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四川省应用基础研究计划项目(2006J13-030)
作品数:
1
被引量:3
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相关作者:
雷军
张翔
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陈大斌
谢勇恩
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周岐新
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雷军
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2008
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细菌CTX-M型超广谱β-内酰胺酶基因定点突变对酶活性的影响研究
被引量:3
2008年
目的构建CTX-M型超广谱β-内酰胺酶基因突变体,比较突变前、后酶活性的变化,进一步阐明酶的分子结构特征和生化特性。方法利用重叠延伸PCR定点诱变技术将CTX-M型超广谱β-内酰胺酶基因Ser240(丝氨酸)AGC定点突变为Gly240(甘氨酸)GGC,分别构建CTX-M型酶的原核重组表达载体及其突变表达载体,重组载体经酶切鉴定和DNA测序鉴定后,转化大肠埃希菌JM109,比较突变前、后酶活性的改变。结果酶切鉴定和DNA测序鉴定表明CTX-M型酶的原核重组表达载体及其突变表达载体构建成功,转化大肠埃希菌JM109后,发现含野生型CTX-M基因的重组菌其酶活性与来源菌株相近,而含突变型CTX-M基因的重组菌未检测到酶活性。结论Ser240对于维持CTX-M型超广谱β-内酰胺酶活性具有重要作用。
陈大斌
谢勇恩
凌保东
周岐新
张翔
雷军
关键词:
超广谱Β-内酰胺酶
定点突变
酶活性
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