首都医学发展科研基金(ZD199908)
- 作品数：13 被引量：132H指数：7
- 相关作者：曾正陪童安莉李汉忠李明孙梅励更多>>
- 相关机构：北京协和医院中国人民解放军第二炮兵总医院山西医科大学第一医院更多>>
- 发文基金：首都医学发展科研基金国家教育部博士点基金山西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 尾加压素ⅡmRNA在正常肾上腺髓质和嗜铬细胞瘤组织中的表达被引量：5
- 2003年
- 目的 研究尾加压素Ⅱ (UrotensinⅡ ,UⅡ )mRNA在正常肾上腺髓质和嗜铬细胞瘤组织中的表达。方法 正常肾上腺髓质组织取自 9例意外死亡的中青年 ,嗜铬细胞瘤组织取自 19例患者手术切除标本 ,分别提取组织总RNA ,用逆转录 聚合酶链反应方法进行研究 ,以UⅡ和内参照GAPDH(甘油醛 3 三磷酸脱氢酶 )进行同管扩增 ,以扩增的目的条带灰度和内参照条带灰度比值UⅡ /GAPDH进行UⅡmRNA表达的半定量分析。结果 UⅡ的PCR扩增产物长度为 385bp ,测序结果与GeneBank所登记碱基序列相同率为 99.7%。正常肾上腺髓质和嗜铬细胞瘤组织UⅡ /GAPDH比值分别为 0 .6 9± 0 .2 9和 0 .2 2± 0 .18(P <0 .0 5 )。结论 UⅡmRNA在正常肾上腺髓质和嗜铬细胞瘤组织中均有表达 ,嗜铬细胞瘤组织中的表达低于正常肾上腺髓质组织。
- 刘国强曾正陪李汉忠范欣荣刘冬梅童安莉郑欣
- 关键词：肾上腺髓质逆转录-聚合酶链反应缩血管物质
- 尾加压素Ⅱ对大鼠及人嗜铬细胞瘤细胞体外增殖的影响
- 2007年
- 目的研究尾加压素Ⅱ(UⅡ)对大鼠嗜铬细胞瘤细胞系PC12细胞及体外培养的人原代嗜铬细胞瘤细胞增殖的影响。方法以噻唑兰法(MTT法)观察UⅡ对PC12细胞及体外培养的人原代嗜铬细胞瘤细胞增殖的影响。结果UⅡ对PC12细胞的增殖无明显影响。10-7、10-6mol/L浓度的UⅡ可促进体外培养的原代人嗜铬细胞瘤细胞增殖。结论UⅡ可促进嗜铬细胞瘤细胞的生长,在嗜铬细胞瘤的发病机制中可能起一定作用。
- 刘国强曾正陪李汉忠范欣荣刘冬梅童安莉李明
- 关键词：嗜铬细胞瘤细胞增殖
- 人嗜铬细胞瘤细胞的原代培养及鉴定被引量：10
- 2003年
- 本研究拟建立人嗜铬细胞瘤细胞的原代培养方法。采用连续分次胶原酶消化法分离培养人嗜铬细胞瘤细胞 ,采用细胞培养液中儿茶酚胺水平检测、多聚甲醛诱发荧光及细胞嗜铬粒蛋白A (CgA)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)的免疫组化染色等方法进行细胞性质和功能鉴定 ,并用噻唑兰 (MTT)法观察原代培养的人嗜铬细胞瘤细胞的生长状况。结果表明 ,人嗜铬细胞瘤细胞在培养 3～ 7天时生长较快 ,7天后细胞开始分化。经检测细胞培养液中的儿茶酚胺浓度、多聚甲醛诱发荧光等 ,证明该细胞有合成和分泌儿茶酚胺的功能。并且培养的细胞CgA和NSE免疫组化染色阳性。因此 ,本研究成功建立了人嗜铬细胞瘤细胞的原代培养方法 ,并鉴定其具有嗜铬细胞瘤的分泌和表达功能 。
- 童安莉曾正陪李汉忠李明杨堤毛全宗刘广华陈松孙梅励
- 关键词：嗜铬细胞瘤细胞原代培养细胞培养液儿茶酚胺
- TGF-α及TNF-α对大鼠和人嗜铬细胞瘤细胞增殖及凋亡的不同作用被引量：2
- 2005年
- 目的观察转化生长因子α(TGF-α)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)对大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞和原代培养的人嗜铬细胞瘤细胞增殖及凋亡的不同作用.方法用MTT法观察TGF-α和TNF-α对嗜铬细胞瘤细胞增殖的作用;通过PI染色流式细胞分析、Hochest33342染色和细胞基因组DNA电泳等方法检测细胞凋亡. 结果 TGF-α(0.25～100 μg/L)呈浓度依赖方式促进PC12细胞增殖,TNF-α(1～100 μg/L)呈浓度依赖方式抑制PC12细胞增殖;而TGF-α和TNF-α(0.1～100 μg/L)均呈浓度依赖方式刺激人嗜铬细胞瘤细胞增殖.高浓度(100 μg/L)的TGF-α和TNF-α分别抑制或刺激PC12细胞凋亡,但均对人嗜铬细胞瘤细胞凋亡无明显影响.结论 TGF-α及TNF-α均能影响人和大鼠嗜铬细胞瘤细胞的增殖及凋亡,但对不同来源的嗜铬细胞瘤细胞的作用不同.
- 童安莉曾正陪李明李汉忠杨堤孙梅励
- 关键词：TGF-ΑTNF-ΑPC12细胞增殖凋亡
- 肾上腺髓质素对嗜铬细胞瘤细胞增殖的影响被引量：2
- 2005年
- 目的观察肾上腺髓质素(ADM)对原代培养的人嗜铬细胞瘤细胞和大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞增殖的作用.方法 (1)采用连续分次胶原酶消化法分离培养人原代嗜铬细胞瘤细胞;(2)细胞计数法观察细胞的生长状况;(3)用噻唑蓝(MTT)法观察ADM对原代培养的人嗜铬细胞瘤细胞和大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞增殖的影响.结果 (1)人嗜铬细胞瘤细胞在培养3～7 d时生长较快,7 d左右细胞接近融合.(2)ADM对大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞的增殖未见影响;但可抑制原代培养的人嗜铬细胞瘤细胞增殖.结论 ADM可抑制人嗜铬细胞瘤细胞的增殖.
- 刘冬梅曾正陪李汉忠范欣荣刘国强严维刚童安莉郑欣
- 关键词：肾上腺髓质素嗜铬细胞瘤细胞增殖肿瘤细胞显微镜细胞凋亡
- 人嗜铬细胞瘤组织中转化生长因子α、肿瘤坏死因子α和血管内皮生长因子的表达被引量：9
- 2004年
- 目的 观察人嗜铬细胞瘤(PHEO)组织和正常肾上腺髓质中转化生长因子α(TGFα)、肿瘤坏死因子α(TNFα)和血管内皮生长因子(VEGF)表达的差异。方法RT-PCR法比较22例经手术及病理证实的PHEO组织及18例意外死亡者(符合医学伦理学要求)的正常肾上腺髓质中TGFα、,TNFα和VEGF mRNA表达的差异;免疫组化法比较石蜡包埋的27例PHEO和14例正常肾上腺髓质中TGFα、TNFα和VEGF蛋白表达的差异,并分析其与肿瘤的性质、部位、大小、重量的关系。结果PHEO中TGFα、TNFα mRNA和蛋白表达均高于正常肾上腺髓质。PHEO中VEGF145剪接体的mRNA表达高于正常肾上腺髓质;VEGF121和VEGF165剪接体的mRNA在PHEO和正常肾上腺髓质中的表达差异无显著性。PHEO的内皮细胞和肿瘤细胞VEGF的染色阳性率高于正常肾上腺髓质。肾上腺外PHEO中TGFα、TNFα和VEGF蛋白表达高于肾上腺PHEO。恶性和多发PHEO的TNFα蛋白表达高于良性和单发PHEO。结论 PHEO中TGFα、TNFα和VEGF的mRNA和蛋白表达高于正常肾上腺髓质,TGFα、TNFα和VEGF在不同特点的PHEO中的表达不同。
- 童安莉曾正陪杨堤李汉忠李明陈松孙梅励
- 关键词：肿瘤坏死因子A
- TGF-α、TNF-α和VEGF对人嗜铬细胞瘤细胞增殖和凋亡的影响被引量：7
- 2004年
- 目的研究转化生长因子α(TGFα)、肿瘤坏死因子α(TNFα)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)对原代培养的人嗜铬细胞瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法用噻唑兰(MTT)法观察TGFα、TNFα和VEGF对原代培养的人嗜铬细胞瘤细胞增殖的作用;用PI染色流式细胞分析、Hochest33342染色的方法检测上述细胞因子对人嗜铬细胞瘤细胞凋亡的影响。结果0.1～100μg/L的TGFα、TNFα和VEGF均促进人嗜铬细胞瘤细胞增殖。无血清培养72h,人嗜铬细胞瘤细胞的凋亡率为3.98%,100μg/L的TGFα、TNFα和VEGF对其凋亡无明显影响。结论TGFα、TNFα和VEGF刺激原代培养的人嗜铬细胞瘤细胞增殖,但对其凋亡无明显影响。
- 童安莉曾正陪杨堤李明李汉忠毛全宗石冰冰刘广华孙梅励
- 关键词：嗜铬细胞瘤TNF-A凋亡VEGF增殖MTT
- 血清瘦素水平与胰岛素原、真胰岛素及胰岛素敏感性的关系被引量：37
- 2002年
- 目的 研究中国人群空腹瘦素水平与真胰岛素 (TI)、胰岛素原 (PI)、PI/TI比值及胰岛素敏感性之间的关系。方法 90 2例非糖尿病者均系 2 0 0 0年接受糖尿病流行病学调查者。测定空腹瘦素、TI和PI浓度以及空腹及餐后 2h血糖。瘦素、TI及PI检测采用本室建立的特异的酶联免疫分析法 (ELISA)。胰岛素敏感性以HOMA胰岛素抵抗指数 (HOMA IR)评价。结果 血清瘦素水平女性高于男性。相关分析显示血清瘦素水平与空腹TI、PI及HOMA IR显著正相关 (男性 792例 ,r分别为0 345、0 2 36和 0 364 ;女性 1 1 0例 ,r分别为 0 574、0 375和 0 576 ,P <0 0 0 1 ) ,但与空腹血糖仅在男性呈弱相关 (r=0 1 5 ,P =0 0 1 5) ,与空腹PI/TI比值不相关。在调整年龄、体重指数 (BMI)和腰臀围比(WHR)后 ,尽管相关性减弱 ,瘦素水平仍然与TI、PI以及HOMA IR显著相关。结论 本组的血清瘦素浓度与TI、PI以及胰岛素抵抗显著正相关 ,且在一定程度上独立于肥胖和脂肪分布。瘦素水平高或瘦素抵抗的个体可能存在高胰岛素血症和胰岛素抵抗 ,提示其瘦素 胰岛素轴的调节异常。本研究未发现瘦素水平与空腹PI/TI比值的相关 ,提示瘦素可能与这一反映胰岛 β细胞的功能异常的标志无关。本研究揭示的高瘦素 高胰岛素血症或胰岛素抵抗之间的?
- 黎明詹志伟吴从愿杨静张葵李晓光甘利虹
- 关键词：血清瘦素胰岛素原真胰岛素肥胖胰岛素敏感性
- 血清瘦素水平与原发性高血压的相关性研究被引量：41
- 2003年
- 目的 探讨瘦素、肥胖、胰岛素抵抗与血压的相互关系 ,评价瘦素在高血压发病中的作用。方法 5 6 0名非糖尿病的成年男性 ,测定空腹血脂、瘦素、真胰岛素 (TI)浓度以及空腹和餐后 2h血糖。胰岛素敏感性以稳态模型抵抗指数 (HOMA R)评价。结果 空腹瘦素水平与体重指数 (BMI)、腰臀比 (WHR)、TI和HOMA R、血压以及甘油三酯和胆固醇均显著相关 (均为P <0 0 1)。在调整年龄、BMI、WHR和HOMA R后 ,瘦素仍与收缩压呈正相关 (r=0 11,P <0 0 5 ) ,而且高血压者 (除外服用降压药者 )的瘦素水平也显著高于非高血压者 (几何均值 6 4 μg/L对 4 7μg/L ,P <0 0 0 1)。肥胖、胰岛素抵抗和高瘦素血症均能明显增加高血压的检出率。Logistic回归分析也显示瘦素水平的升高与高血压的发病密切相关。结论 瘦素与肥胖型高血压的发病相关。
- 黎明吴从愿詹志伟杨静张葵李晓光甘利虹纪宝华
- 关键词：瘦素肥胖症高血压胰岛素抵抗血清学检查
- 中国人17α-羟化酶/17 ,20-裂解酶缺乏症基因突变研究(英文)被引量：13
- 2006年
- 目的研究中国人17α-羟化酶/17 ,20-裂解酶缺乏症CYP17A1基因突变特点,以及结合患者的临床表现与基因突变类型初步探讨P450C17酶蛋白的结构与功能的关系。方法收集5例17α-羟化酶/17 ,20-裂解酶缺乏症患者及其部分家属血标本,提取基因组DNA,设计7对引物扩增CYP17A1基因的8个外显子及外显子与内含子的连接区域,琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物,产物胶回收后直接作为DNA双链模板测序。DNA双链模板不一致的PCR产物经克隆后测序。测序结果在核苷酸序列数据库进行比较分析。结果 5例患者均检测出CYP17A1基因突变,共存在2种新的复合突变,即6436-6438(TAC→AA)导致Y329K,418X和6531-6532(GC→A)导致L361F,418X。这两种突变均形成缺乏酶活性中心的截短蛋白。其中4例患者为Y329K,418X突变纯合子,1例为Y329K,418X/L361F,418X的复合杂合子。5例患者的临床表型为17α-羟化酶/17 ,20-裂解酶的完全性联合缺陷,与其基因突变类型相一致。结论 6436-6438( TAC→AA)这种突变可能在中国人较常见,可能具有种族特异性。将进一步进行突变酶蛋白的功能学研究。
- 陶红陆召麟张波米树华王南晔王曦之吴尽
- 关键词：17Α-羟化酶/17CYP17A1基因突变
