国家自然科学基金(30700829)
- 作品数：2 被引量：7H指数：1
- 相关作者：张青张鹏苏明权刘家云郝晓柯更多>>
- 相关机构：天津医科大学第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 大肠埃希菌生物膜形成与耐药机制的研究进展被引量：7
- 2018年
- 生物膜细菌与浮游菌相比有着其独特的生理学特性、毒力作用及耐药机制,对其耐药机制及治疗成为近年来的研究热点。大肠埃希菌(Escherichia coli)是医院感染的重要病原菌之一,也是生物膜感染的常见病原菌。形成生物膜的大肠埃希菌具有高度的耐药性并能逃避免疫系统的攻击,其感染易慢性化并难于控制。本文通过对大肠埃希菌生物膜形成与耐药机制研究特点进行阐述,为寻找有效的控制手段,指导抗生素合理使用提供理论依据。
- 张青马慧娜
- 关键词：大肠埃希菌生物膜耐药
- 抗前列腺癌γ-精浆蛋白人源Fab抗体的原核表达和特性鉴定
- 2011年
- 目的:对从噬菌体抗体库筛选的抗γ-精浆蛋白(γ-sm)人源化Fab抗体进行表达纯化和生物学特性鉴定,为其应用于前列腺癌抗体导向酶—前药治疗奠定基础。方法:首先将重组表达载体γ-sm-hFab/pComb3X转化大肠杆菌并诱导其可溶性表达,亲和纯化后采取Western-blot检测表达产物对γ-sm抗原结合特异性。其次分别采用抑制ELISA和竞争抑制ELISA方法分析表达纯化的抗γ-sm人源Fab抗体的亲和力和结合表位。最后采用竞争抑制流式细胞术和免疫组化超敏S-P法鉴定制备纯化的人源Fab抗体在前列腺癌细胞和组织上的结合分布特性。结果:成功诱导表达和纯化出理论分子量大小可溶性Fab抗体蛋白,含量约占细菌总可溶性蛋白的20.5%,Western-blot证实其能特异性结合识别γ-sm。抑制ELISA显示其表观结合常数(Ka)为0.78×10~8M^(-1),亲和力约为亲本鼠源单抗E4B7的37.5%,竞争抑制ELISA进一步显示,二者识别γ-Sm抗原蛋白上的表位相同。流式细胞术和免疫组化显示,表达纯化的人源Fab抗体可显著地与前列腺癌细胞和组织特异性结合,其结合主要分布在腺上皮内瘤和中低度恶性的前列腺癌组织上。结论:成功地对筛选的抗γ-sm人源Fab抗体进行了原核可溶性表达、纯化和免疫生物学特性鉴定,为其进一步应用于抗体导向酶—前药实验治疗前列腺癌奠定了基础。
- 张青郝晓柯苏明权刘家云张鹏
- 关键词：FAB抗体人源化原核表达前列腺癌
