广东省医学科学技术研究基金(A2009179)
- 作品数：4 被引量：30H指数：3
- 相关作者：符岳姜骏黄子通常建星蒋龙元更多>>
- 相关机构：中山大学孙逸仙纪念医院中山大学中山大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：广东省医学科学技术研究基金国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 大鼠窒息法心搏骤停脑复苏模型的建立与评价被引量：7
- 2014年
- 目的建立和评价大鼠窒息法心搏骤停脑复苏模型，探讨合适的窒息（AP）时间。方法实验在中山大学心肺脑复苏研究所完成。126只雄性SD大鼠随机（随机数字法）分为假手术组和实验组，通过静脉注射维库溴铵诱导窒息心搏骤停，实验组根据窒息时间不同分为AP4、AP6和AP8组，分别于心搏停止后4、6、8min给予机械胸外按压和同步通气复苏。记录复苏基本情况，复苏后1、3、7d，检测脑含水量、NDS评分、MRI影像学改变、脑组织病理损伤和神经元凋亡。统计分析采用单因素方差分析或X2检验，以P〈0．05为差异有统计学意义。结果复苏后第1天各实验组的NDS评分最低，复苏后3d脑含水量增加和MRI影像学损伤明显，7d时脑组织病理损伤和神经元凋亡达到高峰。AP4、AP6和AP8组复苏后24h存活率分别为85％、75％和45％，AP8组的ROSC率及24h存活率显著低于AP4和AP6组（P〈0．01）。随着窒息时间延长，各实验组大鼠复苏后脑水肿及影像学、组织学、神经功能损伤逐渐加重，其中AP8组各指标损伤最严重，AP6组损伤程度适中。结论成功构建了大鼠窒息法心搏骤停脑复苏模型，结合复苏存活率和脑组织损伤程度，建议将窒息6min作为该模型合适的缺血时间。
- 姜骏李旷怡常瑞明常建星符岳黄子通
- 关键词：心搏骤停心肺脑复苏窒息脑含水量神经功能缺损评分
- Caspase抑制剂对体外氧糖剥夺损伤大鼠海马神经元的保护作用被引量：1
- 2014年
- 目的 探讨Caspase抑制剂对体外氧糖剥夺损伤大鼠海马神经元的保护作用及机制. 方法 新生SD乳鼠海马神经元经体外原代培养7d后分为对照组、氧糖剥夺/复氧组、Caspase抑制剂苄氧羰基-缬氨酰-丙氨酰-门冬氨酰氟甲基酮（Z-VAD-FMK）组和二甲基亚砜（DMSO）组,其中氧糖剥夺/复氧组氧糖剥夺6h后复糖复氧,Z-VAD-FMK组在氧糖剥夺复氧过程中加入20 μmol/L Z-VAD-FMK,DMSO组在氧糖剥夺复氧过程中加入1‰药物溶媒DMSO.复氧复糖24 h后光镜及电镜下观察各组海马神经元的形态学变化,MTT比色法测定细胞存活率和培养液中乳酸脱氢酶（LDH）含量,Annexin V-FITC/PI双染后流式细胞仪检测神经元凋亡率,比色法测定神经元Caspase-3活性,Western blotting法分析Caspase-3活性蛋白表达. 结果 氧糖剥夺/复氧组细胞胞体肿胀,部分胞膜破裂,细胞完整性破坏,细胞核水肿,线粒体肿胀,嵴排列混乱;Z-VAD-FMK组细胞损伤较氧糖剥夺/复氧组减轻,大多数神经元形态完整,细胞内颗粒增多,细胞器肿胀减轻,线粒体嵴结构存在,分布较规则.与氧糖剥夺/复氧组比较,Z-VAD-FMK组海马神经元吸光度值（0.204±0.019 vs 0.303±0.018）及细胞存活率（0.481％±0.045％vs 0.704％±0.040％）明显增高,LDH含量[（406.500±21.286） U/L vs（326.000±20.278） U/L]明显降低,细胞凋亡率（49.700％±3.100％vs 29.820％±2.839％）明显降低,反应Caspase-3活性片段的吸光度值明显降低,Caspase-3活性蛋白表达（1.070±0.077 vs 0.785±0.058）明显下降,差异均有统计学意义（P＜0.05）. 结论 Caspase抑制剂可通过抑制Caspase-3蛋白活性,减轻海马神经元的体外氧糖剥夺损伤.
- 姜骏蒋龙元符岳毛小英罗银秋谭健韶颜梅
- 关键词：CASPASE抑制剂海马神经元
- 大鼠海马神经元体外氧糖剥夺／复氧模型的构建被引量：14
- 2010年
- 目的建立体外培养的大鼠海马神经元氧糖剥夺（OGD）／复氧实验模型，并尝试确定该模型最合适的缺氧缺糖时间点。方法新生SD乳鼠海马神经元原代培养7d后，随机（随机数字法）分为OGD组和对照组。OGD组根据氧糖剥夺时间的不同又分为1h，2h，4h，6h，8h，10h亚组。OGD组细胞置于含0．5％氧气的三气培养箱，同时将培养液换成无糖Earle氏液，模拟体内脑缺血损伤。复氧复糖24h后观察对照组和OGD各组的神经元形态，测定MTF细胞光密度值（OD）和培养液LDH含量，流式细胞仪检测细胞凋亡率。所得数据采用SPSS16．0统计软件行单因素方差分析（Durmett—t检验）和Spearman等级相关分析。结果随着缺氧缺糖时间的延长，OGD各组神经元形态学损伤逐步加重，细胞OD值和存活率逐渐下降（rs=-0．961和rs=-0．966，P〈0．01），LDH值逐渐升高（rs=0．990，P〈0．01），细胞凋亡率明显增加，与对照组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。OGD6h时，细胞的凋亡率接近50％。结论成功建立了大鼠海马神经元体外氧糖剥夺／复氧模型，结合形态学改变和细胞凋亡率，建议将6h作为该模型合适的缺氧缺糖损伤时间。
- 姜骏符岳方向韶常建星蒋龙元黄子通
- 关键词：海马神经元凋亡
- 心肺复苏对心脏骤停大鼠脑线粒体功能的保护作用被引量：8
- 2013年
- 【目的】探讨心肺复苏对心脏骤停大鼠脑神经元线粒体功能的保护作用。【方法】建立大鼠室颤法心脏骤停模型,缺血组心跳停止15 min,不行心肺复苏,复苏组心跳停止10 min,行5 min心肺复苏。15 min末处死动物,分离提取海马脑组织线粒体,用Clark氧电极法检测线粒体呼吸功能,线粒体内、外膜试剂盒测定线粒体膜完整性,电镜观察线粒体超微结构。【结果】心脏骤停后,缺血组和复苏组的线粒体外膜完整率、内膜膜电位、呼吸控制率均较假手术组明显降低(P<0.01),复苏组结果高于缺血组(P<0.01),形态学比较各组间无显著差异。【结论】心脏骤停早期,神经元线粒体损伤以功能性为主,形态学改变不明显,心肺复苏可改善缺血神经元的线粒体功能,减轻脑线粒体损伤。
- 符岳姜骏许婉华罗银秋毛小英谭健韶黄子通
- 关键词：心肺复苏心脏骤停线粒体
