安徽省人才开发基金(2005Z030)
- 作品数：3 被引量：12H指数：3
- 相关作者：赵志荣沈际佳朱绍春刘淼雷黎更多>>
- 相关机构：安徽医科大学安徽中医学院第一附属医院更多>>
- 发文基金：安徽省人才开发基金安徽省自然科学基金安徽省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 日本血吸虫Sj-Ts4样蛋白基因的克隆、表达和初步鉴定被引量：4
- 2007年
- 目的为了寻找血吸虫病新的免疫学诊断候选分子,在大肠杆菌中高效表达日本血吸虫Sj-Ts4样融合蛋白。方法提取日本血吸虫成虫RNA,设计引物,用RT-PCR法扩增出日本血吸虫Sj-Ts4样蛋白基因编码序列,T载体连接,将其亚克隆入PGEX-5X-1载体中,经酶切、测序证实正确后,转化入大肠杆菌DH5α并用IPTG对该重组菌诱导表达,SDS-PAGE和Western blot方法观察表达结果。结果RT-PCR法扩增出一条大小约为870bp的片段,表达质粒PGEX-5X-1-SjTs4经双酶切和以该重组质粒为模板进行PCR扩增,均可获得一条与PCR产物一致的DNA片段,诱导表达后,经SDS-PAGE可见一条约58ku大小的GST融合蛋白条带,并可与抗GST特异性抗体反应。结论本实验成功地克隆了日本血吸虫Sj-Ts4样抗原的编码基因,并在原核细胞中进行表达,为进一步验证其免疫诊断价值奠定了基础。
- 潘丽红朱绍春任翠平王晓楠赵志荣刘淼汪学龙沈际佳
- 日本血吸虫29000膜外蛋白的表达和纯化及功能初步鉴定被引量：3
- 2008年
- 随着血吸虫病防治工作的不断深入及血防形势的改变，血吸虫病流行的特点对本病的诊断提出了更高的要求。因表膜蛋白更易接触机体的免疫系统，刺激机体产生相对应的抗体，大多研究都支持虫体的表膜蛋白较其他蛋白有较好的诊断价值。本课题组将日本血吸虫（Schistosoma japouicam，sj）中国大陆株29000表膜蛋白的膜外区基因体外重组并表达，纯化后初步鉴定其免疫原性和免疫反应性，
- 任翠平刘淼赵志荣雷黎朱绍春王晓楠沈际佳
- 关键词：日本血吸虫膜外区纯化血吸虫病中国大陆株
- 人源性抗日本血吸虫噬菌体抗体库的构建及初步鉴定被引量：5
- 2007年
- 目的利用噬菌体抗体展示技术构建人源性抗日本血吸虫Fab段噬菌体抗体库并进行初步鉴定。方法RT-PCR从对血吸虫感染有一定抗性成年人外周血淋巴细胞中扩增出人IgG轻链和重链Fd段基因片段,将其克隆入PComb3中,构建人源性Fab段噬菌体抗体库,并用限制性内切酶酶切、序列分析、DOT-BLOT以及SDS-PAGE等方法对噬菌体抗体库进行初步鉴定。结果噬菌体抗体库的滴度为6.2ⅹ1011/L,库容量为1.2ⅹ107,酶切鉴定结果显示噬菌体抗体库轻重链重组率达到66.6%,测序结果表明克隆入PComb3的是人免疫球蛋白轻链和重链基因,DOT-BLOT实验证明该抗体库表达了人源性的抗体,而SDS-PAGE证实了免疫球蛋白Fab段的可溶性表达。结论成功地构建了人源性抗日本血吸虫Fab段噬菌体抗体库,为筛选人源性抗日本血吸虫的抗体、研究这些抗体的特性和功能奠定了基础。
- 雷黎赵志荣朱绍春刘淼卞茂红张林杰沈际佳
- 关键词：日本血吸虫人源性噬菌体抗体库
