接酶联免疫吸附试验测定Sao多克隆抗体效价为1∶102400;Western blot结果显示,Sao多克隆抗体有较好的特异性;全血杀菌实验显示,05ZYH33在含有Sao多抗血清的全血中相对存活率下降85%。结论本研究制备的2型猪链球菌重组Sao蛋白多克隆抗体效价高,特异性好,可明显增强全血对细菌的杀伤作用。
- 王晶李敏刘文静杜骁杰王玲李先富王长军潘秀珍高基民
- 关键词：2型猪链球菌原核表达多克隆抗体
