山东省中医药科技发展计划项目(2009-151)
- 作品数：2 被引量：12H指数：1
- 相关作者：刘向红宋宁宁李剑高海青更多>>
- 相关机构：济南市第五人民医院山东大学威海市口腔医院更多>>
- 发文基金：山东省中医药科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 丹皮酚对缺糖缺氧再灌注损伤大鼠海马神经元EAA、NMDA受体表达的影响及机制探讨被引量：1
- 2013年
- 目的观察丹皮酚对缺糖缺氧（OGD）再灌注损伤大鼠海马神经元兴奋性氨基酸（EAA）、N．甲基．D．天门冬氨酸（NMDA）受体表达的影响，探讨该药的神经保护作用机制。方法原代培养新生大鼠海马神经元8～12d后随机分为4组，其中对照组正常换液培养；模型组、丹皮酚组、地佐环平（MK-801）组均制备OGD再灌注损伤模型，在此基础上丹皮酚组于每个再灌注时间点前分别加入丹皮酚，MK-801组则加入MK-801溶液；倒置相差显微镜下观察神经元一般形态学变化，用MTr法测定神经元存活率，分别采用放射配基结合实验及RT-PCR法测定NMDA受体结合力、NR1亚基mRNA表达，以氨基酸分析仪检测EAA含量。结果模型组神经元肿胀或变形，突起缩短并逐渐消失，胞质内颗粒变性明显、甚至完全崩解；丹皮酚组及MK-801组神经元形态改变均较模型组减轻，胞体完整，突起较清楚，基本保持完整。与对照组比较，模型组神经元存活率明显降低，NMDA受体结合力、NR1亚基mRNA表达及E从含量明显升高，而丹皮酚组及MK_801组上述指标均较模型组明显改善（P均〈0．05）。结论丹皮酚对离体培养的大鼠海马神经元OGD再灌注损伤具有保护作用，其作用机制可能与抑制EAA及NMDA受体表达有关。
- 宋宁宁李剑刘向红高海青
- 关键词：丹皮酚神经元N-甲基-D-天门冬氨酸受体兴奋性氨基酸
- 大鼠海马神经元原代培养方法及缺糖缺氧再灌注损伤模型的建立被引量：11
- 2013年
- 目的探讨大鼠海马神经元原代培养方法,并建立缺糖缺氧再灌注损伤模型。方法取新生48 h内的大鼠海马组织进行体外原代培养,并进行神经元鉴定。神经元培养第8天,分为对照组、缺糖缺氧组及再灌注损伤组。对照组换Earle's液正常培养;缺糖缺氧组换无糖Earle's平衡盐缓冲液培养并放入缺氧盒内,持续3 h缓慢通入95%的N2。再灌注损伤组经过与缺糖缺氧组相同处理后,换以完全培养基置入CO2培养箱孵育,模拟体内缺血再灌注的过程。倒置相差显微镜进行一般形态学的动态观察,采用MTT法测定神经元存活率。结果经过分类计数,神经元约占97.35%,可认为是较纯的神经细胞培养。对照组神经元存活率为100%,缺糖缺氧组为75.25%±3.12%,再灌注损伤组再灌注12、24 h的神经元存活率分别为63.64%±2.25%、55.37%±1.04%;再灌注损伤组再灌注12、24 h的神经元存活率与对照组和缺糖缺氧组比较,P均<0.05。结论成功体外培养海马神经元,并建立大鼠缺糖缺氧再灌注损伤模型。
- 宋宁宁宋丽李剑刘向红
- 关键词：海马神经元原代培养缺糖再灌注损伤
