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虾-贝-红树林耦合循环水养殖系统中微生物群落分析被引量：9: 2016年; 海水循环水养殖系统是重要的生态养殖模式发展趋势之一,为了深入了解循环水养殖生态系统,通过对系统各功能区水体中细菌16S r DNA基因V4—V5区进行高通量测序和生物信息学分析,从微生物生态学角度分析了循环水养殖系统不同功能区的细菌群落结构动态。测序分析结果显示,海水循环水养殖系统中优势细菌种群分别属于变形菌门(Proteobacteria)、蓝藻门(Cyanobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidetes)、厚壁菌门(Firmicutes)、放线菌门(Actinobacteria)和浮霉菌门(Planctomycetes)。红树林湿地水体中变形菌门和厚壁菌门丰度较高,而对虾养殖池的拟杆菌门和浮霉菌门丰度较高。在不同优势类群中,变形菌门多样性指数平均值最高,其次是拟杆菌门,厚壁菌门最低。在各功能区中,红树林细菌多样性最高,虾池最低。MDS分析结果显示虾池、贝池和红树林湿地水体中细菌群落结构有明显差异,虾池与其他功能区差异最大。研究表明,高密度对虾养殖对虾池水体中细菌群落有显著影响,但其影响在循环水养殖系统后续功能区中逐渐减弱。; 张翔闫茂仓肖国强柴雪良谢起浪; 关键词：浮游细菌循环水系统高通量测序 RDNA

中华绒螯蟹白斑症病毒病的诊断被引量：3: 2017年; [目的]对江苏省吴中地区养殖池塘患病的中华绒螯蟹进行诊断。[方法]结合临床流行病学调查和分子生物学鉴定,对江苏省吴中地区发病的中华绒螯蟹进行实验室检测与鉴定。参考Gen Bank中白斑症病毒(WSSV)的基因序列设计1对特异性引物,以从中华绒螯蟹的鳃、肝胰腺、肌肉等组织提取的DNA为模板,进行PCR扩增。[结果]经过解剖观察,发现病蟹内脏器官无明显变化。从病蟹的肝胰腺和肌肉中未分离到致病菌。通过PCR扩增,均能扩增出预期大小的特异性产物,测序比对显示扩增条带的基因序列与WSSV的基因序列同源性高达99.6%。病理切片显示鳃和肝胰腺可见大量细胞核肿大细胞,与WSSV引起对虾组织的病变相一致。[结论]经初步诊断,确定引起中华绒螯蟹发病死亡的病原为WSSV。; 雷燕肖洋王娟张文文戚瑞荣张会军王学鹏; 关键词：中华绒螯蟹白斑症病毒组织病理变化

文蛤抗菌物质的粗提及活性检测被引量：2: 2014年; 为了分离纯化得到文蛤体内的抗菌活性蛋白,以灭活的副溶血弧菌诱导的方法,通过紫外分光光度计法测定其粗提品的蛋白质含量,并进行抗菌活性检测,同时利用硫酸铵沉淀法对粗提物进一步纯化、SDS-PAGE电泳检测纯度。结果显示,文蛤经副溶血弧菌诱导后,产生的抗菌物质在短时间内达到高峰,随后逐渐下降,大约在4h时对大肠杆菌抑制率最高;诱导4h时抑制率与对照相比无显著差异(P>0.05)。在经过硫酸铵沉淀后,SDS-PAGE电泳显示条带较多;进行Sephadex G-50凝胶过滤层析的最佳条件为洗脱流速0.2ml/min、样品浓度3.0mg/ml。; 张赛乐王雪鹏闫茂仓柴雪良艾为明谢起浪; 关键词：文蛤抗菌物质硫酸铵沉淀活性检测凝胶层析

尖吻鲈Lates calcarifer虹彩病毒病的诊断被引量：8: 2015年; 对广东珠海一养殖池塘中尖吻鲈Lates calcarifer的发病情况进行了调查。调查发现,病鱼体色发黑,剖检可见鳃充血发紫;空肠空胃,肠道微红,脾和肾肿大,有出血点,胆囊充盈,有胆汁渗出,肾发黑,有出血点,其他组织器官无明显变化。从病鱼的鳃、肝、肾、肌肉、肠道,和血液中未检查到寄生虫,从肝、脾和肾中未分离到致病菌。参考世界动物卫生组织(Office International des Epi-zooties,OIE)设计引物,提取自然发病鱼各种组织的DNA作为模板,扩增出了预期大小的特异性产物。测序比对显示,扩增的条带的基因序列与真鲷虹彩病毒(Red sea bream iridovirus,RSIV)的基因序列同源性高达98.6%。病理切片显示:肝和脾出现肿大细胞。因此,引起尖吻鲈发病死亡的原因是肿大细胞病毒属虹彩病毒感染。; 文琳雷燕戚瑞荣肖洋王雪鹏; 关键词：尖吻鲈虹彩病毒组织病理变化

凡纳滨对虾不同养殖密度高位池水体细菌群落动态被引量：11: 2016年; 通过对养殖水体环境基因组DNA中细菌16S rRNA基因V4–V5区的高通量测序和生物信息学分析,研究了两种养殖密度的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)高位池水体中细菌群落在养殖过程中的动态。结果显示,养殖过程中各菌群相对丰度变化明显,细菌多样性随时间逐渐提高,优势菌群为变形菌门(Proteobacteria)、蓝藻门(Cyanobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidetes)、放线菌门(Actinobacteria)和浮霉菌门(Planctomycetes)。随着养殖时间增长,蓝藻丰度所占比例逐渐减少,而变形菌、拟杆菌和浮霉菌丰度逐渐增大,同时养殖前期高密度池浮霉菌丰度显著高于低密度池(P<0.01),而其他菌群无显著差异。结果表明,养殖期前50 d不同养殖密度水体细菌群落差异较大,而后30 d内细菌群落的时间异质性大于空间异质性,这意味着高位池水体菌相被划分为两类,到养殖后期菌相快速转变,养殖密度所带来的影响被减弱。; 陈琛闫茂仓张翔於俊琦柴雪良曾国权; 关键词：细菌群落凡纳滨对虾养殖密度高位池 RRNA基因

精制抗副溶血弧菌卵黄抗体的制备与纯化被引量：1: 2014年; 用灭活浓度为108CFU/ml的副溶血弧菌悬液,加入等体积的弗氏完全佐剂或弗氏不完全佐剂,充分乳化,免疫健康海兰蛋鸡,每10d加强免疫1次,第3次加强免疫后1周开始收集鸡蛋。鸡蛋在除去蛋白后用蒸馏水漂洗得到纯卵黄液,应用饱和硫酸铵溶液沉淀法制备粗体的卵黄抗体,再应用Sephadex G-200凝胶层析柱进一步纯化,所得样品经SDSPAGE电泳检测,证实获得精制抗副溶血弧菌卵黄抗体。; 闫茂仓胡伟丽张赛乐柴雪良谢起浪王雪鹏; 关键词：副溶血弧菌卵黄抗体纯化

NaCl胁迫对醋栗番茄、樱桃番茄和番茄幼苗生长、叶片气体交换和离子平衡的影响被引量：5: 2016年; 以醋栗番茄(Solanum pimpinellifolium Linn.)、樱桃番茄品种‘秦皇贵妃红’(S.lycopersicum var.cerasiforme‘Qinhuangguifeihong’)和番茄品种‘浙粉202’(S.lycopersicum‘Zhefen 202’)幼苗为材料,研究了0(对照)、100、200mmol·L-1Na Cl胁迫对其生长、叶片气体交换参数和离子平衡的影响。结果表明:在100和200 mmol·L-1Na Cl胁迫下,‘秦皇贵妃红’和‘浙粉202’幼苗单株总干质量的降幅较大,醋栗番茄的降幅较小。Na Cl胁迫明显增加醋栗番茄幼苗的根冠比,但不同胁迫条件下‘秦皇贵妃红’和‘浙粉202’幼苗的根冠比差异不显著。与对照相比,在100mmol·L-1Na Cl胁迫下,醋栗番茄幼苗叶片的净光合速率(Pn)、胞间CO2浓度(Ci)和蒸腾速率(Tr)的降幅明显低于‘秦皇贵妃红’和‘浙粉202’,而醋栗番茄幼苗叶片气孔导度(Gs)的降幅明显高于后二者;在200 mmol·L-1Na Cl胁迫下,三者叶片Pn、Gs、Ci和Tr值的降幅接近。在100和200 mmol·L-1Na Cl胁迫下,醋栗番茄、‘秦皇贵妃红’和‘浙粉202’幼苗叶片的水分利用效率和气孔限制值均较各自对照显著升高,其中‘秦皇贵妃红’的增幅最大。在100和200 mmol·L-1Na Cl胁迫下,醋栗番茄、‘秦皇贵妃红’和‘浙粉202’幼苗根、茎和叶中Na+含量均较各自对照显著升高,而K+含量和K+/Na+比总体上较各自对照显著降低。与对照相比,经不同浓度Na Cl处理后醋栗番茄幼苗根、茎和叶的Na+含量增幅以及K+含量降幅在供试3种植物中均最小,而其不同部位的K+/Na+比总体上较高。上述研究结果表明:醋栗番茄的耐盐性较强,‘秦皇贵妃红’次之,‘浙粉202’较弱。Na Cl胁迫显著抑制‘秦皇贵妃红’和‘浙粉202’幼苗根的生长,但显著促进醋栗番茄幼苗根的生长,使其维持较强的耐盐性,且Na Cl胁迫下醋栗番茄对Na+的吸收和运输减少,以维持体内的离子平衡及较强的光合作用。; 葛兆健姚瑶赵海燕刘伟成冯坤郑青松郑春芳马兰珍; 关键词：樱桃番茄番茄耐盐性离子平衡

中草药对4种南美白对虾致病菌的抑制效果筛选被引量：11: 2015年; 采用体外抑菌法从23味中草药中筛选抑制南美白对虾致病弧菌的中草药。结果表明:23味中草药对4种南美白对虾致病弧菌均有不同程度的抑菌作用,五倍子、诃子、黄芩和大黄对4种致病弧菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)较为显著。其对南美白对虾副溶血弧菌的最小抑菌浓度分别为0.06、0.036、0.98和0.98mg/ml;对鳗弧菌的最小抑菌浓度分别为0.24、0.49、0.98和1.95mg/ml;其对需钠弧菌的最小抑菌浓度分别为0.001、0.004、0.49和1.95mg/ml。五倍子、诃子、黄芩和大黄可有效抑制4种南美白对虾致病弧菌。; 陈琛王发秀张赛乐闫茂仓柴雪良於俊琦谢起浪

碱蓬和三角叶滨藜幼苗生长、光合特性对不同盐度的响应被引量：18: 2012年; 为了探讨碱蓬和三角叶滨藜对不同盐度的响应机制,采用砂培试验,用含不同浓度NaCl的Hoagland营养液处理其幼苗30d,分析其生物量、株高、含水量(WC)、叶绿素(Chl)含量、类胡萝卜素(Car)含量、Chl/Car、Chl a/Chl b、净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、细胞间CO2浓度(Ci)、蒸腾速率(Tr)、水分利用效率(WUE)和气孔限制值(Ls)的变化。结果表明,1)和对照(不加NaCl)相比,低盐(100mmol/L NaCl)显著提高碱蓬幼苗的干重(DW)、株高和地上部WC,三角叶滨藜的株高不受明显影响,而其地上部DW和WC显著下降;中盐(400mmol/L NaCl)胁迫下,碱蓬株高、地上部DW和WC无显著变化,而三角叶滨藜地上部DW和WC显著下降;高盐(800mmol/LNaCl)下,两植物DW和含水量均明显降低,且碱蓬干重和含水量的降幅要显著低于三角叶滨藜。2)低盐对两植物的Chl含量没有明显影响,随着盐度的增加,其Chl含量均显著下降,碱蓬Chl含量的降幅显著大于三角叶滨藜。低盐明显提高碱蓬叶片的Car含量,但是不影响三角叶滨藜叶片的Car含量,随着盐度的增加,两植物的Car含量均显著下降,碱蓬Car含量的降幅显著大于三角叶滨藜的。随着NaCl浓度增加,两植物的Chl a/Chl b均逐渐上升,而对三角叶滨藜的Chl/Car影响也不显著,但是随着盐度的增加,碱蓬叶片Chl/Car呈先降低后升高的趋势。3)100mmol/L NaCl处理显著提高碱蓬的Pn、Gs和Tr,但显著降低三角叶滨藜的Pn、Gs和Tr,随着盐度的进一步增加,二者的Pn、Tr、Gs均显著下降,其中碱蓬Pn、Tr的降幅要显著低于三角叶滨藜的。随着盐度的增加,碱蓬Ci逐渐显著下降;而随着盐度增加,三角叶滨藜的Ci呈先降低、再升高的趋势,800mmol/L NaCl处理的Ci显著高于对照。4)碱蓬生物量与Tr、Pn、地上部WC、Car含量、根WC、Gs、根冠比、株高、Chl含量、Ci有极显著的正相关,而与Chl/Car、Ls呈极显著负相关,与WUE显著负相关;三角叶滨藜生物�; 彭益全谢橦周峰万红建张春银翟瑞婷郑青松郑春芳刘兆普; 关键词：碱蓬三角叶滨藜幼苗耐盐性光合特性

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浙江省重大科技专项基金(2012C12017-3)

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