国家自然科学基金(81372151)
- 作品数：6 被引量：17H指数：3
- 相关作者：陈葳李旭潘晶晶谢小娟朱娜更多>>
- 相关机构：西安交通大学医学院第一附属医院陕西中医药大学陕西省人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省教育厅科研计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- UCA1及其剪接变异体与膀胱癌被引量：4
- 2014年
- 尿路上皮癌胚抗原1(urothelial carcinoma antigen 1,UCA1)在人膀胱移行细胞癌细胞系BLZ-211中包含3个剪接变异体:UCA1、UCA1a和UCA1b.我们以往的研究表明,UCA1、UCA1a均属于长非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA),它们之间具有一段长1 265 bp的共同序列.组织表达谱分析表明,它们具有相似的组织表达模式,提示它们可能与胚胎发育和膀胱癌发生发展密切相关.异位表达UCA1基因、UCA1a基因均可以促进人膀胱癌细胞生长,增强细胞的恶性表型,使其体外增殖、迁移、侵袭、抗凋亡能力明显增加,裸鼠致瘤能力明显增强,表明它们在膀胱癌的发生发展中均起到了重要的促进作用.本文将从基因结构、组织表达谱及机制功能等不同角度系统地阐述UCA1基因及其剪接变异体在膀胱癌中的研究现状与进展.
- 王宇陈葳李旭
- 关键词：剪接变异体膀胱癌
- 长链非编码RNA UCA1与miRNA-99b在膀胱癌细胞株和膀胱癌组织表达的相关性分析被引量：7
- 2015年
- 目的:验证LncRNA UCA1与miRNA-99b的相关性。方法:采用荧光定量PCR法检测UCA1和miRNA-99b在过表达和敲低表达UCA1的膀胱癌细胞、膀胱癌组织中的表达。结果:在敲低UCA1表达的膀胱癌细胞5637中,UCA1表达下调60%,而miRNA-99b的表达上调250%;在过表达UCA1的膀胱癌细胞UMUC2中,UCA1表达上调410%,而miRNA-99b的表达下调60%;UCA1在膀胱癌中的表达水平明显高于癌旁组织(P<0.05),而miRNA-99b在膀胱癌中的表达水平明显低于癌旁组织(P<0.05);UCA1与miRNA-99b在膀胱癌组织中的表达呈负相关(R=-0.502,P<0.05)。结论:UCA1负向调节miRNA-99b的表达,但是它对miRNA-99b的调节在膀胱癌发生发展中的作用机制还需深入研究。
- 谢小娟潘晶晶侯慧莲李旭陈葳
- 关键词：膀胱肿瘤
- Leica DMI6000 B活细胞工作站的配置及应用被引量：1
- 2016年
- 通过介绍Leica DMI6000 B活细胞工作站(Live Cell Application,LCA)的配置和技术参数,样品制备要求,图像采集的参数设置原则等,并以实例讲解LCA目前在生物医学领域的应用。DMI6000 B配有细胞孵育系统和图像采集系统,孵育系统对活细胞进行常氧或缺氧培养,图像采集系统实时采集细胞图像。图像采集系统中的焦平面跟踪系统,可防止在延时拍摄中图像变虚;明场与荧光多通道采集,可帮助实现活细胞荧光示踪;多位点采图,可帮助实现多视野动态观察;拼接扫描可采集样本全景图像;z轴扫描可对样本进行立体观察。LCA具有倒置荧光显微镜和细胞培养箱的双重功能,可跟踪观察活细胞的动态变化;DMI6000 B还可在缺氧条件下完成上述功能。
- 李婧尤元义石庆喜李旭
- 关键词：LEICA
- miRNA-148a 在膀胱癌组织中的表达及生物信息学分析被引量：5
- 2015年
- 目的：探索 miRNA-148a 在膀胱癌发生发展中的作用。方法收集35例膀胱癌组织和16例非癌组织，采用荧光定量 PCR 方法检测 miRNA-148a 的相对表达量，并分析其与临床特征的相关性；采用生物信息学分析，预测 miRNA-148a的靶基因和转录因子，构建 TF-miRNA-148a-靶基因调控网络图，并对其靶基因进行 GO 富集和 KEGG Pathway 分析。结果miRNA-148a 在膀胱癌中的相对表达量（0.0008±0.0002）明显低于非癌组织（0.0021±0.0005）（t＝2.46，P ＜0.05），其相对表达量在不同性别、年龄、病理分级、临床分期、淋巴结转移组的差异无统计学意义（P ＞0.05）。3个软件都预测到的 miRNA-148a 靶基因268个；预测到 miRNA-148a 的转录因子60个，结合评分＞80的结合位点657个；对268个靶基因进行 GO 富集分析，发现其靶基因主要涉及神经细胞分化、发育、增殖、mRNA 合成，蛋白连接等众多的生物学过程（P ＜0.001，相对于背景具有统计意义）；KEGG Pathway 分析发现268个靶基因参与 p53，恶性肿瘤、前列腺癌、PI3K-AKT 等信号通路（P ＜0.05，相对于背景具有统计意义）；根据构建的 TF-miRNA-148a-靶基因调控网络图，挖掘出可能调控 miRNA-148a 的转录因子有 SP1，ESR1，AP1，MYC，BRCA1等；可能受 miRNA-148a 调控的基因有 IGF1，P27 kip1，NCOA1，PTEN， SERPINE1等。结论miRNA-148a 在膀胱癌中表达下调，可能参与膀胱癌的发生发展，生物信息学分析为后续研究提供一定的思路。
- 谢小娟朱娜潘晶晶魏力强陈葳
- 关键词：膀胱癌生物信息学
- UCA1基因、UCA1a(CUDR)基因过表达对膀胱癌UM-UC-2细胞周期的影响
- 2013年
- 目的观察过表达UCA1基因、UCA1a(CUDR)基因对人膀胱癌UM-UC-2细胞周期的影响。方法以前期实验中构建好的3组细胞[转染pcDNA-UCA1重组表达载体的UM-UC-2细胞、转染pcDNA-UCA1a(CUDR)重组表达载体的UM-UC-2细胞和转染空质粒pcDNA3.1(+)的UM-UC-2细胞(对照组)]作为材料,采用流式细胞术检测UCA1基因、UCA1a(CUDR)基因对UM-UC-2细胞周期的影响。结果与对照组相比,转染pcDNA-UCA1重组表达载体的UM-UC-2细胞、转染pcDNA-UCA1a(CUDR)重组表达载体的UM-UC-2细胞S期的细胞百分比均明显增加,G0/G1期的细胞百分比均明显减少。结论过表达UCA1基因、UCA1a(CUDR)基因均能够促进人膀胱癌UM-UC-2细胞的DNA合成,使UM-UC-2细胞增殖能力增强。
- 王宇陈葳李旭张红张晓芹史迎莉
- 关键词：膀胱癌细胞周期
- UCA1a(CUDR)基因真核表达载体的构建及其在膀胱癌UM-UC-2细胞中的表达
- 2014年
- 目的:构建UCA1a(CUDR)基因真核表达载体pcDNA-UCA1a(CUDR),观察其在膀胱癌UM-UC-2细胞中的表达,为研究UCA1a(CUDR)基因与膀胱癌的关系提供实验依据。方法:以膀胱癌BLZ-211细胞的5′-RACE-Ready cDNA为模板,采用PCR法克隆UCA1a(CUDR)全基因,经EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切后与真核表达载体pcDNA3.1(+)连接,构建pcDNA-UCA1a(CUDR)重组质粒。双酶切及测序鉴定后,稳定转染至体外培养的人膀胱癌UM-UC-2细胞系,利用RT-PCR法检测转染pcDNA-UCA1a(CUDR)的UM-UC-2细胞和转染空质粒pcDNA3.1(+)的UM-UC-2细胞中UCA1a(CUDR)基因的表达。结果:克隆的目的基因片段约为2 200bp,与预期结果相符,表明成功扩增UCA1a(CUDR)基因;经双酶切及测序鉴定,成功构建真核表达载体pcDNA-UCA1a(CUDR)。半定量RT-PCR法检测,与转染空质粒的细胞比较,转染表达载体pcDNA-UCA1a(CUDR)的UM-UC-2细胞中UCA1a(CUDR)基因表达量升高。结论:成功构建pcDNA-UCA1a(CUDR)真核表达载体,且UCA1a(CUDR)基因在转染表达载体的UM-UC-2细胞中高表达。
- 王宇陈葳李旭张红张晓芹史迎莉
- 关键词：真核表达载体细胞系
