“十五”国家科技攻关计划(30070722)
- 作品数:1 被引量:6H指数:1
- 相关作者:马鸣潇金宁一徐一鸣鲁会军夏志平更多>>
- 相关机构:中国疾病预防控制中心病毒军事医学科学院更多>>
- 发文基金:国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 禽流感病毒H5HA、H7HA、H9HA亚型血凝素基因在毕赤酵母中的表达被引量:6
- 2006年
- 利用毕赤酵母表达系统进行了禽流感病毒H5HA、H7HA及H9HA亚型血凝素基因的真核表达研究。首先将H5HA、H7HA及H9HA基因片段分别插入酵母分泌型表达载体pPIC9K中,获得重组质粒pPIC9K-H5HA、pPIC9K-H7HA和pPIC9K-H9HA;再将所获重组质粒分别经SacⅠ、BglⅡ及SalⅠ线性化后,电转化GS115感受态细胞,以插入/替换的方式进行重组,并经MD平板与MM平板筛选,及PCR鉴定,得到重组酵母工程菌GS115/pPIC9K-H5HA、GS115/pPIC9K-H7HA及GS115/pPIC9K-H9HA;用甲醇诱导分泌表达目标蛋白。经SDS-PAGE和Western-blotting检测,结果表明,H5HA、H7HA及H9HA蛋白在毕赤酵母中均获得表达。酵母表达了上述目的蛋白,可直接进行抗原检测,并可用于抗体检测试剂盒及亚单位疫苗制备的辅助研究。
- 徐一鸣金宁一夏志平马鸣潇鲁会军韩松金扩世梁国栋
- 关键词:禽流感病毒血凝素基因毕赤酵母