国家自然科学基金(30170443)
- 作品数：5 被引量：20H指数：3
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- 胎儿胰腺组织中巢蛋白阳性细胞的分离和体外增殖以及诱导分化被引量：8
- 2003年
- 目的 研究从胎儿胰腺组织中分离巢蛋白 (Nestin)阳性细胞以及该细胞的体外扩增与向胰岛内分泌细胞分化的能力。 方法 采用胶原酶消化法 ,从胎儿胰腺组织中分离获得胰岛样细胞簇 (islet likecellclusters ,ICCs) ,ICCs经手工挑拣后接种 ,待形成单层上皮样细胞后 ,进行传代培养和诱导分化。利用逆转录 -聚合酶链反应 (RT PCR)、免疫荧光染色及放射免疫分析 (RIA)等方法 ,检测该细胞中分子标志物的表达 ,并对其向胰岛内分泌细胞分化的能力进行鉴定。 结果 (1)上述单层上皮样细胞具有很强的增殖能力 ,可至少连续传 16代 ;(2 )RT PCR、免疫荧光染色分析显示 ,该细胞可表达干细胞的标志分子巢蛋白和ABCG2 ;(3 )RT PCR分析显示 ,在多种细胞因子和无血清的条件下 ,巢蛋白阳性细胞经诱导后可出现胰岛素、胰升糖素和胰十二指肠同源盒基因 1(PDX 1)mR NA的表达 ,而巢蛋白和Neurogenin3 (Ngn3 )mRNA表达消失。RIA分析也可检测到诱导后的细胞内有胰岛素产生。 结论 从胎儿胰腺中分离得到的巢蛋白阳性细胞具有胰腺前体细胞的特性 ,在体外具有很强的增殖能力 ,并可诱导分化为胰岛内分泌细胞。该细胞有望为胰岛移植提供一种新的细胞来源。
- 张玲洪天配胡江吴永华李凌松
- 关键词：胎儿胰腺组织体外增殖诱导分化胰岛移植糖尿病
- 胎儿胰腺巢蛋白阳性细胞具有间充质表型特征
- 2007年
- 目的研究巢蛋白阳性细胞在胎儿胰腺中的分布以及其表面标志。方法采用免疫荧光染色法对巢蛋白阳性细胞在胎儿胰腺组织中的分布进行定位。分离和培养胎儿胰腺细胞,利用免疫荧光染色和流式细胞分析进行鉴定,并与骨髓间充质干细胞的表面标志比较。结果巢蛋白阳性细胞在胎儿胰腺间质中广泛分布;胎儿胰腺来源的巢蛋白阳性细胞的表面标志与骨髓间充质干细胞基本一致。结论从胎儿胰腺中分离的巢蛋白阳性细胞具有骨髓间充质干细胞表型特征。
- 王宏胡江吴永华李凌松李丽英洪天配
- 关键词：胎儿间充质干细胞巢蛋白胰腺
- 胰岛干细胞的研究进展被引量：1
- 2003年
- 胰岛移植是治愈糖尿病潜在的希望所在.对1型糖尿病合并终末期糖尿病肾病患者施行胰肾联合移植,可以使其糖尿病获得治愈.但胰脏移植因手术创伤大、并发症多,故难以作为常规治疗糖尿病的手段.胰岛移植虽然手术操作过程相对简单,但由于从单一供体胰脏难以获得足够数量的纯化胰岛,胰岛常常丢失于分离和纯化过程中,其成功率远远低于全胰脏移植.全胰脏移植1年后的成功率为70%以上,而胰岛移植则不足20%[1].
- 张玲洪天配
- 关键词：胰岛干细胞胰岛移植糖尿病胚胎干细胞发育生物学
- 巢蛋白在人胚胎胰腺中的表达被引量：5
- 2003年
- 目的 探讨人胚胎胰腺中干细胞特异性标志巢蛋白 (Nestin)的表达及阳性细胞的分布。 方法 用连续切片免疫组织化学染色方法检测 16周胎龄人胚胎胰腺中巢蛋白、胰岛素、胰升糖素和导管上皮标志细胞角蛋白 19(CK19)的表达及分布。 结果 16周人胚胎胰腺中可检测到巢蛋白阳性细胞 ,分布于胰岛以及胰导管和腺泡结构中 ,并且以腺泡结构和小导管中的数目为多。部分胰岛素和CK19染色强阳性的细胞中巢蛋白染色为弱阳性 ,胰升糖素强阳性的部位则未见巢蛋白染色阳性的细胞。 结论 人胚胎胰腺中存在巢蛋白表达的细胞 ;巢蛋白阳性细胞可能是胰腺组织中一个特殊的细胞亚群 ,代表了一群未成熟细胞。
- 夏修金鲍卫汉陈东明洪天配张玲郑宗梅郭文媛
- 关键词：巢蛋白胚胎胰腺基因表达免疫组织化学
- 从胎儿胰腺组织建立单克隆胰腺前体细胞的研究被引量：13
- 2004年
- 目的 探索一种新的人胰腺干细胞分离纯化体系。 方法 从胎儿胰腺中分离获得巢蛋白阳性细胞群体 ,荧光激活细胞分选 (FACS)技术分选单个sidepopulation(SP)细胞后进行单克隆细胞培养。应用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)及放射免疫分析 (RIA)方法 ,研究单克隆SP细胞在体外增殖和向胰岛内分泌细胞分化的能力。 结果 胎儿胰腺组织经过分离和体外培养后 ,可获得巢蛋白阳性细胞 ,对其进行Hoechst 33342染色 ,分析显示SP细胞约占 0 1% ;RT PCR证实SP细胞有ATP结合盒转运子G2 (ABCG2 )表达 ,而非SP细胞则未见表达 ;SP细胞的克隆形成率约为 2 7% ,而非SP细胞没有克隆形成。在多种细胞因子和无血清的条件下 ,单克隆SP细胞经诱导后出现胰岛素、胰升糖素和胰十二指肠同源盒基因 1(PDX 1)mRNA的表达 ,而巢蛋白、neurogenin3(Ngn3)和ABCG2mRNA表达消失 ;RIA分析可检测到诱导后的细胞内有胰岛素产生。 结论 首次报道从胎儿胰腺组织中分离并建立了单克隆胰腺前体细胞。该细胞在体外具有很强的增殖能力 ,并可分化为胰岛内分泌细胞。
- 张玲洪天配胡江刘羿男吴永华李凌松
- 关键词：单克隆前体细胞胰腺组织胎儿RIART-PCR
