国家自然科学基金(30170943)
- 作品数：4 被引量：25H指数：2
- 相关作者：易静邹嫣琼王茸影李慧王英更多>>
- 相关机构：上海第二医科大学上海交通大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 重组人骨形成蛋白2在皮肤成纤维细胞中的表达被引量：2
- 2003年
- 目的构建人骨形成蛋白2(BMP2)的真核表达载体以探讨成纤维细胞表达BMP2的情况。 方法构建携带人BMP2基因的真核表达载体pRK5-hBMP2,并将其转染CHO细胞、NIH3T3细胞和正常人皮肤成纤维细胞后,采用RT-PCR方法检测人BMP2在mRNA水平上的表达。 结果RT-PCR显示转染后的CHO细胞、NIH3T3细胞和正常人皮肤成纤维细胞可以有效地转录BMP2 mRNA。 结论含有人BMP2 cDNA的重组质粒pRK5-hBMP2转染正常人皮肤成纤维细胞后可以有效地表达BMP2。
- 王英邹嫣琼仓辉李慧汤雪明易静
- 关键词：重组人骨形成蛋白2皮肤成纤维细胞RT-PCR
- 骨形成蛋白调控成骨分化的信号机制被引量：24
- 2005年
- 骨形成蛋白(bone morphogenetic proteins, BMPs)能诱导成骨细胞和软骨细胞的分化成熟,并能在体内诱导异位成骨。BMPs与骨形成蛋白受体BMPR结合,通过Smads和p38 MAPKs途径进行信号转导,并通过下游转录因子Cbfa1、Osterix、Dlx等与相应的成骨细胞特异蛋白碱性磷酸酶、骨钙素、OPN等基因启动子连接,促进细胞向成骨方向分化。另外,还通过转录因子CIZ、AJ18等对成骨进行负调控,维持胚胎发育正常,保持骨量平衡。由于BMPs在骨修复中的重要作用,现已成为基因治疗用于骨缺损的一个研究热点。
- 王茸影易静
- 关键词：OSTERIXSMADDLX
- 细胞特异性的非病毒载体增强BMP-2在成纤维细胞中表达
- 2006年
- 目的构建含有胶原蛋白1A2启动子和增强子的人皮肤成纤维细胞(HDFs)特异的非病毒骨形成蛋白-2(BMP-2)表达载体pcDNA3-CEP-BMP-2,验证其是否增强BMP-2特异性在HDFs表达并增强成骨诱导作用,从而探索非病毒载体介导正常细胞的基因修饰用于骨修复的可能性。方法将胶原蛋白增强子、启动子及BMP-2基因导入pcDNA3质粒中,用脂质体法转入HDFs,将血管内皮细胞(VEC)作为对照,RT-PCR检测BMP-2基因在两种细胞中的表达差异,并检测转染后HDFs体外成骨表型。结果转染pcDNA3-CEP-BMP-2在HDFs造成BMP-2表达高于pcDNA3-BMP-2,而在VEC的BMP-2表达不增高。转染了pcDNA3-CEP-BMP-2的HDFs骨钙素的分泌和矿化能力高于pcDNA3-BMP-2。结论胶原蛋白1A2启动子和增强子能特异性地增强BMP-2基因在HDFs中的表达。
- 王茸影邹嫣琼朱振安易静
- 关键词：细胞特异成纤维细胞骨形成蛋白-2增强子
- 含EGFP的人BMP2表达载体在人皮肤成纤维细胞中的表达
- 2004年
- 目的构建带加强型绿色荧光蛋白 (EGFP)基因的人骨形成蛋白 2 (hBMP2 )真核表达载体 ,观察其在正常人皮肤成纤维细胞中的表达情况。方法构建携带hBMP2和EGFP基因的真核表达载体 pcDNA3 hBMP2 IRES EGFP(pcBE) ,将其转染NIH3T3细胞和正常人皮肤成纤维细胞后 ,采用RT PCR和免疫组化染色方法分别检测人BMP2和EGFP基因在mRNA和蛋白质水平上的表达情况。结果转染后的NIH3T3和正常人皮肤成纤维细胞均能转录人BMP2mRNA和表达人BMP2蛋白 ,同时显示绿色荧光。结论 pcBE真核表达载体可在正常人皮肤成纤维细胞内有效表达人BMP2蛋白 ,并以其荧光报告基因起示踪作用。
- 邹嫣琼王英陈玉英胡庆沈李慧易静
- 关键词：BMP2人皮肤成纤维细胞真核表达载体EGFP基因报告基因
