国家自然科学基金(81173489)
- 作品数：6 被引量：12H指数：2
- 相关作者：郝岗平李艳玲赵法兴陶如史仁玖更多>>
- 相关机构：泰山医学院江西中医药高等专科学校中国中医科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 白花丹参Cu/Zn SOD基因的克隆和表达分析
- 2019年
- 目的:获取白花丹参Cu/Zn SOD基因的全长cDNA序列,并分析其序列特征和不同外源胁迫下的表达特征。方法:利用已有白花丹参cDNA全长文库,随机测序获得SmCu/Zn SOD全长序列。BLAST进行序列比对,Motif Scan软件分析氨基酸序列的功能区段,RT-PCR技术分析基因表达特征。结果:获得ORF为459 bp的SmCu/Zn SOD全长cDNA序列,编码氨基酸152个,氨基酸序列分析发现其具有典型的Cu/Zn SOD PROSITE pattern,RT-PCR分析其在叶片中表达量最高。水分亏缺、盐胁迫、低温和ABA处理均能较强的诱导该基因的表达。结论:本研究首次获得白花丹参Cu/Zn SOD全长基因序列,该基因可能参与对干旱、盐碱和低温等非生物胁迫的抵抗。
- 赵法兴李艳玲郝岗平
- 关键词：白花丹参SOD基因
- PMI基因作为选择标记的植物表达载体构建及转化白花丹参体系的建立
- 2014年
- 目的:构建含有大肠杆菌6-磷酸甘露糖异构酶(6-phosphomannose isomerase,PMI)基因并替换潮霉素抗性(hygromycin,hyg)基因的植物表达载体pCAMBIA1305-PMI,同时建立以PMI/甘露糖为筛选标记的白花丹参转基因体系。方法:首先从大肠杆菌Escherichia coli DH5α中克隆PMI基因,然后以PMI基因替换植物表达载体pCAMBIA1305中的hyg基因,构建了以PMI基因为选择标记基因的植物表达载体pCAMBIA1305-PMI,并用电击转化方法导入根癌农杆菌Agrobacterium tumefaciens LBA4404中,用叶片浸染法转化白花丹参。结果:在白花丹参MS+6-BA 1.5 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1固体分化培养基中附加20 g·L-1甘露糖和10 g·L-1蔗糖为碳源的选择压力下,pCAMBIA1305-PMI的转化率为23.7%,对再生植株用PCR检测证实了PMI基因的导入。结论:建立了以PMI-甘露糖为选择系统的白花丹参转基因体系,可应用于后续目的基因的转化奠定了基础。
- 陶如张友灿方茜史仁玖李艳玲黄璐琦郝岗平
- 关键词：甘露糖白花丹参
- 白花丹参谷氧还蛋白SmGRX2基因的克隆及其对丹参的转化
- 2022年
- 目的获取白花丹参GRX基因的全长cDNA序列(命名为SmGRX2),并分析其序列特征和不同外源胁迫下的表达特征,构建其表达载体并转化到白花丹参。方法利用已有白花丹参cDNA全长文库,随机测序获得SmGRX2全长序列。BLAST进行序列比对,Motif Scan软件分析氨基酸序列的功能区段,real-time RT-PCR技术分析基因表达特征;将SmGRX2连接到含有双增强子的高效植物双元表达载体pGreen0029-GFP上,获得含融合DHA基因的植物双元表达载体pGreen0029-SmGRX2-DHA,采用电击法将含SmGRX2的植物表达载体转入根癌农杆菌LBA4404中,用叶片浸染法转化白花丹参。结果获得ORF为372bp的SmGRX2全长cDNA序列,编码氨基酸123个,氨基酸序列分析发现其具有典型的GRX prosite patters CCMC,NCBI登录号为KJ009322。Real-timePCR分析其在根部中表达量最高。SA和MeJA处理均能较强的诱导该基因的表达。对再生植株用PCR检测证实了SmGRX2基因的导入,pGreen0029-SmGRX2-DHA的转化率为24.4%。结论首次获得白花丹参SmGRX2全长基因序列,分析其可能参与对抗病等生物胁迫的响应;成功获得过表达SmGRX2转基因植株,为SmGRX2基因的进一步功能分析奠定了基础。
- 赵法兴李艳玲郝岗平
- 关键词：白花丹参表达载体构建
- miRNA-210在恶性肿瘤中的研究进展被引量：2
- 2013年
- 恶性肿瘤是目前导致人类死亡的主要病因,据统计每年有数以万计的人死于癌症。临床上尽管可以通过早发现、早诊断、改进治疗方法及加强护理等传统手段提高肿瘤患者的生存率,降低死亡率,但目前缺乏敏感而特异的早期诊断标志物,虽然病理检查的准确率很高,但该法属有创检查不适用于普查和筛查。传统治疗手段创伤大,副作用明显,导致患者预后较差。况且人们对肿瘤的发病机制仍然不明确,所以进一步了解肿瘤发病的分子生物学特性或许可以找到诊断和治疗肿瘤更好的方法和途径。
- 方茜郝岗平
- 关键词：乏氧肿瘤
- 泰山赤灵芝复合降解酶提取白花丹参须根有效成分的研究被引量：4
- 2013年
- 目的:研究泰山赤灵芝复合降解酶在白花丹参须根有效成分提取中的应用。方法:采用木质纤维素复合降解酶来提取丹参须根中的有效成分,通过正交试验法优化酶解参数。结果:利用优化酶解工艺所得到的丹参须根提取液中总丹参酮和总丹酚酸的提取率可达11.923%,12.465%,比常规非酶法提取提高了62.794%,56.086%。结论:采用木质纤维素复合降解酶酶解法可以充分提取出丹参须根中的有效成分,为中药废弃物的再次利用提供了一条新途径。
- 李艳玲辛晓明苗增民史仁玖郝岗平
- 关键词：赤灵芝漆酶纤维素酶白花丹参
- 白花丹参毛状根诱导体系的建立与其内生真菌提高毛状根中丹酚酸含量的研究被引量：6
- 2015年
- 目的建立白花丹参毛状根诱导体系及检测其丹酚酸的合成,研究内生真菌对毛状根中丹酚酸生物合成的影响。方法通过发根农杆菌ACCC10060浸染白花丹参叶片,成功诱导出毛状根,毛状根在6,7-V液体培养基中扩大培养60d,并测定毛状根中丹酚酸的含量。白花丹参毛状根在6,7-V培养基中培养12 d后,添加从白花丹参分离的不同浓度的内生真菌诱导子,测定毛状根丹酚酸含量。结果发根农杆菌ACCC10060能够成功从白花丹参叶片诱导出毛状根,毛状根培养40 d和50 d时丹酚酸B和丹参素的最高产量可达9.38mg·g-1DW和1.281 mg·g-1DW。60(μg glc equ).ml-1内生真菌诱导子是促进丹酚酸合成的最佳浓度,内生真菌处理后30 d后,丹酚酸B和丹参素的产量分别增加1.55和2.68倍。结论白花丹参毛状根诱导培养可以做为一种生产丹酚酸的有效途径,60(μg glc equ)·ml-1内生真菌诱导子可以显著提高毛状根中丹酚酸含量。
- 陶如冯蕾赵法兴李艳玲冀海伟郝岗平
- 关键词：白花丹参丹酚酸B丹参素内生真菌
