国家自然科学基金(30300422)
- 作品数：2 被引量：7H指数：1
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- PRP基因RNAi重组慢病毒制备及PRP基因与睾丸间质细胞增殖和睾酮产生的关系被引量：1
- 2011年
- 目的制备PRP RNAi重组慢病毒,并对PRP基因功能进行初步研究。方法采用miRNA方式抑制PRP基因表达,筛选最有效序列包装慢病毒,用于转染TM3睾丸间质细胞。转染实验分为TM3-negative对照组(阴性对照质粒组,转染pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR-neg control质粒)以及A、B、C 3个干扰质粒组(分别转染pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR-PRP-A,B,C质粒);RT-PCR与Western blot方法检测慢病毒对PRP基因表达影响,MTT方法检测细胞增殖情况,ELISA方法检测细胞睾酮产生情况。结果经测序鉴定,成功制备了PRP RNAi重组慢病毒;与阴性对照质粒组比较,转染pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR-PRP-A,B组可有效下调TM3细胞PRP mRNA和蛋白表达(P<0.01,P<0.05)。MTT结果表明抑制PRP基因后,TM3细胞的增殖加快(P<0.01)。此外,相较于对照组,下调PRP基因抑制促黄体生成素(luteinizing hormone,LH)刺激产生睾酮的效应(P<0.05)。结论成功制备了PRP RNAi重组慢病毒,对其功能初步研究显示,PRP不仅与睾丸间质细胞增殖有关,而且参与睾酮产生。
- 赵丽娜郝杰胡建刚吕自兰王琦王丽敏余秋波王应雄黎刚
- 关键词：慢病毒睾酮间质细胞
- 人参皂甙Rg1对镉诱导的大鼠睾丸损伤的保护作用被引量：6
- 2007年
- 目的:探讨人参皂甙Rg1对镉诱导的大鼠睾丸损伤的保护作用及作用机制。方法:30只雄性wistar大鼠随机分为对照组、氯化镉组和Rg1+氯化镉组。氯化镉组大鼠按0.5mg(/kg·d)氯化镉腹腔染毒,Rg1+氯化镉组大鼠在0.5mg(/kg·d)氯化镉腹腔染毒2h前进行按100mg(/kg·d)Rg1灌胃处理,连续14天后将动物处死,分离附睾,测定精子数量和质量。分离睾丸,测定金属硫蛋白(MT)含量,TUNEL法检测睾丸切片凋亡情况。结果:氯化镉引起附睾中精子数量减少,质量降低,金属硫蛋白表达增加,睾丸中精细胞凋亡指数增加,而Rg1可以改善附睾中精子质量和数量,减少精细胞凋亡指数,并进一步上调金属硫蛋白表达。结论:人参皂甙Rg1对镉诱导的大鼠睾丸损伤具有保护作用,机制可能与上调金属硫蛋白表达有关。
- 郝杰王应雄何俊琳刘学庆刘孝云陈雪梅黎刚
- 关键词：人参皂甙RG1镉睾丸损伤金属硫蛋白
