山东省卫生厅科技基金(2001CA2CKA2)
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
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- 原代培养大鼠肝星状细胞、枯否氏细胞及肝素的干预作用
- 2005年
- 目的同步分离培养大鼠肝星状细胞及枯否细胞,应用肝素进行干预,观察肝素在体外对肝星状细胞及枯否细胞的影响。方法应用Nycodenz一步密度梯度离心法一步分离肝纤维化大鼠的肝星状细胞及枯否细胞。分别将不同浓度的肝素加入肝星状细胞和枯否细胞培养板中,应用MTT比色法检测各组肝星状细胞和枯否细胞的增殖状况,免疫细胞化学检测各组肝星状细胞中α平滑肌肌动蛋白(αSMA)、转化生长因子β1(TGFβ1)、层连蛋白(LN)的表达。结果加入高浓度肝素、低浓度肝素及未用药的肝星状细胞0D值分别为0.0626±0.0137、0.0746±0.0131和0.1106±0.0198。加入高浓度肝素、低浓度肝素及未用药的枯否氏细胞0D值分别为0.1340±0.0270、0.1540±0.270和0.2120±0.0444。二肝素组肝星状细胞、枯否氏细胞0D值均显著低于未加药组。高浓度肝素组肝星状细胞及枯否氏细胞OD值较低浓度肝素组为低,但无显著性差异。加入肝素的肝星状细胞αSMA、TGFβ1,LN的表达较未用药的肝星状细胞为弱。高浓度肝素组αSMA、TGFβ1LN的表达较低浓度肝素组弱。结论肝素可抑制肝星状细胞的增殖、活化及胶原的分泌,且对枯否氏细胞也具有抑制作用。
- 石军郝菁华任万华张捷许洪伟朱菊人
- 关键词：肝素肝星状细胞枯否氏细胞平滑肌肌动蛋白层黏连蛋白
- 肝素对肝纤维化大鼠肝星状细胞增殖及分泌的影响及其作用机制
- 2006年
- 目的观察肝素在体外对肝纤维化大鼠肝星状细胞增殖及分泌的影响,并探讨其作用机制。方法应用Nycodenz分离肝纤维化大鼠的肝星状细胞置培养板中,并分为三组。A、B组分别加入1000μg/ml及2000μg/ml肝素,C组不用药。应用MTT比色法检测各组肝星状细胞的增殖状况,免疫细胞化学检测各组肝星状细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、层粘连蛋白(LN)的表达。结果OD值A组为0.0626±0.0137,B组为0.0746±0.0131,C组为0.1106±0.0198,A、B组均显著低于C组(P均<0.05),B组低于A组(P>0.05);C组肝星状细胞胞质中可见α-SMA、TGF-β1和LN明显表达,A、B组各指标表达均低于C组(P分别<0.01和<0.05),A组表达低于B组(P<0.05)。结论肝素可抑制肝纤维化大鼠肝星状细胞的增殖及胶原分泌,作用机制可能是抑制肝星状细胞表达TGF-β1。
- 郝菁华石军马进才张捷任万华朱菊人
- 关键词：肝素肝星状细胞肌动蛋白类
- 大鼠肝星形细胞、枯否细胞的同步分离培养与鉴定被引量：2
- 2005年
- 目的:建立经济、简便的同步分离培养肝星形细胞及枯否细胞的方法。方法:应用胶原酶和蛋白酶对大鼠肝脏进行原位灌流、消化,获得大鼠肝脏非实质细胞,经18%(W/V)的Nycodenz密度梯度离心,一步分离肝星形细胞及枯否细胞;肝星形细胞处在界面,枯否细胞则处在界面下;台盼蓝染色鉴定细胞活力;Desmin免疫细胞化学染色鉴定肝星形细胞;溶菌酶免疫细胞化学染色鉴定枯否细胞。结果:该方法分离的肝星形细胞和枯否细胞的纯度达95%左右。肝星形细胞得率(3.0±0.5)×107/肝,枯否细胞得率(4.0±0.5)×106/肝。结论:应用Nycodenz一步密度梯度离心法可以很好的同时分离肝星形细胞和枯否细胞。
- 石军任万华郝菁华张捷朱菊人
- 关键词：星形细胞枯否细胞离心法
