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鼻型结外NK/T细胞淋巴瘤与EB病毒感染的相关性被引量：4: 2014年; 目的检测鼻型结外NK/T细胞淋巴瘤(ENKTCL)组织EB病毒(EBV)感染情况,以及EBV基因型别和LMP1编码基因的变异情况,初步探讨ENKTCL的发生与EBV感染的相关性。方法采用原位杂交技术检测75例ENKTCL组织标本中EBER1的转录,筛选鉴定出EBV阳性标本;PCR技术检测EBV 1/2分型,PCR结合限制性片段长度多态性(RFLP)分析检测EBV C/D分型和F/f分型;PCR技术检测LMP1缺失型和野生型基因。结果 75例瘤组织中有67例ERER1阳性,阳性率为89.3%。56例EBV阳性标本的EBV基因分型结果:1型80.4%,2型19.6%;F型87.5%,f型12.5%;C型66.1%,D型33.9%。48例EBV阳性肿瘤组织标本中,野生型8例(16.7%),缺失型40例(83.3%)。结论本地区ENKTCL存在高水平EBV感染;肿瘤组织中感染的EBV的主要基因型别为1型、F型和C型;LMP1基因缺失型可能在ENKTCL的发生中发挥重要作用。; 王海娟李慧王笑峰王云邢晓明罗兵; 关键词：基因型

Toll样受体2基因多态性与胃癌及EB病毒相关胃癌易感性的关系被引量：1: 2015年; 目的：探讨Toll样受体2（TLR2）r s3804099和rs3804100基因多态性与胃癌和EB病毒相关胃癌（EBVa GC）易感性的关系。方法：选用185例EBV阴性胃癌（EBVn GC）组织、41例EBVa GC组织以及100位健康人群外周血标本作为研究对象,采用PCR结合限制性片段长度多态性（RFLP）技术检测TLR2 r s3804099与rs3804100的基因多态性。结果：TLR2 r s3804099基因型和等位基因频率在胃癌组与健康对照组2 2间的差异均有统计学意义（χ=5.617,P=0.018;χ=6.467,P=0.011）,胃癌组C等位基因频率及C等位基因携带者频率均明显高于健康对2 2照组（χ=6.467,P=0.011;χ=4.444,P=0.035）,且与野生TT型相比,CC基因型可增加胃癌的发病风险（OR=3.554,95%CI=1.179~10.715）。TLR2 rs3804100位点的各基因型频率、C等位基因及C等位基因携带者的频率在胃癌组和健康对照组之间差异无统计学意义（P〉0.05）。TLR2 r s3804099与rs3804100位点的各基因型频率、C等位基因频率及C等位基因携带者频率在EBVa GC和EBVn GC两组间的差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论：TLR2 rs3804099基因多态性可能与胃癌发病风险有关,C等位基因可能为胃癌的危险因子,携带C等位基因可能增加胃癌的发病风险。TLR2 r s3804099与rs3804100基因的多态性与EBVa GC的易感性无明显相关性。; 卫美蓉刘颂赵真真王笑峰罗兵; 关键词：胃癌 EB病毒 TOLL样受体

TLR3和TLR4基因多态性与EBV相关胃癌易感性的关系被引量：4: 2015年; 目的探讨TLR3c.1377和TLR4Asp299Gly基因多态性与EBV感染在EBV相关胃癌(EBVassociated gastric carcinoma,EBVa GC)发生中的相关性。方法选用41例EBVa GC组织、62例EBV阴性胃癌(EBV-negative gastric carcinoma,EBVn GC)组织以及64例健康人群血标本作为研究对象,采用PCR结合限制性长度多态性分析(reaction-restriction fragment length polymorphism,RFLP)技术检测TLR3c.1377和TLR4 Asp299Gly基因多态性,并对实验结果进行统计分析。结果 (1)胃癌组与对照组比较TLR3c.1377基因型频率差异有统计学意义(P=0.025),胃癌组T等位基因频率明显高于对照组(45.6%vs.29.7%,P=0.004),T等位基因携带者的患病风险明显高于非携带者(OR=2.435,P=0.008);(2)EBVa GC、EBVn GC以及对照组间TLR3c.1377基因型、等位基因频率差异无统计学意义(P>0.05)。(3)EBVa GC组,EBVn GC组以及正常对照组所有个体TLR4 Asp299Gly基因型均为Asp/Asp纯合子(P>0.05)。结论 TLR3c.1377基因多态性与胃癌易感性有关,T等位基因为胃癌的危险因子,而C等位基因为一保护基因;TLR3c.1377基因多态性与EBVa GC易感性无明显相关。; 韩璐赵真真王笑峰李慧罗兵; 关键词：胃癌 EBV TOLL样受体单核苷酸多态性

青岛地区汉族人群中lncRNA H19的多态性与胃癌和EBV相关胃癌易感性的关系被引量：2: 2019年; 目的:探讨青岛地区汉族人群lncRNA H19单核苷酸多态性(SNP)与胃癌和EBV相关胃癌(EBVaGC)易感性的关系。方法:收集青岛地区汉族人群2015年1月至2018年10月青岛大学附属医院经病理科确诊为胃癌的新鲜组织或陈旧的石蜡包埋胃癌组织病理标本共225例,为胃癌组;依据原位杂交法对EBV编码的小分子非多聚腺苷酸(EBER1)转录检测结果再将胃癌组分为2亚组:EBVaGC组70例,EBVnGC组155例;同时选择青岛大学附属医院门诊健康体检者200例为对照组。提取EBVaGC、EBVnGC组织及健康人群外周血标本的DNA,根据HaploView软件常规设置原则(MAF>0.05;r2>0.8)筛选出rs217727、rs2735971、rs2839698和rs3741216四个H19的TagSNPs。利用Taq-Man MGB等位基因分型试剂盒对各SNP位点基因进行基因分型,并进行基因多态性检测。结果:所取标本的H19 SNPs均符合Hardy-Weinberg平衡。与对照组比较,胃癌组H19 rs217727位点TT基因型的发病风险显著增加(χ~2=9.073, P=0.003, OR=1.999, 95%CI=1.271~3.143),等位基因T的分布也明显增高(χ~2=13.475, P=0.001, OR=1.661, 95%CI=1.266~2.180);H19 rs2839698位点TC、CC基因型人群可显著增加胃癌的发病风险(χ~2=9.407,P=0.002;χ~2=6.517, P=0.011),携带C等位基因人群罹患胃癌的风险明显增加(χ~2=6.163, P=0.013, OR=1.417, 95%CI=1.076~1.867;χ~2=9.542, P=0.02, OR=2.070, 95%CI=1.298~3.302)。但胃癌组H19 rs2735971和rs3741216位点基因多态性与对照组比较差异不明显(均P>0.05);EBVaGC和EBVnGC组中H19的4个位点基因多态性分布差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论:H19rs217727、rs2839698基因多态性可能与胃癌发病风险有关,携带TT基因型C等位基因和人群胃癌的发病风险明显升高;H19SNP的多态性与EBVaGC的发病风险无明显相关。; 卫美蓉王笑峰罗兵; 关键词：胃癌 H19 EB病毒易感性

EBV阳性淋巴瘤组织中EBNA1基因多态性研究: 2014年; EBV与多种人类肿瘤的发生有关，如伯基特淋巴瘤（Burkitt＇s lymphoma，BL）、霍奇金病（Hodgkin＇s disease， HD）、鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma，NPC）以及胃癌等［1］。EBV潜伏感染和细胞转化能力被广泛认为是其致癌的基础，目前已知EBV多种潜伏期基因编码产物可引起细胞转化，其中核抗原家族基因（EBNAs）编码产物中的EBNA1是唯一在所有EBV相关肿瘤中均表达的蛋白，当病毒潜伏感染时，其在基因组的维持、复制和转录过程中发挥重要作用［2］。EBNA1重复序列可通过顺式作用方式抑制抗原递呈细胞对自身的加工处理，使CTL不能识别自身免疫表位从而逃避机体免疫应答［3］。EBNA1由N端（AA 1-89）、甘氨酸和丙氨酸重复序列（AA 90-327）以及C端（AA 328-641）组成，对EBNA1基因变异的分析多集中在C端。Bhatia等［4］和Gutiérrez等［5］根据突变热点AA487的变化及AA466-527之间的变异，将EBNA1基因分为P-ala、P-thr、V-val、V-leu和V-pro 5种亚型。本研究对EBV阳性淋巴瘤组织中EBNA1编码基因多态性进行了检测和分析，旨在探讨EBNA1多态性在EBV阳性淋巴瘤发生中的意义。; 车奎王笑峰王云邢晓明罗兵; 关键词：基因多态性淋巴瘤

EBVaGC肿瘤差异表达的基因表达谱芯片筛选被引量：4: 2013年; 目的应用全基因组表达谱芯片技术,分析EB病毒(EBV)阳性胃癌细胞系与EBV阴性胃癌细胞系基因表达谱差异,筛选EBV相关胃癌(EBVaGC)相关基因。方法采用TRIzol一步法提取3种EBV阳性胃癌细胞系(GT38、PT、SNU-719)和3种EBV阴性胃癌细胞系(SGC7901、HGC-27、MKN-45)总RNA并纯化,逆转录合成cDNA,利用荧光染料(Cy3)标记aaUTP,转录合成标记的cRNA,与Agilent人类全基因组表达谱芯片杂交,扫描荧光信号图像,对芯片原始数据扣除本底和归一化处理,利用倍数差异和t检验计算筛选差异表达的基因,采用上海博豪生物在线分析系统进行基因的功能注释和关联分析,明确差异基因的生物学功能。将处理前后差异表达倍数>2.0或<0.5,且在不同样本间的具有统计学差异的基因判断为差异表达基因。选取特定的差异表达基因,应用实时荧光PCR技术验证芯片结果的可靠性。结果聚类热图及矩阵图分析显示,EBV阳性胃癌细胞系与阴性胃癌细胞系之间表达谱存在明显差异。EBV阳性胃癌细胞系与阴性胃癌细胞系之间有322条基因的表达有明显差异,其中与肿瘤相关的基因涉及转录翻译、信号转导、黏附、细胞增殖和凋亡以及免疫应答等多种生物学过程。选取6条差异基因进行验证,结果有3条基因表达上调,3条基因表达下调,表达趋势与芯片结果一致。结论 EBV阳性胃癌细胞系与阴性胃癌细胞系基因表达存在明显差异,提示EBV感染可影响胃癌细胞相关基因的表达,分析这些差异表达基因有助于阐明EBV感染在EBVaGC发生发展中的作用机制,为进一步筛选EBVaGC特异性肿瘤标记物以及进行生物治疗提供理论依据。; 张岩贾玉平王云王笑峰罗兵; 关键词：寡核苷酸序列分析疱疹病毒4型胃肿瘤基因表达癌基因

Toll样受体基因多态性与EBV感染相关胃癌的易感性被引量：2: 2014年; 目的:探讨Toll样受体(TLR)家族成员TLR2基因启动子区-196^-174 del和TLR4基因Thr399Ile位点多态性与EBV相关胃癌(EBVaGC)及EBV阴性胃癌(EBVnGC)易感性的关系。方法:采用PCR技术检测52例EBVaGC,157例EBVnGC以及94例正常对照人群TLR2-196^-174 del基因多态性;PCR-限制性片段长度多态性(PCR-RELP)技术检测50例EBVaGC,67例EBVnGC以及71例正常对照TLR4 Thr399Ile位点基因型及等位基因分布;分析2种基因多态性与EBVaGC及EBVnGC易感性的关系。结果:胃癌组与对照组比较TLR2(-196^-174 del)基因型分布无显著差异(X2=3.180,=0.075),胃癌组del等位基因频率明显高于对照组(X2=4.875,P=0.027),del等位基因携带者的罹患危险性明显高于非携带者(OR=1.491,95%CI=1.045~2.126);EBVaGC组和EBVnGC组中,TLR2(-196^-174 del)3种基因型以及del等位基因频率差异无统计学意义(X2=0.05,P=0.867)。EBVaGC组、EBVnGC组和正常对照组中均未发现TLR4基因Thr399Ile位点的多态,其基因型分布及等位基因频率差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:TLR2(-196^-174del)等位基因可能是胃癌发病危险因素,且在EBVaGC和EBVnGC两种胃癌发生中产生相同的影响。未发现TLR2(-196^-174 del)和TLR4基因Thr399Ile基因型分布与EBVaGC的易感性相关。; 赵真真石源源刘颂王笑峰罗兵; 关键词：胃癌 EB病毒基因多态性

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山东省自然科学基金(ZR2011CM016)

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