江苏省自然科学基金(BK2008171)
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
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- 相关机构：苏州大学复旦大学更多>>
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- pIRES2-EGFP-4-1BBL质粒的导入对减毒沙门菌生物学行为的影响被引量：2
- 2009年
- 目的探讨真核表达质粒pIRES2-EGFP-4-1BBL转入对减毒鼠伤寒沙门菌SL3261生物学行为的影响。方法将真核表达质粒pIRES2-EGFP-4-1BBL通过两步电转化获得含pIRES2-EGFP质粒的SL3261,接种于LB培养基中观察其生长特性、革兰染色观察其形态和血清凝集试验检测其表面抗原变化。利用该重组菌体外感染HepG2细胞,观察其对细胞的侵袭能力的影响。结果含pIRES2-EGFP-4-1BBL质粒SL3261在体外生长繁殖较原细菌慢,革兰染色呈阴性丝状菌体,含pIRES2-EGFP-4-1BBL质粒的SL3261 A-F多价、O4菌体和H1鞭毛抗原和SL3261完全一致;体外感染HepG2能力,SL3261为201±46 CFU/200HepG2细胞,SL3261-pIRES2-EGFP为163±37,而SL3261-pIRES2-EGFP-4-1BBL为158±32,3组间的差异无统计意义(P>0.05)。结论导入pIRES2-EGFP-4-1BBL质粒对SL3261的生长和形态有部分影响,而表面抗原以及侵入HepG2细胞的功能不变,该结果为含pIRES2-EGFP-4-1BBL质粒SL3261疫苗菌的进一步研究奠定了实验依据。
- 仉元亭叶建新陈卫昌张学光任大明
- 关键词：减毒沙门菌生物学行为
- 口服含4-1BBL基因质粒疫苗菌对大鼠免疫功能的影响
- 2009年
- 利用减毒沙门氏菌为载体将4-1BBL体内转染抗原提呈细胞,观察体内4-1BBL基因转染对大鼠免疫功能的影响。构建含pIRES2-EGFP-4-1BBL质粒的减毒沙门氏菌(疫苗菌),通过体外感染HepG2细胞观察疫苗菌的侵袭功能和携带外源基因能力,验证疫苗菌作为4-1BBL基因转染载体的作用。疫苗菌2周内连续灌服大鼠3次,末次灌服后14 d心脏取血处死,RT-PCR和荧光显微镜检测报告绿色荧光蛋白(GFP)在脾脏细胞中的转录表达,流式细胞仪检测外周血和脾脏中细胞表型变化。疫苗菌在体外能成功的将外源基因携带至HepG2细胞进行表达,灌服疫苗菌的大鼠外周血和脾脏细胞4-1BBL和4-1BB表达明显升高,外周血中CD3+、CD3+CD8+和CD3+CD25+,脾脏细胞中CD3+CD8+、CD3+CD25+也有明显的增高。表明含4-1BBL基因的减毒沙门氏疫苗菌能实现体内基因转染,4-1BBL的高表达能增强机体的细胞免疫功能。
- 叶建新仉元亭陈卫昌张学光任大明
- 关键词：4-1BBL减毒沙门氏菌免疫功能
- 实验性大肠癌对免疫功能的影响
- 2011年
- 目的探讨实验性大肠癌对机体免疫功能的影响。方法利用1,2-二甲肼诱导大鼠建立大肠癌模型,流式细胞术检测成瘤16、21周外周血淋巴细胞和21周脾细胞中CD3、CD4、CD8、CD25、4-1BB和4-1 BBL表达率,ELISA法检测成瘤21周时脾细胞经植物血凝素(PHA)刺激后分泌γ干扰素(IFN-γ)的能力。结果 21周时的诱癌率达100%(5/5)。16周时成瘤组外周血淋巴细胞CD3^+和CD3^+ CD4^+表达率较对照组略有降低,但差异无统计学意义(P>0.05);21周时成瘤组外周血淋巴细胞和脾细胞中CD3^+ CD4^+表达率较对照组明显降低(P<0.05),4-1BB和4-1 BBL的表达较对照组均降低,但差异均无统计学意义(均P>0.05);成瘤组脾细胞PHA刺激试验后分泌IFN-γ的能力较对照组显著下降(P<0.01)。结论实验性大肠癌同人类大肠癌具有类似的免疫功能降低,主要是细胞免疫功能的下降。
- 叶建新仉元亭刘强陈卫昌
- 关键词：大肠癌免疫功能
