国家自然科学基金(30872876)
- 作品数：7 被引量：8H指数：2
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- 细胞外基质磷酸化糖蛋白在人牙髓细胞成牙本质分化中的表达被引量：2
- 2009年
- 目的检测人牙髓细胞（human dental pulp cells，hDPC）诱导矿化过程中细胞外基质磷酸化糖蛋白（matrix extracellular phosphoglycoprotein，MEPE）的表达变化，探讨MEPE在人牙髓细胞向成牙本质样细胞分化过程中的可能作用。方法酶消化法分离培养hDPC，取诱导前及矿化诱导7、14、21d的hDPC，实时荧光定量反转录聚合酶链反应（RT-PCR）及蛋白质印迹法检测MEPE、牙本质涎磷蛋白（dentin sialophosphoprotein，DSPP）、牙本质涎蛋白（dentin sialoprotein，DSP）、骨涎蛋白（bone sialoprotein，BSP）和I型胶原的表达，蛋白质印迹法检测蛋白表达。结果hDPC经矿化诱导，MEPE、DSPP、BSP和I型胶原mRNA表达呈时间依赖性上调，MEPE和BSP mRNA在诱导各时间点与对照组间的差异均有统计学意义（P〈0.001），DSPP和I型胶原的mRNA相对系数在诱导第21天分别为（12943.33±3805.73）和（250.55±31.86），与对照组间的差异均具有统计学意义（P〈0.05）。蛋白质印迹法检测显示各矿化标记的蛋白表达均较对照组上调。结论在hDPC诱导成牙本质分化的过程中，MEPE与DSPP、DSP、BSP、I型胶原呈现相似的表达变化趋势，提示MEPE与hDPC的成牙本质分化有关，可作为hDPC向成牙本质样细胞分化的标志。
- 韦曦吴莉萍凌均棨刘路
- 关键词：牙髓细胞
- 重编程及诱导性多能干细胞在再生医学的研究进展
- 2010年
- 细胞分化是由多种特定的分化基因网络相互作用、共同调控完成的生物学过程．如骨髓间充质细胞矿化，是在TGFβ／BMP、Wnt、Notch和Cadherin等信号通路协同作用下．先分化为成骨细胞．随后矿化完成的。
- 刘路韦曦凌均棨
- 关键词：多能干细胞诱导性CADHERIN细胞矿化骨髓间充质
- 人牙周韧带细胞成骨分化的差异表达蛋白质组学研究
- 2009年
- 目的获得人牙周韧带细胞诱导成骨分化通路中的调节蛋白，探讨牙周韧带细胞诱导成骨分化的分子机制。方法应用胶内差异双向电泳结合基质辅助激光解吸电离一飞行时间质谱鉴定等蛋白质组学技术筛选人牙周韧带细胞诱导成骨分化的差异表达蛋白质组。结果获得人牙周韧带细胞诱导成骨分化7d的差异表达蛋白质图谱，确认有显著差异的蛋白质斑点61个，质谱鉴定29个蛋白质，包括细胞骨架蛋白及细胞骨架相关蛋白、膜结合蛋白、核蛋白、基质合成、代谢酶和信号传导等蛋白。其中一组细胞骨架蛋白及细胞骨架相关蛋白同时发生改变，与牙周韧带细胞成骨分化早期细胞骨架重组、有丝分裂和细胞迁移等过程紧密相关。结论建立了人牙周韧带细胞成骨分化早期的差异蛋白质组图谱，为牙周韧带细胞成骨分化的蛋白调控机制进一步研究提供了实验依据。
- 吴莉萍韦曦凌均棨刘路
- 关键词：蛋白质组学电泳凝胶人牙周韧带细胞成骨分化
- 细胞外基质磷酸糖蛋白及其重要的结构片段被引量：1
- 2009年
- 细胞外基质磷酸糖蛋白(MEPE)是一种细胞外基质的非胶原性磷酸化糖蛋白,主要表达于骨组织、牙组织和肾近球小管中,在骨形成矿化以及调节磷吸收方面发挥重要作用。酸性丝氨酸-天冬氨酸-富集细胞外基质磷酸糖蛋白相关性基序与细胞外基质磷酸糖蛋白活性片段/AC-100多肽是MEPE的重要结构域,其生物学功能是近来研究的热点。
- 周晓燕韦曦
- 关键词：细胞外基质磷酸糖蛋白矿化
- 人牙髓细胞向成牙本质细胞分化的蛋白质组学研究被引量：1
- 2009年
- 目的采用蛋白质组学方法分析人牙髓细胞向成牙本质细胞分化过程中细胞蛋白表达谱的改变，揭示特征蛋白在分化过程中所起的作用。方法对人牙髓细胞进行矿化诱导，提取诱导前后细胞总蛋白，双向电泳分离蛋白质，DeCyder V6．0软件确定差异蛋白点，质谱鉴定差异蛋白质。结果双向电泳确认46个差异蛋白质斑点，质谱鉴定20个蛋白斑点，差异蛋白质涉及细胞周期调节、能量代谢、信号传导等细胞生物学过程。结论蛋白质组学技术可高通量筛选与人牙髓细胞向成牙本质细胞分化相关的功能蛋白。
- 韦曦吴莉萍凌均棨刘路
- 关键词：蛋白质组牙髓细胞
- Notch信号通路在牙髓和牙周细胞矿化及组织损伤修复中的调控作用研究被引量：3
- 2010年
- 目的探讨Notch信号通路在人牙髓细胞(dental pulp cells,DPCs)和牙周韧带细胞(periodontal ligament cells,PDLCs)向成牙本质/成骨样细胞分化及组织损伤修复中的调控作用。方法酶消化法分离培养DPCs和PDLCs,实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Notch信号通路相关基因Notch1、Notch2、DLL1和DLL3mRNA在DPCs和PDLCs矿化诱导过程中表达水平变化;建立大鼠牙髓和牙周联合损伤动物模型,观察4周后牙髓牙本质复合体及牙周附着装置修复情况,免疫组织荧光染色检测Notch1在牙髓和牙周联合损伤修复动物体内模型的表达和分布。结果 DPCs和PDLCs经矿化诱导,Notch1、Notch2、DLL1mRNA表达均上调,与对照组间的差异有统计学意义(P<0.05);DLL3mRNA表达上调,与对照组间差异无统计学意义(P>0.05)。免疫荧光示Notch1蛋白在损伤处的新生牙髓及牙周韧带组织细胞浆强表达,而在正常牙髓及牙周韧带组织基本无表达。结论在DPCs和PDLCs诱导成牙本质/成骨分化的过程中,Notch1、Notch2、DLL1呈现相似的表达变化趋势上调,Notch1信号在牙髓及牙周损伤修复的新生组织明显激活,提示Notch信号通路参与DPCs和PDLCs成牙本质/成骨分化,且在牙髓牙本质复合体和牙周附着装置的损伤修复中起重要的调控作用。
- 刘路韦曦吴莉萍凌均棨
- 关键词：牙髓细胞牙周韧带细胞NOTCH信号
- 碱性成纤维细胞生长因子和骨形成蛋白2在牙源性细胞分化中的表达及意义被引量：1
- 2011年
- 目的研究人牙髓细胞(DPCs)和牙周韧带细胞(PDLCs)矿化过程中碱性成纤维细胞生长因子(FGF2)和骨形成蛋白2(BMP2)的表达变化,以及FGF2和BMP2在牙髓牙周损伤修复动物模型中的分布,探讨FGF和BMP信号通路在DPCs和PDLCs向成牙本质/成骨样细胞分化及牙髓牙周组织损伤修复中的调控作用。方法酶消化法分离培养DPCs和PDLCs,取诱导前及矿化诱导14d的DPCs和PDLCs,实时荧光定量反转录聚合酶链反应检测FGF2和BMP2的表达变化并进行统计学分析。建立大鼠牙髓牙周联合损伤动物模型,HE染色观察4周后牙髓牙本质复合体及牙周组织修复情况,免疫荧光检测FGF2和BMP2在新生牙髓及牙周组织的表达和分布。结果 DPCs和PDLCs经矿化诱导,FGF2mRNA表达下调,BMP2mRNA表达上调,与对照组间差异有统计学意义(P<0.05)。免疫荧光示FGF2在新生的牙周韧带组织强表达,在新生牙髓及正常牙髓牙周组织弱表达,BMP2蛋白在损伤处的新生牙髓及牙周韧带组织细胞浆强表达,FGF2和BMP2在正常牙髓及牙周韧带组织均无表达。结论 FGF2和BMP2在DPCs和PDLCs体外成牙本质/成骨分化中可能具备独立的生物学功能,在体内牙齿损伤修复过程中可能存在协同调控作用。
- 刘路韦曦凌均棨吴莉萍
- 关键词：牙髓细胞牙周韧带细胞
