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蓝狐褪黑激素受体1A基因的克隆及序列分析: 2010年; 根据已知的蓝狐MTNR1A基因部分序列和狗的MTNR1A基因序列,借助Primer5.0引物设计软件,结合PCR引物设计优化条件,设计、合成引物。用基于PCR的96孔板筛选方法从蓝狐脾脏cDNA文库中分离获得阳性克隆,其序列与已知的蓝狐MTNR1A基因部分序列有100%的同源性,与已报道的狗、马、猕猴等动物的MTNR1A的cDNA分别有98%、88%、85%以上的同源性,推测该cDNA为MTNR1A的cDNA。蓝狐MTNR1AcDNA的获得,为进一步研究Mel配体-受体间的相互作用和生物功能提供了条件。; 刘琳玲邢秀梅丛波杨福合; 关键词：蓝狐

布氏杆菌L7/L12和OMP31基因克隆及融合表达被引量：2: 2010年; 本研究根据已经发表的布氏杆菌基因序列,选择种间序列极为保守的保护性抗原L7/L12、OMP31基因,依此进行PCR扩增,利用引物上设计好的限制性内切酶酶切位点进行基因重组,构建了PME290-SDLOmp高效表达载体,并转化绿脓杆菌(PAK/2pfs),通过培养得到了表达产物,对表达产物进行SDS-PAGE和Western Blot鉴定,结果符合预期。本项研究为进一步开展布氏杆菌亚单位疫苗的研制奠定了基础。; 李海涛苗利光张广雷刘艳环孙金霞王松王文昊; 关键词：布氏杆菌基因重组表达载体构建融合蛋白

重组牛分支杆菌ESAT-6基因的表达与鉴定: 2009年; 在前期工作的基础上,构建了pGEM-TE-ESAT6重组载体,转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,经诱导表达得到了20kD左右大小的重组蛋白,SDS-PAGE/Western Blot显示该重组蛋白是上清表达。为重组ESAT-6抗原的应用奠定了基础。; 李海涛刘艳环张广雷李庆超王志刚刘慧洋苗利光; 关键词：牛分支杆菌

鹿茸保健饮品对氢化可的松所致小鼠肾阳虚症的影响被引量：1: 2009年; 目的评定鹿茸保健饮品对氢化可的松所致小鼠肾阳虚症的影响。方法将小鼠分为氢化可松所致肾阳虚小鼠模型组及鹿茸保健饮品低剂量、中剂量、高剂量3个剂量组。每天灌胃生理盐水及鹿茸保健饮品1次,连续28d。分别以体重、生殖脏器指数、负重力竭游泳时间和血清、肾脏中一氧化氮含量为指标,观察鹿茸保健饮品对肾阳虚小鼠的作用效果。结果与模型组比较,鹿茸保健饮品各剂量组小鼠的体重明显增加(P<0.05);小鼠睾丸、睾丸-附睾、精液囊-前列腺的指数明显增加(P<0.05);负重游泳时间明显延长(P<0.05);运动后血清和肾组织中一氧化氮的含量明显升高(P<0.05)。结论该鹿茸保健饮品具有促进性腺、附性腺的生长及补肾作用,同时具有明显的抗疲劳功效。; 张宇崔松焕金春爱李静刘东艳杨福合; 关键词：鹿茸抗疲劳一氧化氮

水貂12S rRNA基因序列测定及鼬属动物的系统进化关系: 2009年; 参照紫貂线粒体基因组序列设计引物,通过PCR直接测序的方法获得7个水貂品种线粒体12SrRNA基因全序列。分析显示:水貂12S rRNA基因的全长为960或962 bp,平均碱基组成为37.50%A、17.60%G、22.19%T和22.71%C,检测到8个多态位点,转换与颠换的比值为3∶1。结合GenBank检索得到的11种鼬属动物同源序列,以紫貂为外群,分别用邻接法和最大简约法构建鼬属动物系统进化树,两种进化树的拓扑结构基本一致。结果表明:我国水貂与美洲水貂亲缘较近,与欧洲水貂亲缘较远。; 涂剑锋王雷荣敏徐佳萍章秀婷杨福合; 关键词：水貂 RRNA基因系统进化关系

绿头鸭线粒体ND2基因全序列测定及其研究被引量：5: 2009年; [目的]分析绿头鸭的系统进化关系。[方法]用PCR产物直接测序的方法,测得4只绿头鸭线粒体ND2基因全序列,结合Gen-Bank中已公布河鸭属野鸭ND2基因全序列,基于N-J法和MP法构建河鸭属野鸭系统进化树。[结果]4只绿头鸭ND2基因序列完全一致,其全长为1 041 bp,碱基A、G、T、C含量分别为28.91%、13.35%、20.75%和36.98%,A+T含量约等于C+G;绿头鸭ND2基因序列与斑嘴鸭完全相同,与其他野鸭的同源性较高。系统进化树结果表明,绿头鸭与斑嘴鸭关系密切,两者共享一个单倍型,它们与棕颈鸭、针尾鸭及绿翅鸭同属于进化枝A。[结论]家鸭可能由绿头鸭和斑嘴鸭驯化而来。; 涂剑锋司方方邢秀梅杨福合; 关键词：绿头鸭系统进化树

蓝狐自咬症RAPD标记的筛选: 2011年; 蓝狐是一种珍贵的毛皮动物,自咬症的发生严重影响了蓝狐的生长发育和毛皮质量,给蓝狐养殖业带来了巨大的经济损失。为了寻找与蓝狐自咬症紧密连锁的遗传标记,采用RAPD技术对健康和自咬蓝狐分子标记进行筛选。从120条随机引物中筛选出在健康蓝狐和自咬蓝狐中扩增出差异条带的6条引物,分别为S77、S79、S88、S472、S474、S485。经个体验证,S472、S4852条随机引物在健康蓝狐和自咬蓝狐出现特异条带的个体数量差异达极显著水平(P<0.01),可作为蓝狐自咬症的分子标记,为蓝狐自咬症的深入研究奠定了基础。; 任二军刘宗岳张铁涛邢秀梅杨福合; 关键词：蓝狐自咬症 RAPD 分子标记

牛分支杆菌ESAT-6/Ag85B/Mtb8.4基因与牛IL-2基因融合表达被引量：3: 2010年; 本研究拟制备牛IL-2与牛分支杆菌ESAT-6、Ag85B和Mtb8.4基因的融合蛋白。从患结核病鹿的肺组织中分离牛分支杆菌并提取基因组DNA,PCR扩增牛分支杆菌ESAT-6、Ag85B和Mtb8.4基因;提取牛淋巴细胞,经总RNA提取、RT-PCR得到了IL-2基因片段。经测序鉴定后,将4个目的片段重组,构建原核表达载体,并对表达的融合蛋白进行鉴定。克隆出了牛IL-2,以及牛分支杆菌ESAT-6、Ag85B和Mtb8.4基因;构建了原核表达载体pME290-SDCZ,并表达出了融合蛋白;Western印迹结果证实该重组蛋白能与抗牛分支杆菌多克隆抗体发生特异免疫结合反应。制备了牛IL-2与牛分支杆菌ESAT-6、Ag85B和Mtb8.4融合蛋白,本研究为下一步研制重组牛结核亚单位疫苗奠定了基础。; 李海涛苗利光刘艳环李庆超张广雷孙金霞; 关键词：牛分支杆菌 IL-2基因 MTB8.4 ESAT-6 AG85B 牛结核

Determination and Analysis of Mitochondrial ND2 Gene Sequence of Anas platyrhynchos被引量：4: 2009年; [Objective] The study was to analyze the phylogenesis of Anas platyrhynchos. [Method] Complete sequence of mitochondrial ND2 gene of 4 Anas platyrhynchos was determined by direct DNA sequencing based on PCR products. Combined with ND2 gene sequences of the Anas Linnaeus accessed in GenBank, phylogenetic tree was constructed by Neighbor-joining and maximum parsimony methods. [Result] The ND2 gene sequences of 4 Anas platyrhynchos were identical(1 041 bp in length; the nucleotide contents of A, G, T, and C were 28.91%, 13.35%, 20.75% and 36.98% respectively; A+T content approximated to that of C+G). Sequences of ND2 gene of mallard were same as spotbill duck, and had high homology with others. The phylogenetic trees indicated mallard and spotbilled duck were close in genetic relationship, both shared a haplotype; then Philippine duck, green-winged teal and northern pintail fell into branch ''A". [Conclusion] The domestic duck may be domesticated from mallard and spotbilled duck.; 涂剑锋司方方邢秀梅杨福合

布鲁氏菌L7/L12、OMP31基因的克隆、测序及免疫原性分析被引量：4: 2009年; 为研制鹿布鲁氏菌病工程疫苗,根据已发表的布鲁氏菌核糖体蛋白L7/L12、外膜蛋白OMP31基因设计两对引物进行扩增,PCR产物连接pGEM-Teasy载体,转化DH5α后测序,并进行基因分析。结果从布鲁氏菌疫苗株中克隆出L7/L12和OMP312个目的基因,同源分析L7/L12达97.1%,OMP31达100%,免疫原性分析可作为免疫优势抗原。; 张广雷苗利光刘艳环李海涛李庆超庄风歧; 关键词：布鲁氏菌同源性

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