国家科技支撑计划(2006BAD06A02)
- 作品数：3 被引量：19H指数：2
- 相关作者：刘学成何树森罗隆泽郭宗琪李燕春更多>>
- 相关机构：四川省疾病预防控制中心中国疾病预防控制中心资阳市疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划四川省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 四川资阳地区健康猪2型猪链球菌分离与分子生物学特征分析被引量：8
- 2009年
- 目的了解四川资阳地区健康猪携带猪链球菌状况及其主要毒力基因分布和药物敏感性,分析这些菌株与病人分离株的同源性,为疫情预测和制定防治措施提供依据。方法从屠宰场采集健康猪的咽拭子和扁桃体标本分离培养获得分离株,用API 20 Strep进行生化鉴定、猪链球菌诊断血清进行血清分型;聚合酶链反应(PCR)检测猪链球菌种特异性基因(16S rDNA)和相关毒力基因;K-B纸片法进行药物敏感性分析;并用脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株的同源性。结果从健康猪分离到了12株猪链球菌,均为血清2型;菌株均具有cps2J、mrp、sly、ef和gapdh毒力基因;所有菌株抗药性一致;PFGE分析结果显示均为SmaI 001型,与同期病人分离株带型一致。结论四川资阳地区健康猪携带的2型猪链球菌是高致病性菌株,与同期病人分离株具有一致的生物学特征,是引起猪或人发病的重要传染源;猪带菌率存在季节差异。
- 罗隆泽王鑫崔志刚李燕春郭宗琪金东郑翰何树森刘学成贾勇廖安波景怀琦
- 关键词：猪链球菌药敏实验PCRPFGE
- 猪链球菌选择性培养基研究被引量：10
- 2007年
- 目的研制一种对猪链球菌有较强选择作用的选择性培养基,用于污染标本中分离猪链球菌。方法通过药物敏感实验筛选对猪链球菌2型不敏感的抗菌药物,继而用琼脂平板稀释法测定候选抗菌药物的MIC,组方后测定猪链球菌生长率,用模拟标本和猪源标本考核分离效果。结果研制成功含3种抗菌药物的透明指示选择性培养基(简称StS培养基),该培养基对猪链球菌2型的生长率为85.9%～94.7%,对大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯等常见革兰阴性细菌和革兰阳性菌中的葡萄球菌、乙型溶血性链球菌、粪链球菌抑菌率100%。当模拟杂菌为108cfu/ml时,直接涂抹法检测灵敏度为7×103cfu/ml,较使用萘啶酮酸血平板提高1000倍。通过选择肉汤增菌后,StS培养基可使猪源标本猪链球菌检出率从0提高到14.9%。结论该培养基对猪链球菌具有较强的选择作用,使用该选择性培养基可以提高检测灵敏度,适合猪链球菌的动物源性标本与传染源追踪检测。
- 罗隆泽李燕春郭宗琪刘学成冯泽惠徐耀方杨小蓉赵晋何树森
- 关键词：猪链球菌选择性培养基
- 插入失活法构建2型猪链球菌突变株被引量：1
- 2008年
- 目的构建2型猪链球菌突变株05ZYΔ0913,05ZYΔ0936。方法以05ZY为模版,分别扩增0913、0936基因内部504bp,549bp片段为同源臂,与pSET4S质粒进行连接,将连接产物转入DH5α感受态细胞中,构建载体0913-pSET4S,0936-pSET4S。然后利用插入失活法,将构建的0913-pSET4S、0936-pSET4S载体通过电转化导入2型猪链球菌的感受态细胞中,利用壮观霉素抗性筛选得到阳性转化子,并用PCR进行鉴定。结果筛选到的菌株均能抵抗100μg/ml壮观霉素,经PCR鉴定,为失活了目的片段(0913和0936片段)的2型猪链球菌突变株。结论本研究成功构建了2个突变株,为进一步研究目的片段的基因功能奠定了基础。
- 路玲玲李蓉李文君袁媛郑玉玲王恒樑姜永强
- 关键词：链球菌基因沉默诱变
