国家自然科学基金(31171086)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 相关作者：马纪俞蕾于永春潘秋辉王勤婉更多>>
- 相关机构：同济大学上海市第十人民医院南方医科大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- MicroRNA-122过表达转基因小鼠的建立
- 2012年
- 目的:建立microRNA-122(mir-122)过表达转基因小鼠模型,为今后研究肝脏发育,分化及肝癌预防、诊断及治疗等提供实验模型。方法:构建mir-122过表达载体,利用受精卵前核显微注射法将mir-122过表达载体导入小鼠受精卵中,获得mir-122过表达转基因小鼠。PCR法检测转基因小鼠的整合情况,实时定量PCR法检测mir-122过表达转基因小鼠肝脏及其主要器官mir-122及其确定靶基因高亲和性阳离子氨基酸转运体-1(CAT-1),切割同源物1(CUTL-1),血清反应因子(SRF)的表达情况。结果:mir-122过表达转基因小鼠,与同窝阴性鼠相比,mir-122在过表达转基因小鼠肝脏及主要器官中的表达升高,mir-122靶基因表达水平下降。结论:成功构建mir-122过表达转基因小鼠。
- 张越马纪安靓贾俊双李振林孙奋勇
- 关键词：过表达转基因小鼠
- 基因Wip1低表达与椎间盘退行性病变的关系被引量：1
- 2013年
- 目的探讨基因Wip1异常表达与椎间盘退行性疾病(intervertebral disc degeneration,IDD)的关系。方法选取62例患者退行性病变的椎间盘组织,通过实时定量PCR测定Wip1基因表达量;siRNA干扰人髓核(nucleus pulposus,NP)细胞Wip1的表达后,通过SA-β-ga1染色检测细胞衰老情况;通过MTT检测NP细胞的增殖能力;通过实时定量PCR检测NP细胞衰老分子标记的表达水平;γ射线照射siRNA转染后的NP P3细胞,分别于不同时间点行SA-β-gal染色检查。结果 62例病变椎间盘组织中,18例Wip1基因的表达明显下降(P<0.01);siRNA干扰人NP细胞Wip1表达后,衰老细胞数量明显增加;MTT结果表明,干扰Wip1的表达能够显著抑制人NP细胞的增殖;P3细胞培养8 d,实时定量PCR检测发现,Col2a1、Agc、Ver的表达水平显著下调,MMP3的表达水平明显增高。y射线照射NP细胞后,SA-β-gal染色显示,Wip1表达组出现明显的衰老现象。结论 Wip1的低表达与椎间盘退行性病变的发生相关,干扰Wip1的表达能够促进NP细胞衰老,而过表达Wip1可以有效抑制细胞衰老的发生。
- 俞蕾马纪王勤婉于永春潘秋辉李晶华
- 关键词：椎间盘退行性疾病细胞衰老
