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类风湿关节炎T细胞亚群4—1BB的表达与其分泌TH1／TH2细胞因子的关系被引量：2: 2007年; 目的探讨体外培养的类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）T淋巴细胞上共刺激分子4-1BB的表达，及与其分泌TH1，TH2细胞因子的关系。方法应用流式细胞术检测体外培养的30例RA患者和20例正常对照者T细胞活化前后4-1BB的表达，并且应用ELISA方法检测培养上清液中IFN-γ、IL-4水平。结果RA患者CD^4＋T和CD^8＋T细胞表达的4-1BB明显高于正常对照组（表达百分率分别为18．56％±4．08％和10．33％±2．13％；1．24％±0．12％和0．87％±0．09％，P〈0．01），经抗CD3单抗体外刺激后CD4^＋T和CD8^＋T细胞表达的4-1BB均显著高于活化前（表达百分率为33．21％±4．29％和21．35％±8．12％，P〈0．01）。RA患者CD4^＋T／CD8^＋T比值明显升高，而且与4-1BB^＋CD4^＋T细胞数呈正相关关系（r=0．84，P〈0．01），RA患者T淋巴细胞培养液上清中IFN-γ、IL-4均高于正常对照组（P〈0．05），经抗CD3单抗体外刺激后上清液中IFN-γ及IL-4均明显高于活化前，以IFN-γ升高最为显著（P〈0．01）。而且抗CD3单抗刺激前后4-1BB^＋CD4^＋T细胞数与培养上清液中IFN-γ水平均呈正相关关系（r=0．721，r=0．487，P〈0．05）。结论类风湿关节炎患者T细胞表达的4-1BB在类风湿关节炎的发生发展中具有重要意义，4-1BB可能通过对CD4^＋T细胞活化，促使TH1细胞因子分泌，参与关节炎症和免疫损伤。; 张榕蒋莉李舒帆肖卫国姜奕; 关键词：类风湿关节炎 4-1BB IFN-Γ IL-4

白细胞介素-10信号转导机制对C57BL/6和MRL/lpr^-小鼠脾细胞功能及活性影响的比较: 2008年; 我们以C57BL／6和MRL/lpr^-小鼠的脾细胞为研究对象，进一步研究白细胞介素（IL）-10受体的信号转导机制及其在系统性红斑狼疮（SLE）发病过程中所起的作用。; 张婧刁骋崔华东李莉祁赞梅姜奕; 关键词：白细胞介素-10 信号转导机制 C57BL/6 脾细胞小鼠 C57BL/6

粒细胞集落刺激因子受体内含子基因多态性与系统性红斑狼疮的关系被引量：2: 2007年; 目的探讨粒细胞集落刺激因子受体（G—CSFR）内含子基因多态性的分布特点及与系统性红斑狼疮（SEE）易感性和临床特征的关系。方法采用聚合酶链反应-单链构象多态性（PCR—SSCP）分析方法检测144例SEE患者和489名正常对照组G—CSFR基因第5内含子9606位点及第12内含子14233位点基因型。结果SEE患者G—CSFR基因第5内含子9606位点AG基因型频率（61．8％）及G等位基因频率（37．8％）较对照组（47．0％及27．6％）明显升高（P〈0．01）；而AA基因型频率（31．3％）及A等位基因频率（62．2％）较对照组（48．9％及72．4％）明显降低（P〈0．01）。SEE伴临床表现及实验室指标异常的患者与不伴临床表现及实验室检查异常的SEE患者相比较，各基因型频率及各等位基因频率差异无统计学意义（P均〉0．05）。在全部病例和对照组中未发现G-CSFR基因第12内含子14233位点的单核苷酸多态现象。结论SEE患者G-CSFR基因第5内含子9606位点AG基因型及G等位基因与SEE发病相关，各基因型及等位基因与SEE各临床表现及各项实验室指标无关。G-CSFR基因可能是SEE易感基因。; 王禹李艳秋王力宁粟霄立冯江敏姜奕

反相高效液相色谱法测定人乳腺癌MCF7细胞中基因组DNA甲基化水平被引量：2: 2010年; 目的利用反相高效液相色谱法检测MCF7细胞系中基因组DNA的甲基化水平。方法采用Nano LC(75μm×15 cm,5μm)和Micro LC(1.0 mm×15 cm,5μm)的C18反相色谱柱,以甲醇-醋酸铵缓冲液(pH 5.0)为流动相,使用线性梯度程序,将MCF7细胞中基因组DNA水解产物进行分离,两种体系流速分别是300 nl/min和40μl/min,在273 nm波长处检测,利用外标法分别检测DNA中脱氧胞嘧啶(dC)和甲基化脱氧胞嘧啶(5mdC)含量。结果 MCF7基因组DNA的水解产物,经反相色谱分离得到的峰图有较好的准确性与重复性;DNA水解后的产物为弱保留化合物,且Micro LC分离效果优于Nano LC;乳腺癌细胞MCF7甲基化水平为19.3%,高于正常细胞中基因组DNA甲基化水平。结论成功的将MCF7细胞中基因组DNA水解产物经反相色谱分离;使用Micro LC分离DNA水解后的弱保留产物较佳;MCF7细胞系基因组DNA甲基化水平高于正常细胞。; 蔡鑫泽乔莹都姝妍刘楠陈冬车睿超姜奕; 关键词：反相高效液相色谱法基因组甲基化水平乳腺癌

阻断4-1BB／4—1BBL通路在系统性红斑狼疮患者T淋巴细胞活化中的作用被引量：1: 2008年; 目的探讨协同刺激分子4-1BB／4—1BBL在系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus，SLE）T淋巴细胞活化中的作用机制。方法应用RT—PCR和Western blot方法检测体外培养20例SLE患者和20例正常对照者T淋巴细胞活化前后及应用抗4-1BB单抗阻断后p38MAPK和NF—kB表达的变化。结果SLE患者T淋巴细胞NF—kBmRNA和p38MAPKmRNA表达及其蛋白水平明显高于正常对照组（P均〈0．01），活化后的表达进一步升高（P均〈0．01）。阻断4—1BB／4—1BBL通路后SLE患者T淋巴细胞p38MAPKmRNA及蛋白水平的表达均明显下降（P均〈0．01），但是NF—kB mRNA及蛋白水平的表达无明显变化（P〉0．05）。结论协同刺激分子4-1BB可能通过p38MAPK信号转导通路促使SLE患者T淋巴细胞的活化与增殖。; 张榕郭韵赵丽娟肖卫国姜奕; 关键词：系统性红斑狼疮 T淋巴细胞 4-1BB P38 MAPK

阻断4-1BB／4-1BBL通路对系统性红斑狼疮T淋巴细胞增殖和细胞因子分泌的影响被引量：1: 2008年; 目的研究共刺激分子4-1BB／4-1BBL对系统性红斑狼疮（SLE）T淋巴细胞增殖与Th1／Th2细胞因子分泌的影响，探讨其在SLE发病机制中的作用。方法采用四甲基噻唑蓝（MTr）法和酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测体外培养的30例SLE患者外周血T淋巴细胞应用抗4-1BB单抗阻断前后T淋巴细胞增殖及干扰素（IFN）-γ和白细胞介素（IL）-4分泌水平，以20名健康志愿者为正常对照。结果①SLE患者T淋巴细胞经抗CD3单抗刺激后增殖明显大于活化前（P〈0．01），而应用抗4-1BB单抗阻断后T淋巴细胞的增殖明显受抑制（P〈0．01）。②SLE患者T淋巴细胞培养上清中IFN-γ和IL-4水平明显高于正常对照组（P〈0．01），而且经抗CD3单抗刺激活化后，SLE患者T淋巴细胞分泌的IFN-γ和IL-4水平显著高于活化前（P〈0．01），但是应用抗4-1BB单抗阻断后培养上清中IFN-1和IL-4水平明显下降（P〈0．05，），以IL-4水平的减少最为显著。结论抗4-1BB单抗可显著抑制SLET淋巴细胞的异常活化及Th1和Th2细胞因子的分泌，减轻SLE的免疫损伤。; 张榕王晓非赵丽娟肖卫国姜奕; 关键词：红斑狼疮 4-1BB 白细胞介素4

应用二维电泳和质谱技术鉴定乳腺癌相关蛋白被引量：6: 2011年; 目的通过比较人乳腺癌细胞MCF7和乳腺上皮细胞MCF10A的差异表达蛋白,以发现可能用于早期诊断的乳腺癌肿瘤标志物。方法体外培养人乳腺癌细胞MCF7和乳腺上皮细胞MCF10A,提取细胞总蛋白,进行二维凝胶电泳并比较分析,选择在乳腺癌细胞MCF7中明显差异表达的蛋白点,进行质谱和生物信息学分析。结果建立了MCF7和MCF10A两种细胞系的二维凝胶电泳图谱,平均蛋白质点数分别为(960±44)和(1 128±29);对选择的35个差异表达蛋白质点进行质谱和生物信息学分析,鉴定了其中16个点,包括过氧化氢酶-6(PRDX6)、磷酸甘油酸激酶-1(PGK1)、60 kD热休克蛋白(CH60)、谷氨酰胺转移酶-2(TGM2)等。结论乳腺癌细胞MCF7相对于乳腺上皮细胞MCF10A的差异表达蛋白可能作为乳腺癌早期诊断和预后评价的候选肿瘤标志物。; 蔡鑫泽乔莹陈洋于爽李丰姜奕; 关键词：蛋白质组学乳腺癌肿瘤标志物二维凝胶电泳

白细胞介素10信号转导机制对C57BL/6和MRL/lpr^-小鼠腹腔巨噬细胞功能及活性影响的比较被引量：4: 2008年; 目的:体外比较白细胞介素10(IL-10)信号转导机制对C57BL/6和MRL/lpr-小鼠腹腔巨噬细胞功能及活性的影响。方法:分别分离C57BL/6和MRL/lpr-小鼠腹腔巨噬细胞进行培养;用不同浓度IL-10(0.01、0.1、1和10ng/ml)进行刺激,用MTT法测定比较两种品系小鼠腹腔巨噬细胞的增殖反应能力;Real time PCR分别测定其产生前炎性细胞因子IL-1α、M-CSF、TNF-α的量;用100ng/mlIL-10分别刺激两种品系小鼠腹腔巨噬细胞10分钟,免疫印迹法比较两种细胞中JAK1、TYK2、STAT3及磷酸化水平。结果:C57BL/6小鼠巨噬细胞数及其产生的前炎性细胞因子量随IL-10刺激浓度的增加而递减;MRL/lpr-小鼠巨噬细胞数及其前炎性细胞因子IL-1α、M-CSF的量随IL-10刺激浓度的增加而递增,但巨噬细胞产生TNF-α的量随IL-10刺激浓度的增加而递减;MRL/lpr-小鼠细胞内信号转导分子的磷酸化水平低于C57BL/6。结论:MRL/lpr-小鼠的细胞免疫和炎症反应不能被IL-10抑制,可能是由于其信号转导过程中的缺陷所致。; 张婧刁骋崔华东陈洋祁赞梅姜奕; 关键词：信号转导

共刺激分子4-1BB在强直性脊柱炎外周血淋巴细胞上的表达及其临床意义被引量：2: 2009年; 目的探讨强直性脊柱炎患者外周血淋巴细胞共刺激分子4-1BB的表达及其临床意义。方法应用流式细胞术检测30例强直性脊柱炎患者及20例正常对照者淋巴细胞活化前后4-1BB蛋白的表达。结果强直性脊柱炎患者淋巴细胞活化前后4-1BB的表达明显高于正常对照组(P<0.01),而且其表达的4-1BB水平与免疫球蛋白IgA呈正相关关系。结论强直性脊柱炎患者淋巴细胞存在异常的4-1BB表达,这可能是导致强直性脊柱炎患者淋巴细胞活化和免疫反应发生的原因之一。; 张榕郭韵吴春玲赵丽娟肖卫国; 关键词：强直性脊柱炎淋巴细胞

4-1BB在类风湿关节炎T淋巴细胞的表达及其对TH1/TH2偏移的影响被引量：4: 2006年; 【目的】探讨类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)T淋巴细胞上共刺激分子4-1BB的表达及其与血清TH1/TH2细胞因子分泌水平的关系。【方法】应用流式细胞术检测30例RA患者和20例正常对照者外周血T细胞活化前后4-1BB的表达,同时应用ELISA方法检测RA患者和正常对照者血清IFN-γ、IL-4水平。【结果】RA患者CD4+T和CD8+T细胞表达的4-1BB明显高于正常对照组(表达百分率分别为18.56±4.08,10.33±2.13,1.24±0.12,0.87±0.09,P<0.01),用抗CD3单抗体外刺激后CD4+T和CD8+T细胞表达的4-1BB均显著高于活化前(表达百分率为33.21±4.29和21.35±8.12,P<0.01)。RA患者CD4+T/CD8+T比值明显升高,而且与4-1BB+CD4+T细胞数呈正相关关系(r=0.84,P<0.01)。RA患者血清IFN-γI、L-4均明显高于正常对照组(P<0.01,P<0.05),以IFN-γ升高最为显著。而且4-1BB+CD4+T细胞数与血清IFN-γ水平呈明显的正相关关系(r=0.597,P<0.05)。【结论】类风湿关节炎患者T细胞表达的4-1BB在类风湿关节炎的发生发展中具有重要意义,4-1BB可能通过对CD4+T活化,促使TH1细胞因子分泌,参与关节炎症和免疫损伤。; 张榕王晓非赵丽娟姜奕; 关键词：T淋巴细胞

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