陕西省科技攻关计划(2009K17-06)
- 作品数：3 被引量：5H指数：2
- 相关作者：李昂饶国洲石建峰朱春晖刘瑾更多>>
- 相关机构：西安交通大学口腔医院第四军医大学西安交通大学医学院第二附属医院更多>>
- 发文基金：陕西省科技攻关计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 重组hFOXA2和hPDX1慢病毒载体诱导乳牙牙髓干细胞重编程为胰岛素生成样细胞被引量：3
- 2013年
- 目的:构建重组转录因子hFOXA2和hPDX1慢病毒载体,转染乳牙牙髓干细胞,诱导其向胰岛素生成样细胞(insulin-producing cells,IPCs)分化。方法:酶消化法分离培养人牙髓干细胞(DPSCs),有限稀释法纯化培养,流式细胞术分析细胞表面标志,并进行体外多向分化诱导验证;构建重组Lenti-hFOXA2、Lenti-hPDX1慢病毒载体,Lipofectamine2000转染293T细胞进行病毒包装,通过荧光细胞计数测定病毒感染效率和滴度;以最佳感染复数(MOI)感染牙髓干细胞,诱导其体外重编程为胰岛素生成样细胞,免疫荧光染色测定PDX1、FOXA2及胰岛素原表达,ELISA法检测胰岛素分泌情况。采用SPSS13.0软件包对数据进行统计学分析。结果:体外成功分离培养人DPSCs;细胞表面表达STRO-1(98.01%)、CDl46(98.51%)、CD34(99.54%)和CD45(24.08%)。体外成骨、成软骨、成脂肪诱导分化特异性染色阳性;成功构建重组Lenti-hFOXA2、Lenti-hPDX1慢病毒载体,双酶切和测序鉴定与GenBank的序列完全符合;病毒包装效率分别为(96.15±0.17)%和(95.49±0.21)%,感染滴度约为1.80×108GTU/mL,最佳MOI为20;诱导后的细胞表达胰岛素原、FOXA2和PDX1,胰岛素分泌量为1.92μmol/L,较未诱导组和对照组均显著增高(P<0.01)。结论:DPSCs经重组转录因子慢病毒载体Lenti-hFOXA2、Lenti-hPDX1转染诱导,可启动细胞重编程机制,形成胰岛素生成样细胞,可作为糖尿病基因治疗的种子细胞。
- 石建峰朱春晖刘瑾孙俊毅饶国洲李昂
- 关键词：乳牙牙髓干细胞诱导分化胰岛素分泌
- 安康地区蒿坪、流水两地氟牙症流行病学调查被引量：2
- 2011年
- 目的:了解安康地区所辖蒿坪和流水两地氟牙症流行状况和临床表现特征,为进一步的氟牙症和氟中毒的防治工作提供参考依据。方法:2009年11月以问卷调查和临床检查的形式对蒿坪、流水两镇681名10～22岁青少年进行氟牙症的流行病学调查。病变程度采用Dean氟牙症分度法进行分度;同时采集当地饮用水,茜素磺酸锆目视比色法进行氟含量检测。结果:蒿坪、流水两镇受检者中共检出628例氟牙症病人,患病率为92.22%。蒿坪、流水两镇饮用水氟含量分别为0.38 mg/L及0.98mg/L,均未超过国家饮用水含氟标准(≤1.0mg/L)。氟牙症病变主要集中于前牙唇面的切、中1/3,而颈1/3较少累及。结论:安康地区氟牙症流行状况与饮用水无明显相关性,应考虑其他引起氟牙症流行的相关因素。
- 温宣邓邦莲薛洋杨婷孟蕾王培欢段小红
- 关键词：氟牙症氟中毒氟含量
- 人牙周膜干细胞的生物学活性研究
- 2013年
- 目的体外分离培养、鉴定人牙周膜干细胞（PDLSCs）并探讨其生物学活性的研究.方法应用酶解组织块法分离培养PDLSCs,应用相差显微镜观察细胞表型变化;HE染色及免疫组化染色进行形态学检测;流式细胞术检测细胞表面CD29,CD44,CD105,CD34,CD45和HLA-DR的表达;诱导成骨细胞、成脂肪细胞及成神经元分化,并进行特异性染色分析,扫描电镜观察,检测PDLSCs生物学活性.结果 体外成功分离培养人PDLSCs,HE染色显示细胞均一性好;角蛋白阴性,波形蛋白和CD44阳性表达;流式细胞仪结果显示PDLSCs表面高表达CD29（92.47%）,CD44（96.42%）和CD105（96.40%）;CD34,CD45和HLA-DR阴性表达;诱导成骨结果显示PDLSCs有较强的成骨活性,茜素红染色诱导组有明显的矿化结节形成,ALP染色阳性;成脂诱导PDLSCs有较强的成脂活性,油红＂O＂脂肪染色阳性;成神经元诱导后NSE免疫组化染色呈阳性.结论 PDLSCs在体外具有多向分化的潜能.
- 石建峰毕文超张晨饶国洲李昂
- 关键词：细胞培养流式细胞术人牙周膜干细胞多向分化
