广东省中医药局建设中医药强省科研课题(2009319)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 相关作者：韩漫夫任力杰王洋张朝东更多>>
- 相关机构：深圳市第二人民医院中国医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：广东省中医药局建设中医药强省科研课题更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 锌及碱性成纤维细胞生长因子单独或联合应用体外培养骨髓间充质干细胞的生长及增殖被引量：1
- 2010年
- 背景：如何简便有效的在体外大量扩增骨髓间充质干细胞,已成为神经科学研究热点。目的：观察锌及碱性成纤维细胞生长因子单独或联合应用对骨髓间充质干细胞体外生长及增殖的影响,以寻求体外快速、大量增殖骨髓间充质干细胞的有效方法。方法：体外培养大鼠骨髓间充质干细胞。实验分为对照组（不加任何影响因子）、锌组、碱性成纤维细胞生长因子组、锌＋碱性成纤维细胞生长因子组,分别用特定浓度的锌及碱性成纤维细胞生长因子单独或联合应用。观察细胞生长曲线,用四唑盐比色法观察存活和增殖能力,流式细胞仪检测细胞周期,进行细胞表面抗原的鉴定。结果与结论：细胞生长曲线、四唑盐比色法、流式细胞仪结果均显示,第3~5天各组增殖能力达高峰,其中锌＋碱性成纤维细胞生长因子组增殖能力最强（P〈0.05）。第7天,对照组及单独应用碱性成纤维细胞生长因子和锌组细胞增殖力均有所下降,仅锌＋碱性成纤维细胞生长因子组细胞仍保持较强的增殖（P〈0.05）。锌＋碱性成纤维细胞生长因子组细胞中处于S＋G2＋M期的百分率最大,与其他3组相比差异有显著性意义（P〈0.01）。结果证实,锌和碱性成纤维因子均有促进体外培养的骨髓间充质干细胞增殖的作用,联合应用锌和碱性成纤维细胞生长因子促增殖作用最强,可以作为体外扩增培养骨髓基质细胞的最佳培养条件。
- 任力杰王洋韩漫夫
- 关键词：锌骨髓间充质干细胞碱性成纤维细胞生长因子细胞增殖
- 体外增殖培养的骨髓间充质干细胞移植后在脑梗死大鼠脑内的存活
- 2009年
- 目的观察应用维生素C(Vc)和碱性成纤维因子(bFGF)对骨髓间充质干细胞(BMSCs)体外增殖培养,移植到脑梗死大鼠体内后,在脑内的存活情况。方法①采用密度梯度离心及贴壁法分离大鼠BMSCs。按培养液中加入的不同因子分为4组:对照组、Vc组(50μg/ml)、bFGF组(1μg/L)以及Vc+bFGF组(50μg/ml Vc和1μg/L bFGF),在体外对BMSCs进行培养并观察各组细胞的增殖情况。采用MTT比色法分别于培养第1、2、3、5和7天,测定细胞在450nm波长处的吸光度(A)值;采用流式细胞仪检测培养96 h后的细胞周期。②采用线栓法制备20只大鼠右侧大脑中动脉闭塞2 h模型,并随机分为2组:联合Vc++bFGF培养的BMSCs移植组(10只)和对照BMSCs移植组(10只)。将相应组别的BMSCs细胞移植入脑梗死24 h后的大鼠体内。分别于移植后第1、2和3周,制备大鼠脑组织切片并行BrdU免疫组化染色。结果①形态学观察显示,Vc+bFGF组的BMSCs增殖最快,对照组则相对缓慢。②各组细胞的A值于培养第2天开始增加,Vc组和bFGF组在第3天达到高峰(F=728.52和F=197.18,P<0.05),Vc+bFGF组在第5天达到高峰(F=1771.32,P<0.05),第7天均有所下降。第2天起,bFGF组、Vc组与bFGF+Vc组的,A值均高于对照组;第3天起,Vc+bFGF组高于Vc组与bFGF组,差异均有统计学意义(P<0.05)。③Vc组、bFGF组与 Vc+bFGF组细胞处于增殖期(S+G2+M期)的开分比均较对照组高,差异有统计学意义(P<0.05)。④BMSCs移植后第2周,联合Vc+bFGFt培养的BMSCs移植组大鼠脑组织切片中BrdU阳性细胞计数较对照组高;第3周两组阳性细胞计数均有下降,但前者仍较后旨高。差异均有统计学意义(P<0.01);Brdu阳性细胞主要分布在梗死灶周围。结论 Vc与bFGF均可促进大鼠BMSCs的增殖,二者联用较单用其一的效果更好;脑梗死大鼠移植增殖培养后的BMSCs,其在脑组织中的成活能力明显增强。
- 王洋任力杰韩漫夫张朝东
- 关键词：间质干细胞成纤维细胞生长因子2细胞移植
