广州市医药卫生科技项目(201102A212009) 作品数:3 被引量:24 H指数:3 相关作者: 谭守勇 刘志辉 孟繁荣 童莉 张言斌 更多>> 相关机构: 广州市胸科医院 广州医科大学 更多>> 发文基金: 广东省科技计划工业攻关项目 广州市医药卫生科技项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
广州市越秀区及海珠区非结核分枝杆菌流行状况 被引量:10 2015年 目的:了解广州市越秀区及海珠区非结核分枝杆菌流行状况。方法:回顾性对广州市越秀区、海珠区两个结核病防治所2010-2012年就诊的痰抗酸杆菌涂片阳性可疑肺结核患者,进行痰结核分枝杆菌培养及菌种鉴定,分析肺结核诊断的准确性。结果:2010-2012年共2 014例痰涂片及培养抗酸杆菌阳性,1 630例(80.9%)为结核分枝杆菌复合群(MTC),384例(19.1%)为非结核分枝杆菌(NTM)。2010-2012各年度痰培养抗酸杆菌阳性菌株中,NTM分离率分别为17.6%、17.1%、21.2%。384株NTM中共有79株进行了NTM菌种或复合群鉴定,快速生长型分枝杆菌占50.6%,慢速生长型分枝杆菌占49.4%。结论:广州市越秀区、海珠区可疑肺结核患者痰标本中NTM分离率为19.1%。临床上对涂阳肺结核患者疗效欠佳时,应及时排除非结核分枝杆菌肺病。 童莉 谭守勇 刘志辉 黄业伦 黎燕琼关键词:分枝杆菌 流行病学 抗酸染色阳性痰涂片刮削物扩增分枝杆菌rpoB基因的初步探索 被引量:4 2014年 摘要目的:探讨直接从抗酸染色阳性痰涂片刮削物中扩增分枝杆菌rpoB基因的方法。方法:(1)使用引物Primerl:5’-CGTACGGTCGGCGAGCTGATC-3’,与Primer2:5’-AGGGGTITCGATCGGGCACATC-3’;Primer3:5’-TGqTCTICAAGGAGAAGCG-3’.与Primer4:5’-TCGTCGGCGGTCAGGTA-3’分别扩增18株临床分离结核分枝杆菌的rpoB基因,以检测引物设计的合理性。(2)分别采用普通PCR、TouchdownPCR、巢式PCR、二次PCR对直接从3+~4+抗酸染色痰涂片刮削物中提取的80例分枝杆菌基因组DNA进行rpoB基因扩增。(3)对80例抗酸染色痰涂片刮削物基因组DNA行实时荧光定量PCR以检测其拷贝数。(4)对18例临床分离菌株基因组DNA10^0、10^1、10^2、10^3、10^4、10^5、10^6、10^7倍稀释物行实时荧光定量PCR与普通PCR(Primerl与Primer2。Primer3与Primer4),以比较二者检出限。结果:(1)两对引物对18株临床分离结核杆菌rpoB基因扩增均有明亮目的条带,并经测序证实。(2)80例痰涂片刮削物基因组DNA扩增均未见目的奈带。(3)80例痰涂片刮削物基因组中.其中20例DNA的拷贝数为10z~10。copies/μL,60例DNA的拷贝数为10^4~10^5copies/μL。(4)两组引物能够扩增出rpoB基因的最高稀释倍数分别为10^4、10^5倍,其对应的荧光定量PCR检测拷贝数分别为10。copies/IxL、107copies/μL。结论:从抗酸染色阳性痰涂片刮削物中扩增分枝杆菌rpoB基因理论上可行,但在实际操作中尚存在-些问题有待进一步探索。抗酸染色涂片制作过程对基因提取及扩增的影响,痰涂片刮屑物基因组提取过程中多次离心造成的DNA量部分丢失均可能是本实验失败需要考虑的因素之-。 童莉 孟繁荣 刘志辉 饶运帷 高俊文 牛群 雷杰 谭守勇关键词:痰涂片 RPOB基因 我国利福平敏感结核杆菌rpoB基因利福平耐药决定区序列循证分析 被引量:12 2013年 目的:了解我国利福平敏感结核杆菌rpoB基因利福平耐药决定区(rifampicin resistancedetermining region,RRDR)序列的多态性特征。方法:采用"rpoB AND Mycobacterium tuberculosis AND(China OR Hong Kong OR Macon OR Taiwan)"检索策略在Pubmed数据库中检索文献,循证分析Pubmed数据库中截止至2013年4月30日有关我国结核杆菌rpoB基因突变分子特征的研究文献。结果:36篇文献纳入研究,5 136株利福平敏感结核杆菌rpoB基因RRDR序列信息得以分析,38株(0.74%)rpoB基因RRDR序列呈现基因突变,涉及8个位点,分别为511(11株)、533(7株)、531(6株)、526(5株)、516(4株)、518(2株)、519(2株)、521(2株)等,其中1株涉及511/526双位点。结论:我国结核杆菌rpoB基因RRDR序列存在沉默突变现象,并非所有RRDR序列改变均与结核杆菌利福平药物敏感性有关。 孟繁荣 刘志辉 谢贝 张言斌 谭守勇关键词:分枝杆菌 结核 利福平 RPOB基因