国际科技合作与交流专项项目(2010DFA33970)
- 作品数：7 被引量：14H指数：2
- 相关作者：张皓冰陶奕卢艳胡薇冯正更多>>
- 相关机构：中国疾病预防控制中心复旦大学华东理工大学更多>>
- 发文基金：国际科技合作与交流专项项目国家科技重大专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 日本血吸虫含EF-手型结构域钙结合蛋白的克隆表达与免疫诊断分析被引量：2
- 2012年
- 目的克隆和表达日本血吸虫(Schistosoma japonicum)含EF-手型(EF-hand)结构域钙结合蛋白(SjEFCAB)的编码基因,纯化表达产物,鉴定重组蛋白的反应原性,初步评价其用于日本血吸虫病诊断的价值。方法以日本血吸虫虫卵cDNA文库中免疫筛选所获阳性克隆删除环化后的pBluescript-SjEFCAB质粒为模板,扩增SjEFCAB基因,将目的基因片段与原核表达载体pGEX-4T-1连接构建重组质粒pGEX-4T-1-SjEFCAB,转化至大肠埃希菌(Escherichia coli)BL21,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,用谷胱甘肽-S-转移酶(GST)标签亲和层析法纯化表达产物,蛋白质印迹(Western blotting)分析其反应原性。以SjEFCAB为包被抗原,采用间接ELISA方法检测日本血吸虫病(78份)、华支睾吸虫病(5份)、猪囊尾蚴病(10份)、卫氏并殖吸虫病(6份)和旋毛虫病(9份)患者血清,以及健康人血清(50份),评价该重组蛋白的免疫学诊断效果。结果构建了重组质粒pGEX-4T-1-SjEFCAB,并在E.coli BL21中高效表达,经亲和层析纯化获得可溶性重组蛋白SjEFCAB。Western blotting分析结果显示,重组蛋白SjEFCAB能被感染兔血清和血吸虫病患者血清所识别,在相对分子质量(Mr)约为8 200处出现条带。间接ELISA检测日本血吸虫病患者血清的敏感性为82.1%(64/78),特异性为95.0%(76/80)。与华支睾吸虫病患者、猪囊尾蚴病患者和旋毛虫病患者血清的交叉反应分别为1/5、1/10和1/9,与卫氏并殖吸虫病患者血清无交叉反应(0/6)。结论日本血吸虫SjEFCAB重组抗原具有较高的免疫学诊断价值。
- 卢艳徐斌鞠川莫筱瑾陈绅波冯正王小宁胡薇徐斌
- 关键词：日本血吸虫免疫诊断
- 天然萜类化合物的抗寄生虫作用研究进展
- 2013年
- 人们临床上应用的许多药物都直接或间接来源于天然产物。其中，植物中发现的多种萜类化合物有抗寄生虫作用．如抗疟原虫、抗利什曼原虫、抗锥虫、抗刚地弓形虫等。该文对近年来来源于各种植物的萜类化合物对不同寄生虫的作用进行综述。
- 殷梦张皓冰
- 关键词：萜类化合物抗寄生虫
- 4种苯并咪唑类药物在4种油性分散介质中的溶解度被引量：1
- 2012年
- 目的探讨4种苯并咪唑类药物(阿苯达唑,丙氧咪唑,芬苯达唑和氟苯达唑)分别在4种油性分散介质中的溶解度。方法应用高效液相色谱法(HPLC)测定4种苯并咪唑类药物的溶解度。结果在分散介质油酸、油酸油醇脂、油酸乙酯、大豆油和水中,阿苯达唑的溶解度分别为(3414±38)、(72.5±2.9)、(57.2±4.4)、(139±8)和(0.63±0.04)μg/mL;丙氧咪唑的溶解度分别为:(3774±106)、(86.7±5.2)、(62.7±7.4)、(10.7±0.5)和(1.4±0.1)μg/mL;芬苯达唑的溶解度分别为:(1790±47)、(258±17)、(376±36)、(197.2±1.9)和(11.4±0.3)μg/mL;氟苯达唑的溶解度分别为:(427±32)、(16.9±0.1)、(26.4±2.3)、(5.8±0.4)和(0.04±0.00)μg/mL。结论 4种苯并咪唑类药物在油酸中的溶解度远较其他油相的为高。
- 姜斌张皓冰刘丛珊陶奕
- 关键词：苯并咪唑类药物阿苯达唑芬苯达唑溶解度
- 基于GC/MS技术的赤桉叶提取物灭螺谱-效关系动态分析
- 2014年
- 目的确定赤桉叶中主要GC/MS峰所代表的化学成分以及其对杀螺作用的贡献,探索一条从天然产物中寻找有效成分的快捷途径。方法在同一地点连续采集12个月的赤桉树叶,并采用二氯甲烷提取;利用GC/MS技术分析其化学成分;采用室内浸杀法进行杀螺药效实验并计算LC50;利用灰色系统理论建模软件对12个月赤桉叶提取物的主要成分及其相应提取物的杀螺活性作灰色关联分析。结果赤桉树叶的二氯甲烷提取物均表现出较好的杀螺活性,尤以6月和7月采集的样品杀螺作用最强,其LC50分别为0.257 mg/L和0.242 mg/L,而1月和12月的样品杀螺作用最弱,LC50分别为6.802 mg/L和5.406 mg/L。GC/MS分析鉴定了16个主要化学成分,多为单萜及倍半萜类化合物;与杀螺活性的灰色相对关联度均>0.5,其中5个成分的灰色关联度>0.9,分别为4,4,8-三甲基[6.3.1.0(1,5)]三环十二烷-2,9-二醇、(-)-桉油烯醇、(-)-桉油烯醇的同分异构体或类似物、1,8-桉叶油素、喇叭茶醇。结论赤桉叶二氯甲烷提取物中多个成分与杀螺活性均表现出了较好的关联度,提示其杀灭钉螺作用可能是多种化学成分共同作用的结果。
- 殷梦陶奕朱丹张皓冰
- 关键词：赤桉钉螺灰色关联分析
- 日本血吸虫虫卵cDNA文库的免疫筛选和阳性克隆的鉴定被引量：5
- 2012年
- 目的寻找可用于日本血吸虫病诊断或疗效考核的抗原分子。方法在安徽省安庆市某现场,采集经粪检(Kato-Katz法,2送6检)日本血吸虫卵阳性的10份患者血样,患者年龄13～64岁,EPG为4～172;并收集该10例患者经吡喹酮(60 mg/kg×2 d)治疗6个月后的血样,将吡喹酮治疗前和治疗后的血清各10份分别混合,分别筛选虫卵cDNA文库,将所获阳性克隆分类,测定阳性克隆插入片段的DNA序列,经BLAST程序分析同源性,并利用在线的生物信息学软件预测阳性克隆基因编码蛋白的结构和功能。结果初次筛选共获得75个阳性克隆,其中46个阳性克隆吡喹酮治疗前和治疗后的日本血吸虫病患者血清反应一致(为Ⅰ类),21个阳性克隆吡喹酮治疗前的血清强于治疗后的(为Ⅱ类);8个阳性克隆吡喹酮治疗后的血清强于治疗前的(为Ⅲ类)。结合反应强度、分类和插入片段的大小选择了14个阳性克隆进行测序和生物信息学分析,多数阳性克隆插入片段均属于虫卵毛蚴抗原家族,1个阳性克隆的插入片段与含EF-hand结构域的钙结合蛋白具有一定的同源性(分值=143),1个阳性克隆的插入片段与应激反应组分1前体具有较高的同源性(分值=487),其余阳性克隆的插入片段仅与假定蛋白有一定的同源性,蛋白功能无明确注释。结论用吡喹酮治疗前后的日本血吸虫病患者血清筛选虫卵cDNA文库,获得的29个阳性克隆在吡喹酮治疗前后有差异。
- 卢艳徐斌鞠川莫筱瑾陈绅波冯正王小宁胡薇
- 关键词：日本血吸虫虫卵CDNA文库免疫筛选疗效考核
- 小鼠口服3种苯并咪唑类药物的油酸、大豆油和1%西黄耆胶混悬剂的药动学被引量：1
- 2012年
- 目的观察3种苯并咪唑类药物(阿苯达唑、芬苯达唑或氟苯达唑)的3种混悬剂(油酸、大豆油和1%西黄耆胶的混悬剂)在小鼠体内的药动学参数及其在相应介质中溶解度和生物利用度的相关性。方法用球磨机制备阿苯达唑、芬苯达唑或氟苯达唑在油酸、大豆油和1%西黄耆胶的混悬剂(作对照剂型)。每组45～54只小鼠1次口服1种上述的苯并咪唑类药物混悬液,剂量除阿苯达唑选用100 mg.kg-1外,其余芬苯达唑和氟苯达唑均为50 mg.kg-1,并于给药后0.25～24 h的不同间隔时间取血,用高效液相色谱法测定血药浓度,用DAS程序计算3种苯并咪唑类药物的药动学参数。结果小鼠口服3种苯并咪唑类药物在油酸、大豆油和1%西黄耆胶混悬剂后,阿苯达唑的平均滞留时间(MRT)分别为(3.91±0.29)、(3.70±0.09)和(1.59±0.14)h,峰浓度(ρmax)分别为(0.66±0.08)、(0.29±0.05)和(0.34±0.09)mg.L-1,药物浓度-时间曲线下面积(AUC)分别为(3.19±0.40)、(1.25±0.09)和(0.50±0.05)mg.L.h-1,相对生物利用度F(油酸或大豆油混悬剂组的AUC与1%西黄耆胶混悬剂组AUC之比,下同)分别为6.38和2.50;芬苯达唑的MRT分别为(5.72±0.14)、(4.83±0.38)和(3.85±0.25)h,ρmax分别为(0.70±0.11)、(0.20±0.05)和(0.12±0.03)mg.L-1,AUC分别为(5.02±0.73)、(1.08±0.21)和(0.52±0.07)mg.h.L-1,F分别为9.65和2.08;氟苯达唑的MRT分别为(5.71±0.37)、(4.59±0.39)和(3.34±0.20)h,ρmax分别为(0.93±0.14)、(0.58±0.09)和(0.41±0.09)mg.L-1,AUC分别为(6.90±0.73)、(3.33±0.39)和(1.94±0.55)mg.h.L-1;F分别为3.57和1.72。结论小鼠一次口服阿苯达唑、芬苯达唑或氟苯达唑的2种油相混悬剂后,与1%西黄耆胶混悬剂相比,其药动学参数明显改善,延长了MRT,提高了ρmax,同时增加了AUC和F,而且3种苯并咪唑类药物在3种介质中的溶解度与其在小鼠体内的MRT、ρmax、AUC基本呈正相关。
- 姜斌张皓冰刘丛珊陶奕
- 关键词：苯并咪唑类药物油酸大豆油混悬剂药动学
- 桉叶提取物抗菌作用及主要挥发性成分的年度变化被引量：6
- 2015年
- 目的分析云南省临沧市永德县10年树龄赤桉、蓝桉和大叶桉的叶片提取物中挥发性成分的含有量变化情况,并研究其抑菌作用。方法连续12个月采摘3种桉叶片,阴干后分别用二氯甲烷和无水乙醇超声提取,对两提取物进行GC/MS分析,并用琼脂平板扩散法测定其抑菌活性。结果蓝桉含挥发性成分量最高,赤桉最低。无水乙醇桉叶提取物的抗菌活性均强于二氯甲烷桉叶提取物,对革兰氏阳性菌的抑制作用均强于对革兰氏阴性菌,但桉叶的主要成分1,8-桉叶油素抑菌活性很弱。结论同一月份3种桉叶提取物以及同一种桉叶不同月份提取物的挥发性成分含有量和抗菌活性均有差异,而且其抑菌成分可能与1,8-桉叶油素相关不大,需作进一步研究。
- 陶奕殷梦张皓冰
- 关键词：赤桉蓝桉大叶桉革兰氏阳性菌抗菌作用
