广州市医药卫生科技项目(201102A212001)
- 作品数：9 被引量：67H指数：5
- 相关作者：罗广平姬艳丽张润青骆宏赵阳更多>>
- 相关机构：广州血液中心广东省医学科学院更多>>
- 发文基金：广州市医药卫生科技项目广东省自然科学基金广州市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 高通量红细胞血型基因分型的多重连接依赖的探针扩增技术在一例抗Di^a新生儿溶血病诊断中的应用被引量：14
- 2012年
- 目的运用高通量红细胞血型基因的多重连接依赖的探针扩增技术(multiplex ligation-dependent probe amplification,MLPA)辅助诊断一例罕见的由抗Di^a导致的严重核黄疸新生儿溶血病。方法运用传统的血型血清学方法对导致新生儿溶血病相关红细胞血型抗体进行鉴定,运用MLPA对患儿及其父母的超过40种红细胞血型抗原进行基因分型,对鉴定的抗体进行效价分析。结果血型血清学检测表明患儿体内含有针对某种低频抗原的抗体,MLPA基因分析结果提示母婴红细胞MNS血型系统及Diego血型系统抗原不匹配,可能存在抗N或抗Di^a,经进一步的血型血清学检测,证实母亲及患儿血清中存在抗Di^a,并且其母亲血清抗Di^a效价为1:32。结论抗Di^a可引起包括核黄疸在内的严重新生儿溶血病;高通量红细胞血型基因分型的MLPA技术能够协助并有效解决临床疑难样本稀有血型鉴定;针对国人的Di^a阳性的试剂红细胞应该常规应用于日常的抗体筛查工作中。
- 姬艳丽莫春妍魏玲周秀珍张润青赵阳骆宏王贞罗广平
- 关键词：红细胞血型新生儿溶血病核黄疸
- Rh血型系统新生儿溶血病的实验诊断及特殊反应分析被引量：10
- 2012年
- 目的探讨Rh血型系统新生儿溶血病的实验诊断和特殊试验结果分析。方法收集Rh系统新生儿溶血病标本12例,母血标本12例,测定其ABO和Rh血型。新生儿标本行溶血病3项实验,新生儿血清、放散液、母血清行不规则抗体筛选和鉴定实验,并测定相应抗体的效价。结果有1例患儿标本RhD血型放散前定型为阴性,放散后为阳性;患儿标本溶血病3项实验均阳性;引起溶血病的抗体中,IgG抗-D 9例,IgG抗-E检出2例,IgG抗-c合并抗-D1例;母血清中的IgG抗-D效价介于128~2048,IgG抗-E效价介于64~256;患儿血清中游离的IgG抗-D效价介于2~512,IgG抗-E效价介于4~32。结论直接抗人球蛋白实验和放散实验对于诊断Rh系统溶血病具有重要意义;特殊反应要综合分析处理,获取真实结果;临床输血或换血治疗时,要根据患儿体内的抗体情况进行血液选择。
- 骆宏莫春妍张润青赵阳姬艳丽魏玲罗广平
- 关键词：新生儿溶血病RH血型直接抗人球蛋白试验输血
- 弱D25型的血清学和分子生物学特征研究被引量：3
- 2013年
- 目的分析1名RhD抗原弱阳性孕妇的血型血清学及分子生物学特征,探讨其输血策略。方法采用试管法检测RhD血型;Rh血型凝胶定型卡检测C、c、E、e抗原;用直接抗人球蛋白实验凝胶卡进行直接抗人球蛋白实验。采用SSP-PCR方法检测RHD和RHCE基因;用特异性PCR技术检测其RHD基因的合子型;对其RHD基因编码区10个外显子扩增后进行测序分析。结果血型血清学实验显示受检者D抗原弱阳性,Rh其它抗原分型为C-c+E+e+,直接抗人球蛋白实验阴性;SSP-PCR检测其基因型别为ccDEe,基因定型结果与血型血清学一致;RHD基因合子型检测为RHD+/RHD-杂合型,推测该个体单倍型可能为DcE/dce;外显子测序结果显示其编码区341G>A(114R>Q),编码区序列其它部分与正常RHD序列相同。结论该受检者为中国人群中首次发现的弱D25型,其输血策略可参照RhD阴性孕妇同等处理。
- 罗广平骆宏张润青姬艳丽赵阳魏玲莫春妍王贞
- 关键词：RH血型测序
- 多重连接依赖的探针扩增（MLPA）技术在广州地区RhD阴性献血者基因分型研究中的应用
- 目的采用新型Rh血型系统的MLPA检测试剂盒,对广州地区收集的200名RhD阴性献血者进行基因分型。方法采用传统的血型血清学方法,对RhD阴性献血者进行RhD表型鉴定。提取基因组DNA,采用MLPA检测试剂盒对收集的20...
- 姬艳丽魏玲张润青骆宏王贞赵阳莫春妍罗广平
- 关键词：RH血型系统RHD阴性
- 文献传递
- Evan′s综合征患者输血前血清学试验结果分析与输血策略探讨
- 2013年
- 目的分析Evan′s综合征患者输血前的血清学试验结果,探讨该类患者的输血策略。方法根据患者红细胞直接抗球蛋白分型试验结果,选择热放散或氯喹放散法,将放散后的红细胞进行ABO和Rh血型定型,并与自身血清进行吸收试验。热放散液或吸收处理后的血清进行抗体筛选和鉴定试验。根据抗体鉴定结果选择合适的血液,分别采用盐水法、聚凝胺法、LISS/Coomb′s凝胶卡法进行主侧交叉配血试验;对比患者输血前后的血红蛋白,以判定输血效果。结果患者血型均得到正确定型;检出抗-E 2例、抗-S 1例,1例抗体特异性未明确;交叉配血结果相合,输血效果理想。结论 Evan′s综合征患者的血清学试验相对复杂,应当综合分析;要重视血液选择策略,避免出现输血反应。
- 陈漫标叶汉深罗广平张晓敏
- 关键词：血清学试验输血
- 一例罕见P表型个体家系研究被引量：1
- 2012年
- 目的研究1例广东籍罕见P表型的血清学特点及其家系的分子遗传背景。方法用血清学方法鉴定P表型，提取先证者及其家系成员的静脉血基因组DNA，采用PCR方法扩增a-1，4半乳糖基转移酶[r（1，4）galactosyltransferase，A4GALT]基因第3外显子，并对扩增产物进行直接测序分析。此外，用测序方法针对该家系中发现的变异在100名健康献血者中进行筛查。结果先证者及其家系成员中共有5人为P表型，A4GALT基因都存在纯合的点突变c．100G〉A（P．Val34Ile）及组合缺失插入突变c．418—428delllins34（P．Glnl39Trpfs”72）；家系成员中有1人为P。表型，两条等位基因中一条为上述突变型，另一条为野生型。健康献血者中发现5名携带c．100G〉A杂合突变，未发现c．418—428delllins34突变。结论A4GALT基因的纯合缺失插入突变导致无功能的等位基因是该家系罕见P表型的分子遗传基础。测序结果表明P表型的遗传方式为常染色体隐性遗传。
- 魏玲姬艳丽骆宏莫春妍张润青赵阳王贞罗广平
- 广州地区无偿献血者人群中Jk(a-b-)表型筛选及分子遗传学研究被引量：21
- 2012年
- 目的了解广州地区无偿献血者人群中,Kidd血型系统中Jk(a-b-)稀有血型个体的分布频率及分子遗传背景。方法用2 mol/L尿素溶解法,对50 000名广州血液中心无偿献血者中的Jk(a-b-)血型个体进行筛选。用传统的血型血清学方法对筛选到的Jk(a-b-)表型进行确证。随后从静脉血中提取DNA,PCR方法扩增Kidd血型系统编码基因Jk的所有编码外显子,并直接进行测序分析。结果在50 000名无偿献血者中共筛选到10名Jk(a-b-)血型个体,在广州地区无偿献血者人群中其分布频率约为0.02%。在对其中8名先证者基因分型中,共发现了2种基因型,纯合IVS5-1G>A(n=6),杂合IVS5-1G>A/杂合896G>A(299Gly>Glu)(n=2)。结论广州地区无偿献血者人群中,Jk(a-b-)的分布频率高于已报道的北方人群。高频率分布于太平洋波利尼西亚群岛的变异IVS5-1G>A,也是本人群中最常见的基因变异。
- 姬艳丽魏玲王贞赵阳骆宏张润青莫春妍罗广平
- 关键词：KIDD血型基因测序
- 高通量MLPA基因分型技术在1个D^(el)表型家系基因鉴定中的应用被引量：3
- 2012年
- 目的对1个Del表型家系作基因鉴定。方法运用血型血清学方法对先证者及其家系的3名成员作RhD及相关血型抗原鉴定;提取先证者及其父母和妹妹的静脉血DNA。运用高通量红细胞血型基因的多重连接依赖探针扩增技术(MLPA)对先证者及其他成员血型基因作定性及定量分型;用PCR产物直接测序方法对发现的变异作确认。结果血型血清学检测:先证者为Del表型,其他3名家系成员为正常的RhD阳性个体。MLPA基因分型:先证者有2条包含1227G>A突变位点的RHD等位基因,而3名家系成员有1条包含1227G>A突变位点的RHD等位基因及1条正常的RHD等位基因。结论高通量红细胞血型基因分型的MLPA技术能够对Del表型作明确的基因鉴定,有助于节约宝贵的RhD阴性血液。
- 姬艳丽赵阳王贞张润青骆宏莫春妍魏玲罗广平
- 关键词：红细胞血型RH血型
- 多重连接依赖的探针扩增(MLPA)技术在广州地区RhD阴性献血者基因分型研究中的应用被引量：7
- 2012年
- 目的采用新型Rh血型系统的MLPA检测试剂盒,对广州地区收集的200名RhD阴性献血者进行基因分型。方法采用传统的血型血清学方法,对RhD阴性献血者进行RhD表型鉴定。提取基因组DNA,采用MLPA检测试剂盒对收集的200名RhD阴性献血者进行RHD基因分型。对于不能明确分型的标本,进行RHD基因直接测序分析。结果在200名RhD阴性献血者中,采用MLPA方法对196名进行了明确的基因分型。其中,127名为RHD基因缺失(占63.5%);仅检测到包含RHD1227A突变的DEL等位基因有41例,其中38例包含杂合等位基因,其余3例包含纯合等位基因;仅检测到RHD(1-2)-CE(3-9)-D(10)等位基因的有23例,其中19例杂合,4例纯合;3例包含2种不同的RHD等位基因(1条为RHD(1-2)-CE(3-9)-D(10),另1条为RHD1227A);其余2例分别包含杂合的DFR-2(RHD-CE(4)-D)及弱D15型(RHD845A)等位基因。在其余4例直接测序分析的标本中,2例包含杂合的RHD711delC突变;1例1条等位基因为MLPA检测到的包含RHD1227A突变的DEL等位基因,另1条为包含711delC突变的RHD等位基因;其余1例的1条等位基因为MLPA检测到的RHD(1-2)-CE(3-9)-D(10),另1条为包含新突变的RHD等位基因(1154G>T,385Gly>Val)。结论 MLPA检测试剂盒是适用于中国人群的1种快速、有效的高通量基因分型方法,能够对中国人群常见的各种RHD基因型进行明确分型,适用于参比实验室相关疑难标本的基因分型检测。也可应用于中国人群常见的Del表型检测,使Del表型患者不必再输注RhD阴性血液,节约稀有的RhD阴性血液资源。
- 姬艳丽魏玲张润青骆宏王贞赵阳莫春妍罗广平
- 关键词：RH血型系统RHD阴性
- 类孟买血型两例的分子遗传机制研究被引量：11
- 2012年
- 目的探讨2例类孟买血型个体的分子遗传机制。方法先证者为女性，在无偿献血时发现ABO血型正反定型不符，遂将其本人及家系成员（包括先证者爷爷、奶奶、父亲、母亲、弟弟、妹妹）血液标本（EDTA抗凝）和唾液标本送至广州血液中心进一步鉴定。采用常规血清学方法对先证者及其家系成员血液标本进行血型鉴定，对唾液标本进行ABH血型物质的检测；利用PCR扩增先证者及家系成员的FUT1和FUT2基因编码区和ABO血型基因第6、7外显子编码区，对PCR产物进行直接测序后分析结果，对FUT1基因的缺失突变进行克隆测序分析。结果先证者及其弟弟为类孟买血型，其他家系成员中未发现类孟买血型；直接测序结果显示先证者和弟弟的FUT1基因为第547—552位碱基AG缺失、880—882位碱基TT缺失的杂合型；其爷爷和父亲为单链880．882位碱基TT缺失杂合型，母亲和妹妹为单链547—552位碱基AG缺失杂合型；克隆测序结果证实上述缺失分别发生在FUT1基因编码区第547-548位和第881—882位；先证者和弟弟的FUT2基因编码区均存在第390位C〉T、第749位G〉A突变，家系成员中还存在第418位A〉T突变。结论FUT1基因不同位点双碱基缺失杂合可导致类孟买血型，单链缺失突变杂合型的ABO表型正常；发现了FUT2基因中3个新的突变位点。
- 骆宏林健伟林树德张润青姬艳丽罗广平赵阳魏玲莫春妍
- 关键词：ABO血型系统突变
