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Increased Midkine and Estrogen Receptor-β Expression in Human Non-Small Cell Lung Cancer被引量：1: 2009年; 客观 Midkine (MK ) ，肝磷脂绑定生长因素家庭的一个新成员，最近被发现了标本包括在许多肿瘤有高表示水平肺癌。雌激素可以涉及肺 carcinogenesis，和雌激素受体，主要雌激素 receptor-β(ER-β) ，在正常在场、功能肺和肿瘤房间线和纸巾。另外，雌激素和生长因素可以支持人的非小的房间肺癌症(NSCLC ) 的前进。以前，我们把免疫组织化学地表明了 MK 和 ER-β 蛋白质完了，这在 NSCLC 表示了，他们的表示层次否定地显著地是两个与病理学的分类相关。这研究的目的是进一步验证他们有 NSCLC 的表示和它的关联。方法拿 NSCLC 纸巾和他们肿瘤的相应帕拉和正常的肺当研究反对，我们进一步 RT-PCR 由我检验了 MK 和 ER-β 的表示在在送信人 RNA (mRNA ) 和蛋白质的层次的 situ 杂交和西方的污点分析，分别地。增加的 MK 和 ER-β mRNA 表示被 RT-PCR 并且在 situ 杂交分析在 NSCLC 发现的结果。而且，西方的污点分析也在 NSCLC 显示了 MK 和 ER-β 蛋白质的增加的表示。最后，他们在在 NSCLC 的 mRNA 和蛋白质表示的层次的关联分析证明那 MK 蛋白质水平显著地被相关到雌激素 receptor-β(P<0.01， rs=0.535 ) ；尽管有他们在 mRNA 水平的关联， MK 和 ER-β 之间没有显著差别(P>0.05， rs=0.178 ) 。在现在的学习的所有这些结果证实了那 MK 和 ER-β 的结论完了在人的 NSCLC 表示了。; Shi-hua ZhangGuang-feng ZhaoYa-hong HuangKai-hua LuYa-yi HOU; 关键词：雌激素受体肺癌细胞

人胃腺癌BGC823细胞Midkine高表达前后基因表达谱芯片分析: 2009年; 目的:用基因芯片技术分析、筛选Midkine高表达前后胃腺癌相关基因谱的差异表达。方法:建立Midkine高表达BGC823胃腺癌细胞系,提取细胞总RNA,逆转录Cy3、Cy5标记cDNA探针,应用晶芯表达谱芯片,分析差异表达的基因。结果:发现Midkine高表达前后BGC823胃腺癌细胞有显著性表达差异的基因共有550个,其中上调基因407个,下调基因143个。对550条差异表达基因进行初步功能分类分析,结果表明这些基因与Midkine促进胃腺癌发病机制存在相关性。结论:Midkine高表达前后BGC823胃腺癌细胞部分功能基因存在显著的表达差异,多数差异表达的基因参与细胞黏附、细胞骨架形成、细胞周期以及细胞代谢等过程。; 王庆苓赵树立黄亚红侯亚义; 关键词：BGC823 胃腺癌 MIDKINE 基因表达谱芯片

Midkine特异的shRNA对胃肿瘤细胞BGC823增殖及凋亡的影响被引量：2: 2010年; 目的研究shRNA干扰midkine对胃肿瘤细胞BGC823增殖能力及凋亡的影响。方法构建midkine基因的特异性小RNA干扰质粒,采用脂质体2000转染BGC823细胞,运用CCK-8检测细胞的增殖能力,PI染色检测细胞凋亡情况。结果成功转染重组体的BGC823细胞增殖明显受到抑制(P<0.01)细胞形成克隆数明显降低(P<0.01),并且有明显的亚二倍体峰出现(P<0.05)。结论针对midkine基因的特异性小RNA干扰质粒在体外能有效抑制人胃癌细胞BGC823 midkine表达,细胞增殖能力减弱,细胞凋亡增加,为midkine基因靶向治疗提供一定的实验依据。; 王庆苓黄亚红柳红侯亚义; 关键词：MIDKINE SHRNA 胃肿瘤细胞细胞增殖

Midkine shRNA对胃癌SGC7901细胞增殖与凋亡的影响被引量：1: 2010年; 目的:研究shRNA干扰midkine对胃肿瘤细胞SGC7901生物学特性的影响。方法:构建midkine基因的特异性小RNA干扰质粒,采用脂质体2000转染SGC7901细胞,检测细胞的增殖和克隆形成能力以及细胞凋亡情况。结果:与对照组相比,转染重质粒后1-5天,SGC7901细胞增殖明显受到抑制(P<0.01),细胞形成克隆数明显降低(P<0.01),并且有明显的亚二倍体峰出现(P<0.05)。结论:针对midkine基因的特异性小RNA干扰质粒在体外能有效抑制人胃癌细胞SGC7901 midkine表达,细胞增殖及克隆形成能力减弱,细胞凋亡增加,为midkine基因靶向治疗提供一定的实验依据。; 王庆苓黄亚红侯亚义; 关键词：MIDKINE SHRNA 胃肿瘤细胞细胞增殖细胞凋亡

人缺失型Midkine重组蛋白的纯化及多克隆抗体的制备: 2010年; 目的获得兔抗人缺失型Midkine(t MK)的多克隆抗体,并将其初步应用于临床检测。方法将人t MK蛋白经亲和层析法纯化,并将其作为抗原免疫新西兰大白兔,获得兔抗人血清,经饱和硫酸铵纯化,获得初步纯化的兔抗人t MK多克隆抗体,用免疫组织化学和蛋白印迹(Western blot)试验检测抗体的灵敏度和特异性。结果获得初步纯化的兔抗人t MK特异性多克隆抗体,该抗体能识别天然人t MK蛋白。结论制备的t MK多克隆抗体可初步用于临床检测。; 王庆苓黄亚红侯亚义; 关键词：多克隆抗体

MK阳性表达与乳腺浸润性导管癌血管生成的关系被引量：2: 2011年; 目的探讨中期因子(MK)阳性表达与乳腺浸润性导管癌血管生成的关系。方法选择手术切除的浸润性乳腺癌组织53份(乳腺癌组)及乳腺癌旁2 cm组织53份(癌旁组),采用免疫组化PV法检测两组MK蛋白表达情况,同时以CD34标记微血管内皮细胞测定微血管密度(MVD),并对二者的关系进行统计学分析。结果乳腺癌组MK蛋白阳性率为77.36%(41/53),MVD为14.18±4.13;癌旁组MK蛋白阳性率为16.98%(9/53),MVD为10.07±3.27,两组比较P<0.05。乳腺癌组MK蛋白阳性率与MVD呈正相关(r=0.585,P<0.05)。结论 MK蛋白在浸润性乳腺癌组织中高表达,MK表达可促进乳腺癌血管生成。; 来瑞娜王庆苓柳红; 关键词：CD34 微血管密度

原癌基因Zbtb7A的POZ区在大肠杆菌中的表达及其多抗制备被引量：2: 2009年; 目的:原癌基因Zbtb7A在肿瘤的发生发展过程中起"分子开关"的作用。本研究制备Zbtb7A蛋白POZ功能区重组蛋白及相应的多克隆抗体。方法:根据大肠杆菌的密码子偏好性,优化其编码序列,用2步法PCR合成目的片断,并将其构建入原核表达载体pET-26b(+)中。重组表达质粒转入大肠杆菌BL21(DE3),用0.5 mmolIPTG诱导重组蛋白表达。所获重组表达蛋白经15%SDS-PAGE分离,切胶回收目的蛋白,研磨后免疫家兔制备抗血清。收集的抗血清经饱和硫酸铵沉淀和G蛋白柱联合纯化,用Western blot证实对纯化的抗血清进行鉴定。结果:获得了密码子优化后的Zbtb7APOZ区的编码序列,并成功地获得了其重组蛋白,制备了高纯度的抗POZ区多克隆抗体。结论:所获得的重组POZ区蛋白及其多克隆抗体可应用于对Zbtb7A的进一步研究。; 季玉连赵树立黄亚红赵光锋侯亚义; 关键词：原核表达多克隆抗体

非小细胞肺癌中微血管密度的水平及临床意义被引量：1: 2011年; 目的研究非小细胞肺癌(NSCLC)中微血管密度(MVD)的水平及临床意义。方法用免疫组织化学技术分别检测了24例NSCLC组织、24例相应的癌旁组织和24例正常肺组织中的MVD,并借助Image-Pro Plus 6.0软件进行图像分析和处理。结果 NSCLC组织中MVD水平显著高于癌旁组织和正常肺组织(P<0.01);中期因子(MK)蛋白表达阳性患者的MVD高于MK蛋白表达阴性患者(P<0.05);NSCLC中MVD水平与NSCLC的TNM分期显著相关,Ⅲ/Ⅳ期NSCLC中MVD水平明显高于Ⅰ/Ⅱ期(P<0.01)。结论血管生成水平与NSCLC进展密切相关。; 张士化黄亚红侯亚义; 关键词：非小细胞肺癌微血管密度

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国家自然科学基金(30872941)

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