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国家自然科学基金(30170911)

作品数:8 被引量:25H指数:3
相关作者:王春友刘涛周峰万赤丹许逸卿更多>>
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文献类型

  • 8篇中文期刊文章

领域

  • 8篇医药卫生

主题

  • 6篇细胞
  • 5篇胰腺
  • 4篇胰岛
  • 4篇分化
  • 3篇上皮
  • 3篇上皮细胞
  • 3篇切除
  • 3篇干细胞
  • 3篇大鼠胰腺
  • 2篇定向分化
  • 2篇胰岛移植
  • 2篇体外
  • 2篇体外诱导
  • 2篇切除后
  • 2篇细胞分化
  • 2篇PDX-1
  • 1篇导管
  • 1篇形态学
  • 1篇形态学观察
  • 1篇胰岛样细胞

机构

  • 7篇华中科技大学

作者

  • 6篇王春友
  • 5篇刘涛
  • 4篇万赤丹
  • 4篇周峰
  • 3篇许逸卿
  • 3篇范骥
  • 2篇熊炯忻
  • 1篇吴河水
  • 1篇陶京
  • 1篇陈立波
  • 1篇姜小兵
  • 1篇勾善淼
  • 1篇杨智勇
  • 1篇杨炼
  • 1篇熊炯炘
  • 1篇王春友

传媒

  • 5篇中华实验外科...
  • 1篇中华器官移植...
  • 1篇胰腺病学
  • 1篇Journa...

年份

  • 1篇2007
  • 1篇2006
  • 4篇2004
  • 1篇2003
  • 1篇2002
8 条 记 录,以下是 1-8
排序方式:
大鼠胰腺次全切除后导管细胞同源盒基因-1表达规律研究
2004年
目的 研究大鼠胰腺大部分切除术后,残余胰腺导管上皮细胞转录因子胰-十二指肠同源盒基因(PDX)-1表达规律,探讨PDX-1表达的意义。方法手术切除大鼠胰腺约90%组织,不同时间点处死动物后取材,解剖显微镜下游离胰腺导管,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)与Western blot检测导管上皮中PDX-1 mRNA和蛋白表达。结果实验组手术后第2天与第3天导管上皮细胞PDX-1蛋白表达显著升高,高于对照组两倍以上,与对照组比较差异有显著性(P<0.05),第5天到第7天逐渐恢复到对照组水平;实验组在各时间点PDX-1 mRNA表达水平与对照组无明显差异(P>0.05)。结论残余胰腺再生过程中导管上皮细胞中出现PDX-1高表达,表明胰腺干细胞参与残余胰腺再生,且PDX-1表达受转录后调控。
刘涛王春友许逸卿熊炯忻万赤丹周峰
关键词:PDX-1胰腺上皮细胞同源盒基因切除后
大鼠胰腺导管上皮细胞体外分离与定向分化
2007年
目的分离和纯化大鼠的胰腺导管上皮细胞,在体外培养并诱导其向胰岛细胞定向分化。方法采用胶原酶逆行灌注法消化、密度梯度离心结合不同细胞贴壁差异性分离和纯化胰腺导管上皮细胞;以角蛋白-19(CK-19)免疫细胞化学染色进行鉴定;用RMPI 1640+含体积分数为10%的胎牛血清(FBS)培养基培养促进胰导管上皮细胞增殖,1周后,更换无血清培养基DMEM/F12并加入角朊细胞生长因子等进一步促进其增殖,细胞达80%汇合时传代,加入高糖及尼克酰胺促进胰导管上皮细胞向胰岛细胞定向分化;对胰岛样结构行双硫腙染色。结果CK-19染色结果证实所获细胞绝大多为导管上皮细胞。体外培养中导管上皮细胞24h开始贴壁,14~21d达80%融合并形成细胞克隆,第28d胰岛细胞样结构形成,且被双硫腙染成猩红色。结论采用密度梯度离心结合差异贴壁法可获得纯化的大鼠胰腺导管上皮细胞,在体外培养与诱导分化条件下可生成胰岛样结构。
刘涛勾善淼吴河水熊炯炘周峰万赤丹王春友
关键词:胰腺上皮细胞胰岛
猪胰管上皮细胞体外诱导分化为胰岛的形态鉴定与功能测定被引量:3
2004年
目的对成年猪胰管上皮细胞体外培养,促进增殖与分化,并对衍生胰岛进行形态鉴定和功能测定。方法在有血清培养基中行导管上皮细胞原代培养,无血清培养基中加入表皮生长因子和尼克酰胺诱导胰管上皮细胞分化,衍生胰岛行双硫腙(DTZ)染色,逆转录多聚酶链反应(RTPCR)检测胰岛素基因(Ins)和上皮细胞标志抗原(CK19)在衍生胰岛和成熟胰岛中表达,放射免疫法(RIA)测定衍生胰岛与成熟胰岛分泌胰岛素的功能。结果培养第28天细胞汇合并开始出芽形成胰岛样细胞团;衍生胰岛双硫腙染色阳性,同时表达Ins基因和CK19基因,成熟胰岛仅表达Ins基因;衍生胰岛在基础相胰岛素分泌量为(1.86±1.24)ng,刺激相为(4.43±1.59)ng,差异有显著性(P<0.05)。结论猪胰管上皮细胞在体外培养条件下可分化为胰岛,衍生胰岛表达β细胞表面标志并能分泌胰岛素。
刘涛范骥许逸卿万赤丹周峰王春友
关键词:体外诱导分化胰岛胰岛移植
转化生长因子-β1对大鼠同种胰岛移植物的影响被引量:1
2002年
目的 研究转化生长因子 β1 (TGF β1 )对大鼠同种胰岛移植物体内外的内分泌功能及存活的影响。方法 构建TGF β1的真核表达载体 pcDNA3 TGF ,并将其转染纯化后的Wistar大鼠胰岛 ,逆转录 聚合酶链式反应 (RT PCR)检测TGF β1和大鼠胰岛素 (Ins1 )在实验组和对照组胰岛中的表达 ,放射免疫法 (RIA)检测体外培养液中的胰岛素含量 ;链脲霉素 (STZ) 60mg/kg体重腹腔内注射制作SD大鼠模型 ,分别将实验组和空白对照组Wistar胰岛移植到受体SD大鼠的肾包囊下 ,观察其在体内逆转糖尿病的作用以及作用时间的长短 ,并检测受体大鼠的糖耐量。结果 实验组胰岛有TGF β1和Ins1的表达 ,而对照组仅有Ins1的表达 ;实验组体外培养液中的胰岛素含量在基础相和刺激相分别为 (3 .86± 1 .2 4 ) μg/L和 (8.43± 1 .59) μg/L ,对照组体外培养液中的胰岛素含量在基础相和刺激相分别为 (4.1 3± 1 .45) μg/L和 (8.95± 1 .74) μg/L ,组间差异无显著性 (P>0 .0 5) ,而组内差异有显著性 (P <0 .0 5) ;实验组平均正常血糖维持时间 (2 6 .8± 2 .9)d比对照组的 (1 3 .2± 4 .5)d显著延长。对照组糖耐量曲线均明显高于实验组。结论 TGF β1对胰岛移植物的内分泌功能无损害作用 。
范骥王春友
关键词:转化生长因子-Β1胰岛移植
大鼠胰腺部分切除后导管细胞增殖规律研究被引量:5
2004年
目的 探讨大鼠胰腺大部分切除术后残余胰腺组织导管上皮细胞增殖的时空规律 ,明确胰腺干细胞组织定位。方法 手术切除大鼠胰腺 90 %组织 ,不同时间点处死动物后取材 ,免疫组织化学染色 ,5 溴脱氧嘧啶核苷 (BrdU )标记 ,观察不同分类胰腺导管上皮细胞以及腺泡细胞着色并计算染色指数。结果 建模后第 1天主胰管、大胰管、小胰管细胞均出现增殖高峰 ,其中小胰管增殖持续到大鼠建模后第 5天 ,与对照组比较差异有非常显著性 (P <0 .0 0 1) ;腺泡细胞仅在建模后第 5天出现小的增殖峰 ;建模后第 7天破坏的小叶结构基本恢复 ,胰腺导管周围有新生胰岛形成。结论 大鼠胰腺大部分切除后 ,胰腺再生过程中出现了胰腺干细胞增生与分化 ,而且胰腺干细胞主要位于导管上皮细胞中。
刘涛王春友许逸卿熊炯忻万赤丹周峰陶京杨智勇
关键词:胰腺干细胞细胞增殖
骨髓基质干细胞分化为胰岛样细胞的形态学观察被引量:11
2004年
目的 探讨体外自体骨髓基质干细胞 (MSC)定向诱导分化为胰岛样细胞的可能性。方法 对Wistar大鼠MSC进行体外培养 ,通过不同的条件诱导MSC向胰岛样细胞分化 :LN组 ,10mmol/L尼克酰胺 + 1mmol/Lβ 巯基乙醇的低糖Dulbecco最低必须培养基 [L DMEM ,含 2 0 %胎牛血清 (FSC) ]预先诱导 2 4h ,10mmol/L尼克酰胺 + 1mmol/Lβ 巯基乙醇的无血清高糖Dulbecco最低必须培养基 (H DMEM )诱导 10h。HN组 ,含 2 0mmol/L尼克酰胺的L DMEM (2 0 %FSC)预先诱导 2 4h ,2 0mmol/L尼克酰胺的无血清H DMEM诱导 10h。通过倒置显微镜观察诱导细胞的形态学变化。结果 LN、HN组细胞均可见部分骨髓基质干细胞分化、增殖 ,形成胰岛样细胞团 ,部分细胞向神经元样细胞分化 ;对照组细胞未见明显分化。结论 体外诱导骨髓基质干细胞定向分化为胰岛样细胞存在可行性。
陈立波姜小兵王春友杨炼
关键词:骨髓基质干细胞胰岛样细胞形态学观察定向分化
Proliferation and Differentiation of Duct Epithelial Cells after Partial Pancreatectomy in Rats被引量:3
2006年
The proliferation and differentiation of pancreatic duct epithelial cells in remnant pancreas during regeneration after partial pancreatectomy in rats were studied, and the source of pancreatic stem cells was characterized. Partial (90 %) pancreatectomy was performed on 4- to 5-week-old Sprague-Dawley rats, and different duct epithelial cells and acinar cells were detected by immunohis-trochemical stain method and scored using 5-bromo-2'-deoxyuridine (BrdU) labeling index (LI) at various time points after partial pancreatectomy. It was found that at 24 h after partial pancreatectomy proliferation started in the main, large and small duct cells, and persisted in small duct cells to day 5. There was significant difference between the experimental group and the control group (P<0.001). Acinar cells positive for BrdU were greatly increased and reached the peak LI on day 5. The destroyed lobular architecture almost totally recovered on day 7, and the newly islet cells appeared around the pancreatic ducts. These results suggest that regeneration after partial pancreatectomy is involved in proliferation and differentiation of pancreatic stem cells, and pancreatic stem cells may locate in the pancreatic ductules.
刘涛王春友万赤丹熊炯炘周峰
关键词:上皮细胞胰腺切除术
转录因子PDX-1在猪胰干细胞体外诱导分化过程中的表达及意义被引量:3
2003年
目的 检测转录因子PDX-1在体外诱导胰干细胞分化过程中的表达,探讨PDX-1表达的意义。方法 自动胰岛分离系统分离胰腺组织,获得纯化的胰管上皮细胞,在有血清培养基(RPMI1640)中进行细胞原代培养,而后在无血清培养基(DMEM/F12)中加入表皮生长因子(EGF)和尼克酰胺(nicotinamide)促进胰管上皮细胞中的干细胞分化。Western Blotting检测分化各个阶段贴壁细胞、衍生胰岛和成熟胰岛PDX-1蛋白表达;逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)检测PDX-1mRNA和上皮细胞标志抗原CK-19(cytokine-19)mRNA在分化各个阶段的表达。结果 转录因子PDX-1分化的各个阶段表达逐渐增加,上皮细胞标志抗原CK-19在各个分化阶段表达逐渐减少。结论 转录因子PDX-1可能在胰干细胞分化衍生为胰岛的过程中起重要作用。
刘涛范骥王春友
关键词:PDX-1胰腺干细胞细胞分化
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