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超声辐照声诺维与重组腺相关病毒经不同途径转染大鼠视网膜的实验研究被引量：2: 2010年; 目的探讨超声辐照微泡造影剂声诺维（SonoVue）能否增强rAAV2-EGFP转染视网膜的效率.方法 62只Wistar大鼠进行玻璃体腔（10只）及视网膜下（52只）注射.实验分组：病毒＋生理盐水、病毒＋微泡、病毒＋生理盐水＋超声辐照和病毒＋微泡＋超卢辐照.第4、7、35、49、120 d分别用荧光体视镜观察,利用软件进行定量分析,并进行组织切片光镜检查.结果玻璃体腔注射组持续观察2个月未见荧光;视网膜下注射组的超声辐照微泡组在第4、7、35 d较其他组转染效率高,超声辐照微泡造影剂对眼底组织无明显损伤.结论超声辐照SonoVue可在体内促进rAAV2-EGFP转染大鼠视网膜.; 李红丽杜联芳郑孝志王慧萍钱锦王丰李惠明; 关键词：超声疗法视网膜转染腺病毒科

超声靶向破坏微泡介导基因转染的研究进展被引量：3: 2008年; 超声靶向破坏微泡（ultrasound—targeted microbubble destruction，UTMD）是一项新兴的介导基因转染的技术，较传统病毒载体介导的基因感染方法具有更为安全及组织靶向性的优势。近十多年来，学者们对UTMD研究不断深入，利用该技术进行体内外基因转染的实验研究取得了一定的成果。; 李凡杜联芳; 关键词：病毒载体介导基因转染微泡超声体内外

超声辐照微泡介导脂质体小干扰RNA转染视网膜色素上皮细胞被引量：2: 2010年; 目的探讨超声靶向破坏超声微泡介导脂质体小干扰RNA(siRNA)转染视网膜色素上皮(RPE)细胞的价值。方法将人及大鼠RPE细胞隔孔接种于24孔板中(2×105/孔、1×105/孔),分5组处理:siRNA+超声(US)、siRNA+微泡(MBs)+US、siRNA+脂质体(L)、siRNA+L+US、siRNA+L+MBs+US。12小时后,荧光显微镜观察并应用流式细胞仪测定阳性细胞比例。结果在无脂质体的条件下,超声或超声联合微泡不能促进siRNA转染人及大鼠RPE细胞。siRNA+L+US组siRNA转染人RPE细胞效率最高。siRNA+L+US+MB组siRNA转染人及大鼠RPE细胞的效率显著低于siRNA+L+US组。结论超声辐照可促进脂质体介导的siRNA转染人RPE细胞。; 李红丽杜联芳郑孝志王慧萍顾青陈霞芳; 关键词：超声微泡小干扰RNA 视网膜色素上皮细胞

超声辐照人血白蛋白微球与腺相关病毒感染人视网膜色素上皮细胞被引量：4: 2010年; 目的探讨超声辐照全氟丙烷人血白蛋白微球促进携带增强型绿色荧光蛋白的2型重组腺相关病毒(rAAV2-EGFP)感染人视网膜色素上皮(RPE)细胞的价值。方法HRPE细胞隔孔接种于24孔板中(2×105/孔),加入微球与rAAV2-EGFP的混合液,在不同条件下进行超声辐照。48h后,应用流式细胞仪测定阳性细胞比例,并且评估不同辐照条件对细胞增殖有无影响。结果在声强1.0W/cm2,辐照持续时间60s,微泡细胞比值60∶1的条件下,全氟丙烷人血白蛋白微球组EGFP阳性细胞比例较对照组显著提高(P<0.001),MTS染色细胞生存率大于90%。结论超声辐照全氟丙烷人血白蛋白微球能够安全地提高rAAV2-EGFP对人RPE细胞的感染效率。; 李红丽杜联芳王慧萍顾青陈霞芳; 关键词：超声微泡依赖病毒视网膜色素上皮细胞

超声辐照与丁酸钠对腺相关病毒转染大鼠视网膜色素上皮细胞的影响: 2012年; 目的探讨超声辐照与丁酸钠在携带增强型绿色荧光蛋白的2型重组腺相关病毒(rAAV2-EGFP)感染大鼠视网膜色素上皮(RPE)细胞中的应用价值。方法大鼠RPE细胞接种于24孔板中,分别以rAAV2-EGFP(对照组)、rAAV2-EGFP+超声辐照(超声辐照组,辐照时间60 s,声强0.5、1 W/cm2)、rAAV2-EGFP+不同终浓度丁酸钠(丁酸钠组)转染大鼠RPE细胞。转染后48 h,倒置荧光显微镜观察转染细胞EGFP表达情况,流式细胞仪检测细胞转染效率(EGFP阳性细胞百分率);转染后24 h,MTS法检测细胞增殖。结果流式细胞仪检测结果显示:超声辐照组和丁酸钠组EGFP阳性细胞百分率显著高于对照组(P<0.05),丁酸钠组转染效率提高的百分率显著高于超声辐照组(P<0.05)。细胞增殖检测结果显示,超声辐照组转染细胞的吸光度值显著高于丁酸钠组(P<0.05)。结论丁酸钠和超声辐照均能提高rAAV2-EGFP对大鼠RPE细胞的转染效率,其中丁酸钠的效果显著,而超声辐照对细胞增殖的抑制程度较轻。; 李红丽杜联芳李凤华王慧萍; 关键词：超声辐射丁酸钠腺相关病毒视网膜色素上皮细胞

超声靶向辐照微泡造影剂介导重组腺相关病毒转染肾癌细胞被引量：1: 2011年; 目的以肾癌细胞为研究对象,探索超声靶向破坏微泡（UTMD）技术对重组腺相关病毒（rAAV）转染率的影响。方法应用不同感染复数（MOI）的rAAV2转染786-0细胞观察转染率。用不同条件UTMD预辐照rAAV2,观察病毒活性。以不同条件UTMD联合rAAV2转染人肾透明细胞癌（786-0）细胞,测定转染率及细胞生存率,RT-PCR检测细胞内病毒载体基因拷贝数。结果 1×10^4-1×10^6MOI的rAAV2在786-0细胞的转染率为（17.28±2.44）%。UTMD声强≤2.0 W/cm2,时间≤120 s,微泡体积比≤40%,频率1 MHz,占空比（DC）50%,脉冲重复频率（PRF）100 Hz时,UT-MD辐照不影响rAAV2的转染活性。在不影响细胞生存率及rAAV2活性的参数下（声强1 W/cm2,时间60 s,微泡体积比20%,频率1 MHz,DC 50%,PRF 100 Hz）,UTMD介导rAAV2组细胞的转染率较单纯rAAV组提高2~3倍,并在5天内稳定维持提高效应;实时PCR显示,UTMD介导rAAV2组细胞内病毒载体量较单纯rAAV组提高近9倍。结论 UTMD可安全、有效且稳定地提高rAAV2在肾癌细胞的转染率。; 李凡杜联芳王惠萍韦芳; 关键词：超声学微泡腺病毒科依赖病毒细胞

超声微泡造影剂声诺维与基因转染的研究被引量：1: 2009年; 超声微泡是一种新型基因转染的载体，超声辐照微泡（SonoVue）可增加基因在体内及体外的转染效率。若在不损伤基因和组织的前提下促进基因的转染，合适的辐照条件是非常重要的。; 李红丽杜联芳; 关键词：超声检查造影剂基因转染

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