博士科研启动基金(06-315)
- 作品数：2 被引量：14H指数：2
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- 一种改进的对虾白斑综合征病毒提纯方法被引量：5
- 2009年
- 对虾白斑综合征病毒（WSSV）的囊膜蛋白在提纯的过程中易脱落，用传统的密度梯度离心方法不易获得完整的病毒粒子，对传统的蔗糖密度梯度离心方法加以改进后，可以获得大量完整的病毒粒子。用患白斑综合征病毒病的中国对虾鳃制备WSSV粗提液，感染螯虾（Cambarus proclarkii），选取25％的蔗糖溶液用作病虾鳃的匀浆液，然后经蔗糖密度梯度离心，分取各带负染后电镜观察，大量完整的病毒位于46％-52％蔗糖梯度之间，病毒粒子末端带有很长的尾；而病毒裸露的核衣壳位于40％～46％蔗糖梯度之间；在57％～62％之间观察到较多完整病毒粒子和少量细菌。实验结果表明改进的病毒提纯方法较好，可得到大量完整的带囊膜的病毒颗粒。
- 姜有声战文斌程顺峰王世表
- 关键词：白斑综合征病毒病毒提纯完整病毒
- 对虾白斑综合征病毒囊膜蛋白VP19的单克隆抗体制备及其定位被引量：9
- 2009年
- 为了更好地研究对虾白斑综合征病毒(WSSV)蛋白VP19在WSSV感染过程中的作用,利用VP19的单克隆抗体直接对VP19进行了定位。从患白斑综合征的中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)鳃丝中提取WSSV,将提纯的WSSV经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离,然后洗脱提纯其病毒蛋白VP19并免疫Balb/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞和骨髓瘤细胞融合,用间接免疫荧光技术(IFAT)和Western-Blot技术筛选出1株阳性杂交瘤细胞,将检测出的阳性杂交瘤细胞经有限稀释法克隆,研制出抗VP19的单抗,再利用免疫胶体金技术对病毒蛋白VP19进行定位,结果显示,胶体金粒子位于WSSV病毒的囊膜上,说明病毒蛋白VP19位于WSSV囊膜上。
- 姜有声战文斌程顺峰王世表
- 关键词：对虾白斑综合征病毒单克隆抗体
