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上海市科学技术委员会科研基金(10411955100)
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2
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RNA恒温扩增技术快速检测痰标本中结核分枝杆菌的研究
被引量:31
2011年
目的用RNA恒温扩增实时检测(SAT—TB)快速检测临床痰标本中的MTB,并对检测效果进行评估。方法痰标本取自上海市肺科医院的肺结核患者177例(肺结核组)和其他肺部疾病患者67例(对照组),采用SAT.TB检测和罗氏培养法同时对244份痰标本进行检测,用MTB核酸扩增荧光体外检测试剂盒(PCR—TB)检测2种检测方法结果不符的标本。分析SAT—TB与罗氏培养的符合率及两种方法对结核病患者的检出率。两种检测方法的检出率比较采用χ2检验。结果以罗氏培养作为金标准,则SAT.TB检测的敏感度和特异度分别为92%(71/77)和86%(143/167),SAT—TB检测与罗氏培养结果的符合率为88%(214/244)。罗氏培养法和SAT—TB检测对临床确诊的肺结核患者痰标本的阳性检出率分别为42%(75/177)和54%(95/177),两者的阳性率比较,差异有统计学意义(χ2=4.527,P〈0.05)。结论SAT—TB检测痰标本中的MTB,具有快速、敏感度和特异度较高的优点,可提高痰标本中MTB的检出率。
崔振玲
沙巍
黄晓辰
郑瑞娟
居金良
胡忠义
关键词:
核酸扩增技术
免疫磁珠荧光量子点技术检测结核分枝杆菌的方法学研究和初步评估
被引量:1
2013年
目的建立免疫磁珠荧光量子点技术检测MTB的方法,探讨最佳检测条件并进行初步评估。方法以MTB标准株H37Rv、12种非结核分枝杆菌(NTM)标准株及3种非分枝杆菌为检测对象,免疫磁珠和功能化荧光量子点作用为对照组。利用湿化学方法制备纳米磁珠和荧光量子点,分别与MTB结合肽H8偶联,获得同时与H37Rv作用的免疫磁珠和功能化荧光量子点,形成三元复合物结构,通过测量荧光值及荧光显微镜观察判定样品中是否存在MTB,建立纳米技术检测MTB的新方法,进一步探讨免疫磁珠和功能化荧光量子点的最佳检测浓度及作用时间。利用菌悬液和模拟痰标本,对该检测方法的检测下限和特异度进行初步评估。结果偶联的免疫磁珠和功能化荧光量子点均能与H37Rv结合,镜下可见其与H37Rv作用的三元复合物,实验组与对照组的荧光值比值约为4:1;免疫磁珠和功能化荧光量子点最佳检测浓度均为100mg/L,最佳作用时间为2h;H37Rv菌悬液和模拟痰标本检测下限均为10。CFU/ml;特异度检测结果,3种非分枝杆菌在显微镜下均未见红色荧光,荧光值小于对照组,为阴性;12种NTM菌悬液和模拟痰标本检测时,仅副偶发分枝杆菌、金色分枝杆菌、耻垢分枝杆菌和偶发分枝杆菌在显微镜下可见红色荧光,荧光值与对照组的比值均〉2,判断为阳性,其余均为阴性。结论免疫磁珠荧光量子点技术检测技术有可能成为检测MTB的新方法,但其临床应用价值尚有待进一步评估。
马慧
胡忠义
王祎龙
秦莲花
陈海珍
陆俊梅
杨华
关键词:
分枝杆菌
结核
量子点
免疫磁珠
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