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广州市医药卫生科技项目(201102A212029)

作品数:3 被引量:11H指数:2
相关作者:刘青华郭奇峰徐绘华刘四红严瀚更多>>
相关机构:广州市第一人民医院广州医科大学更多>>
发文基金:广东省科技计划工业攻关项目广州市医药卫生科技项目国家自然科学基金更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 3篇中文期刊文章

领域

  • 3篇医药卫生

主题

  • 3篇细胞
  • 2篇形态发生蛋白
  • 2篇细胞生长
  • 2篇细胞生长因子
  • 2篇纤维细胞
  • 2篇纤维细胞生长...
  • 2篇腺病
  • 2篇腺病毒
  • 2篇碱性成纤维
  • 2篇碱性成纤维细...
  • 2篇碱性成纤维细...
  • 2篇骨形态
  • 2篇骨形态发生蛋...
  • 2篇成骨
  • 2篇成纤维细胞
  • 2篇成纤维细胞生...
  • 2篇成纤维细胞生...
  • 1篇增殖
  • 1篇肉瘤
  • 1篇双基因共表达

机构

  • 2篇广州市第一人...
  • 1篇广州医科大学

作者

  • 3篇徐绘华
  • 3篇郭奇峰
  • 3篇刘青华
  • 2篇刘四红
  • 1篇梅勇
  • 1篇向帅
  • 1篇厉新妍
  • 1篇严瀚
  • 1篇容智敏

传媒

  • 3篇中华显微外科...

年份

  • 2篇2013
  • 1篇2011
3 条 记 录,以下是 1-3
排序方式:
重组腺病毒体外诱导山羊骨髓间充质干细胞成骨分化的研究被引量:6
2013年
目的探讨腺病毒介导骨形态发生蛋白2(BMtr2)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)双基因体外转染山羊骨髓间充质干细胞(BMSCs)后目的基因表达与诱导成骨情况。方法从2岁健康雌性山羊髂骨处骨穿抽取骨髓2ml,利用密度梯度离心法分离培养山羊BMSCs,将前期构建好的腺病毒载体Ad—BMP2一bFGF、Ad—BMP2分2组,以MOI=5000分别转染BMSCs,每2d用ELISA法检测BMP2和bFGF的表达情况,每周用ALP染色试剂盒及定量试剂盒检测ALP表达情况。结果Ad—BMP2-bFGF转染BMSCs48h后,目的蛋白已有显著表达(BMP2为3996.22pg/ml、bFGF为1352.15pg/m1),第6天达到高峰(BMP2为5146.63Pg/ml、bFGF为1434.75Pg/m1),与未转染组比较差异有统计学意义(P〈0.05),3周后细胞呈现明显的成骨改变,All。P活性明显增高(266mol/L),Ad—BMP2-bFGF组ALP表达量约为Ad—BMP2组的1.5倍(P〈0.05)。结论经Ad—BMP2-bFGF转染的BMSCs具有持续高水平目的蛋白表达活性,转染后的BMSCs表现出明显的成骨活性.成骨活性明显强于Ad—BMP2组。
严瀚徐绘华郭奇峰刘青华刘四红娄盼梅勇
关键词:重组腺病毒骨形态发生蛋白2碱性成纤维细胞生长因子骨髓间充质干细胞
成骨诱导双基因共表达腺病毒载体的构建被引量:2
2011年
目的探讨用一条Link序列T2A连接骨形态发生蛋白-2(BMP-2)基因与碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因构建含目的基因的腺病毒载体的可行性。方法先从cDNA中扩增得到全长BMP-2和bFGF基因片段.再接于Link序列T2A的两端,通过T2APeptide的互补,延伸得到BMP2-T2A—bFGF的全长PCR产物,利用上游引物的BglⅡ酶切位点和下游引物的EcoRV酶切位点将其插入到pShuttle—IRES载体中,酶切、测序鉴定;利用同源重组技术将目的基因表达框从穿梭质粒转移到腺病毒载体,鉴定阳性克隆;将PacI线性化后的腺病毒载体转染到293A细胞,观察GFP表达,PCR鉴定后进行大量扩增,并用CsCl梯度离心法进行纯化;测量A260计算病毒感染滴度。结果克隆得到的BMP-2与bFGF基因测序正确,经BglⅡ和EcoRV双酶切得到的BMP2-bFGF2个基因全长序列完全克隆到穿梭质粒和重组腺病毒载体质粒中;转染293A细胞2周后观察到明显的GFP聚集表达,即病毒包装成功,扩增纯化后滴度为3.6×10^11 VP/ml。结论经酶切鉴定BMP-2与bFGF双基因共表达腺病毒载体构建成功。
徐绘华郭奇峰厉新妍刘青华向帅娄盼
关键词:骨形态发生蛋白-2碱性成纤维细胞生长因子双基因共表达腺病毒
新型钌(Ⅱ)配合物抑制骨肉瘤MG-63细胞增殖并诱导其凋亡被引量:3
2013年
【摘要】目的通过体外实验探讨新型钌(Ⅱ)多吡啶配合物△-[Ru(phen)2MCMIP]2+(△-1)对人骨肉瘤细胞MG-63株增殖及凋亡作用。方法CCK-8法检测经0.00、12.50、25.00、50.00、100.00、150.00Ixmol/LA-1作用24、48、72h后,MG-63细胞的增殖情况;流式细胞术检测经0.00、25.00、50.00、100.00μmol/LA-1作用24h后,MG-63细胞的凋亡及周期变化。结果A.1可明显抑制人骨肉瘤MG-63细胞增殖,并呈明显剂量和时间依赖性;24、48、72hICs0分别为57.80μmol/L、45.27Ixmol/L、32.51μmol/L;流式细胞术检测得不同浓度△-1作用24h后,细胞早期凋亡比例从(1.06±0.12)%上升至(37.10±1.25)%,细胞周期被阻滞在G0/G1期。结论Δ-1能抑制MG-63细胞增殖,诱导细胞凋亡,并将细胞周期阻滞在G0/Gl期。
容智敏郭奇峰刘四红刘青华徐绘华
关键词:MG-63细胞增殖细胞周期
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