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国家自然科学基金(30571759)

作品数:20 被引量:47H指数:4
相关作者:谭建明王庆华蔡锦全陈津杨顺良更多>>
相关机构:南京军区福州总医院上海市第一人民医院复旦大学更多>>
发文基金:国家自然科学基金福建省科技创新平台建设项目福建省科技计划重点项目更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 20篇中文期刊文章

领域

  • 20篇医药卫生

主题

  • 15篇胰岛
  • 9篇成人胰岛
  • 7篇胰岛细胞
  • 6篇人胰岛细胞
  • 6篇糖尿
  • 6篇糖尿病
  • 6篇细胞移植
  • 6篇成人胰岛细胞
  • 5篇胰岛细胞移植
  • 5篇细胞
  • 5篇成人胰岛细胞...
  • 4篇胰岛移植
  • 4篇腺病
  • 4篇腺病毒
  • 4篇基因
  • 4篇大鼠胰岛
  • 3篇转染
  • 3篇HO-1
  • 3篇纯化
  • 2篇血红素氧合酶

机构

  • 11篇南京军区福州...
  • 8篇上海市第一人...
  • 2篇复旦大学
  • 2篇复旦大学上海...
  • 1篇上海交通大学...

作者

  • 17篇谭建明
  • 10篇王庆华
  • 10篇蔡锦全
  • 9篇陈津
  • 8篇杨顺良
  • 7篇黄梁浒
  • 7篇董维平
  • 6篇陈晓波
  • 6篇吴卫真
  • 5篇郭君其
  • 5篇吴志贤
  • 5篇李永翔
  • 4篇王煜非
  • 4篇焦洋
  • 3篇马予洁
  • 2篇李戈
  • 2篇钟翠平
  • 2篇卢大儒
  • 2篇彭永德
  • 2篇陈静

传媒

  • 4篇中华细胞与干...
  • 2篇中华器官移植...
  • 2篇现代生物医学...
  • 2篇中华细胞与干...
  • 1篇中国现代医学...
  • 1篇中华泌尿外科...
  • 1篇中华医学杂志
  • 1篇中华实验外科...
  • 1篇Journa...
  • 1篇Chines...
  • 1篇中国医学工程
  • 1篇医学研究杂志
  • 1篇中国组织工程...
  • 1篇中华现代护理...

年份

  • 2篇2012
  • 2篇2011
  • 2篇2010
  • 3篇2009
  • 9篇2007
  • 2篇2006
20 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
成人胰岛细胞移植临床研究被引量:4
2007年
目的建立新型成人胰岛细胞分离纯化方法,观察成人胰岛细胞移植的安全性与有效性。方法PFC与UW液双层冷藏胰腺,Liberase酶消化,COBE 2991型专用胰岛细胞分离机分离及连续密度梯度纯化,获取高纯度与高活性的胰岛细胞。采用外科方法,将短期培养的胰岛细胞经门静脉移植到肝脏内。术后监测血糖与胰岛素用量、C肽与糖化血红蛋白水平以及肝肾功能,并与术前比较。结果42个胰腺成功分离胰岛细胞,平均数量28.5万IEQ、纯度95.7%、活率93.2%、刺激指数2.43,病原学结果均阴性。11例1型糖尿病患者实施成人胰岛细胞移植20次,每次移植平均胰岛数量为11200 IEQ/kg。采用无激素免疫抑制治疗。随访7个月~4年,7例完全撤除胰岛素,4例胰岛素用量较术前减少60%以上。术后血糖稳定维持在正常水平,C肽均超过0.5nmol/L,糖化血红蛋白基本正常,肝肾功能稳定维持正常,无胰岛移植并发症。结论新型成人胰岛细胞分离纯化方法可靠,成人胰岛细胞移植治疗1型糖尿病临床疗效较好,手术简捷,安全性好。
谭建明杨顺良蔡锦全吴卫真郭君其黄良浒王庆华吴志贤陈津
关键词:糖尿病成人胰岛细胞移植
成人胰岛细胞移植治疗1型糖尿病的围手术期监护被引量:1
2010年
探讨成人胰岛细胞移植治疗1型糖尿病的围手术期护理.术前严格调整血糖至稳定,着重移植免疫诱导阶段的监护及健康教育.术后监测胰岛细胞功能恢复情况,做好移植物植入通道的管理,观察并发症,辅以有效的饮食与运动调节,进行针对的健康教育、心理指导与随访指导.
马予洁陶小琴王庆华杨晓玲
关键词:成人胰岛细胞移植1型糖尿病护理
IMPROVEMENT OF HUMAN ISLET FUNCTION BY ADENO-VIRUS MEDIATED HO-1 GENE TRANSFER
2007年
Objective To investigate in vitro heme oxygenase-1 gene (HO-1) delivery to human pancreatic islets by adenovirus vectors. Methods Recombinant adenovirus containing HO-1 or enhanced green fluorescent protein gene(EGFP) was generated by using the AdEasy System. The purified human pancreatic islets were infected with recombinant adenovirus vectors at various multiplicity of infection (MOI). Transduction was confirmed by fluorescence photographs and Western blot. Glucose-stimulated insulin secretion was detected by using Human insulin radioimmunoassay kits and was used to assess the function of human islets infected by recombinant adenovirus.Results Viral titers of Ad-hHO-1 and Ad-EGFP were 1.96×109 and 1.99×109 pfu/mL, respectively. Human pancreatic islets were efficiently infected by recombinant adenovirus vectors in vitro. Transfection of human islets at an MOI of 20 did not inhibit islet function. Recombinant adenovirus mediated HO-1gene transfer significantly improved the islet function of insulin release when simulated by high level glucose. Conclusion Recombinant adenovirus is efficient to deliver exogenous gene into human pancreatic islets in vitro. HO-1 gene transfection can improve human islet function.
陈晓波李永翔董维平焦洋谭建明
温度和二氧化碳变化对大规模培养脐带间充质干细胞的影响被引量:4
2012年
目的 探讨频繁开关培养箱引起温度和CO2浓度的变化对大规模培养脐带间充质干细胞(UC-MSCs)的影响。方法 取P3代UC-MSCs,在37℃、5﹪?CO2培养条件下,模拟操作中不同的开关培养箱次数(每天0、5和10次),以及每次不同的开箱时间(1、2和3min),对比分析细胞生长形态和增殖数量的差异。结果 同样开箱次数,随着每次开箱时间的增长细胞增殖速度减慢,1、2和3min各组细胞增殖数量差异均有统计学意义(F=265.0,P=0.000;F=1434.61,P=0.000);同样开箱时间条件下,每天开箱10次组比5次组细胞增殖数减少,差异有统计学意义(t值为16.400,17.280,4.480,P均?=0.000)。随着开箱时间的延长,开箱次数增加,可以明显看到细胞胞浆内出现空泡和成片死亡脱落的细胞。结论 频繁开关培养箱及开关箱时间长短均可影响脐带MSCs的增殖,同时对细胞形态有明显影响。
林娜陈津付云烽施小华王庆华谭建明
关键词:脐带间充质干细胞温度二氧化碳
大鼠胰岛分离条件的优化被引量:4
2007年
目的:优化大鼠胰岛分离纯化的条件,为胰岛移植实验奠定基础。方法:通过胆总管灌注胶原酶P来消化大鼠胰腺,分离胰岛,采用不连续密度梯度Ficoll离心法纯化胰岛,观察胶原酶浓度、消化时间以及大鼠体重对胰岛分离结果的影响。双硫腙染色鉴定胰岛,丫啶橙/碘丙啶染色鉴定胰岛细胞活率,糖刺激胰岛素释放试验评价胰岛功能。结果:胶原酶浓度、消化时间以及大鼠体重对胰岛分离结果有重要影响。1mg/ml胶原酶P在37℃静止消化45分钟条件下,胰岛分离效果最佳,效果较其他酶浓度和消化时间条件下好(P<0.05)。体重350g的大鼠的胰岛收获量778.33±80.21IEQ/胰腺,而体重250g的大鼠的胰岛收获量655.00±56.56 IEQ/胰腺(P<0.05)。优化条件下分离的胰岛其纯度>90%,胰岛细胞活率>90%,低糖(2.8mmol/L)、高糖(16.7mmol/L)刺激胰岛素释放分别为(5.40±1.75)mIU/L/30IEQ,(12.27±2.55)mIU/L/30IEQ(P<0.05),刺激指数为2.33±0.29。结论:胶原酶浓度、消化时间以及大鼠体重影响胰岛分离结果,优化分离条件可改善大鼠胰岛分离结果。
陈晓波秦杰焦洋董维平李永翔钟翠平谭建明
关键词:胰岛纯化
大鼠胰岛转染人血红素氧合酶-1基因对同种胰岛移植的影响
2007年
目的 探讨大鼠胰岛转染人血红素氧合酶-1(HO-1)基因在胰岛移植中的潜在应用价值。方法 采用携带人HO-1基因的腺病毒对新分离的SD大鼠胰岛细胞进行转染;对体外培养的胰岛细胞使用重组人肿瘤坏死因子a及放线菌酮诱导凋亡。使用流式细胞术检测凋亡率;每只链脲霉素诱导的糖尿病模型大鼠门静脉内置入约1200个胰岛当量的胰岛后,观察糖尿病大鼠血糖及体重变化;免疫组织化学法检测肝内移植胰岛细胞的胰岛素、HO-1蛋白表达及表达CD3抗原的淋巴细胞浸润情况。结果 转染人HO-1基因的胰岛细胞凋亡率明显低于对照组(P〈0.05);单纯胰岛细胞移植后移植物存活时间为(5.33±4.18)d,转染人HO-1基因的胰岛细胞移植后移植物存活时间为(10.56±4.33)d,两组比较,P〈0.05;转染人HO-1基因的胰岛细胞培养48h即见人HO-1蛋白表达;肝内移植7d后移植物有人HO-1蛋白表达;移植胰岛周边及胰岛内淋巴细胞浸润程度较单纯胰岛移植组明显减轻。结论 大鼠胰岛转染人HO-1基因能够增加体外培养胰岛细胞的抗凋亡能力,并能延长体内移植胰岛的存活时间,减轻淋巴细胞对胰岛的浸润。
李永翔李戈董维平陈静陈晓波王煜非卢大儒谭建明
关键词:胰岛移植血红素氧合酶-1腺病毒
腺病毒载体转染人HO-1基因增强成人胰岛细胞抗凋亡和胰岛素释放功能的研究被引量:7
2006年
目的了解腺病毒载体转染人HO-1基因对体外培养的成人胰岛的作用,探索基因治疗在胰岛移植中的潜在应用价值。方法将成人胰岛分离纯化后分为3组:转染人HO-1基因组(Ad-HO-1组)、转染EGFP基因组(Ad-EGFP组)及对照组,采用携带人HO-1基因及EGFP基因的腺病毒作为载体对体外培养的成人胰岛进行转染,通过形态学观察、胰岛素释放试验及肿瘤坏死因子(TNF)α及放线菌酮诱导48 h后流式细胞仪检测凋亡。结果Ad-HO-1组的胰岛在高糖刺激下胰岛素分泌量为270 m IU/L±89 m IU/L,高于对照组(182 m IU/L±59 m IU/L)和Ad-EGFP组(189 m IU/L±88 m IU/L,P<0.05);诱导后Ad-HO-1组凋亡细胞的发生率为63%±11%,对照组为91%±11%,两组比较,P<0.01。结论使用腺病毒作为载体对体外培养的成人胰岛转染HO-1基因能够增加胰岛的抗凋亡能力、促进胰岛素的分泌。
李永翔李戈董维平陈静王煜非陈晓波卢大儒谭建明
关键词:胰岛基因腺病毒
小鼠SOCS1基因重组腺病毒载体的构建及其在树突状细胞中的表达被引量:2
2007年
目的:构建含小鼠细胞因子信号抑制因子-1基因(SOCS1)的重组腺病毒载体(Ad5F35-SOCS1),探讨其介导SOCS1基因在小鼠树突状细胞中的表达。方法:设计含AgeI和NheI酶切位点的SOCS1基因上下游引物,以质粒pEF-FLAG-1/mSOCS1为模版,通过PCR扩增获得SOCS1全部序列,片段回收后经AgeI和NheI酶切,再定向插入到经AgeI和NheI酶切的质粒pDC316-LacZa中,获得重组穿梭质粒pDC316-SOCS1,经AgeI和NheI酶切、PCR及测序等鉴定后,用脂质体将穿梭质粒pDC316-SOCS1与腺病毒骨架质粒pBHGF35共转染293细胞,经位点特异性重组获得重组腺病毒Ad5F35-SOCS1,行PCR鉴定,经293细胞扩增、纯化制备高滴度病毒液,TCID50法测定病毒滴度。用获得的重组腺病毒感染小鼠树突状细胞,以免疫组化检测SOCS1的表达。结果:成功构建了含小鼠SOCS1基因的重组腺病毒载体,病毒感染滴度为1.4×10^9IU/ml,该载体能有效介导SOCS1基因在小鼠树突状细胞中的表达。结论:重组腺病毒载体能将SOCS1基因转入小鼠树突状细胞并有效表达,为基因转染制备耐受性树突状细胞奠定了基础。
陈晓波秦杰焦洋钟翠平谭建明
关键词:腺病毒载体树突状细胞
供体胰腺保存方法的改进
2011年
目的探索在胰腺保存液中添加胰蛋白酶抑制剂保护受损供体胰腺的方法。方法按照获取的供体胰腺分为对照组、完整组和破损组。在完整组和破损组的UW液中添加乌司他丁,于胰腺灌注前取保存胰腺的UW液送测淀粉酶浓度,并比较各组的胰岛得率、纯度、活率和胰岛素释放指数。结果对照组的UW液中的淀粉酶含量为(31±21)U,完整组和破损组分别为(37±22)U和(44±16)U。各组间UW液中淀粉酶含量的差异均没有统计学意义(F=0.835,P=0.446);对照组(12例)、完整组(8例)和破损组(6例)的胰岛得率分别是(319921±98496)、(327095±121698)和(295104±76505)IEQ/胰腺;纯度为(66.9±27.7)﹪、(69.6±26.2)﹪和(67.8±25.6)﹪;活率达(95.3±2.0)﹪、(95.8±1.2)﹪和(95.8±1.0)﹪;释放指数为2.98±1.70、3.10±1.40和2.85±0.48;各组间的胰岛得率、纯度、活率和胰岛素释放指数的差异均无统计学意义(F值<1,P>0.05)。结论胰蛋白酶抑制剂能有效地保护受损的供体胰腺,从而扩大了供胰的来源。乌司他丁作为已在临床使用的蛋白酶抑制剂,用于胰岛移植的供胰保存更为安全可靠。
董维平蔡锦全谭建明王煜非王鉴波彭永德
关键词:胰腺胰蛋白酶抑制剂
成人胰岛细胞分离纯化技术
2009年
目的探讨成人胰岛细胞分离纯化技术,为胰岛细胞移植治疗1型糖尿病提供大量高质量的胰岛细胞。方法使用LiberaseHI复合胶原酶和改良的Recordi自动胰岛细胞分离技术分离胰岛,采用COBE2991细胞淘洗仪连续密度梯度离心纯化胰岛细胞,用DTZ和AO-PI染色显微镜下评价胰岛细胞的数量、纯度和活性。结果本组研究共分离30例胰腺的胰岛,获得胰岛细胞数量平均为(316626±191972)IEQ,平均每克胰腺收获胰岛细胞3389IEQ,收获的胰岛纯度平均为(74.7±7.84)﹪,活度平均为(94.1±2.19)﹪,胰岛细胞刺激指数平均为3.68±0.58。在此基础上,成功实施7人12次的成人胰岛细胞移植。结论成功建立了改良的Recordi自动胰岛分离技术,获得大量高纯度有活性的胰岛细胞,为开展胰岛细胞临床移植提供了保障。
陈津黄梁浒王庆华马予洁杨顺良蔡锦全谭建明
关键词:胰岛细胞细胞分离纯化
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