国家自然科学基金(30170418)
- 作品数：10 被引量：105H指数：6
- 相关作者：唐承薇王春晖刘纯伦周旭春张波更多>>
- 相关机构：四川大学华西医院重庆医科大学附属第一医院华西医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家杰出青年科学基金四川省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 美洛昔康不诱导胃癌细胞耐药被引量：3
- 2006年
- 目的旨在了解环氧合酶-2(cyc looxygenase-2,COX-2)抑制剂美洛昔康对胃癌细胞的长期作用能否导致胃癌细胞对其产生耐药性。方法采用浓度递增法结合大剂量冲击法,美洛昔康长期作用于胃癌SGC7901细胞,时间达6个月,尝试诱导胃癌美洛昔康耐药株,命名为SGC7901/M,并用MTT法测定药物敏感性,光镜、电镜观察细胞形态学改变,活细胞计数法和克隆形成技术了解其生物学特性。结果药物敏感分析显示,胃癌细胞经过美洛昔康长期作用,对美洛昔康并没有出现抗性,其IC50与亲代细胞比较差异无统计学意义(P>0.05),分别为4.6×10-4±2.23×10-4mol.L-1,3.54×10-4±2.34×10-4mol.L-1。SGC7901/M细胞对美洛昔康的耐药指数约为1.3。SGC7901/M细胞与亲代细胞形态学比较,光镜及电镜均未显示差异,两种细胞在经1×10-3mol.L-1美洛昔康作用24 h后,均表现出细胞受到明显损伤和凋亡的形态。无论从生长曲线上还是克隆形成率上都显示SGC7901/M细胞与亲代细胞的生长特性无差异。结论美洛昔康可抑制胃癌细胞生长,长期用药不诱导胃癌细胞产生耐药性。
- 郑文斌王春晖强鸥唐承薇
- 关键词：胃癌环氧合酶-2美洛昔康多药耐药性
- 奥曲肽抑制胃癌生长的实验研究被引量：17
- 2002年
- 目的:研究生长抑素类似物奥曲肽在体内和体外对胃癌生长的影响及初步作用环节。方法:采用3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法及TdT介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法检测奥曲肽对体外培养的SGC-7901胃癌细胞生长的影响及凋亡的诱导作用。建立裸鼠人胃癌原位移植瘤模型,给予奥曲肽治疗8周,观察其对裸鼠体内胃癌生长的影响。用免疫组化法检测奥曲肽对胃癌细胞及组织中增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响。用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测胃癌细胞及组织中生长抑素受体(SSTR)-2和SSTR-3基因的表达。结果:奥曲肽可明显降低胃癌细胞的3H-TdR掺入,其效应与药物剂量呈明显正相关。奥曲肽可诱导SGC-7901胃癌细胞凋亡,其发生率为18.3%±2.7%。奥曲肽可抑制裸鼠人胃癌原位移植瘤的生长,其抑瘤率为62.3%。胃癌细胞及组织中PCNA的表达因奥曲肽的干预而明显下调。无论是胃癌细胞还是胃癌组织,均有SSTR-2和SSTR-3基因表达。结论:在体内及体外,奥曲肽通过SSTR-2和SSTR-3的介导可有效抑制胃癌生长。
- 王春晖唐承薇汤丽平
- 关键词：奥曲肽胃癌肿瘤抑制PCNA免疫组化法
- 奥曲肽致裸鼠肝癌原位移植瘤坏死的实验研究被引量：4
- 2009年
- 背景与目的:生长抑素类似物奥曲肽可抑制肝癌的生长,但能否使其坏死、获得更好的抗肿瘤效果呢?本研究旨在观察奥曲肽在体内、外对肝癌细胞株HepG2的作用,探讨其致肿瘤坏死的机制。方法:采用四甲基偶氮唑蓝法检测体外HepG2细胞的增殖,建立裸鼠肝癌HepG2细胞原位移植瘤模型,奥曲肽组裸鼠皮下注射奥曲肽100μg/(kg·d);对照组皮下注射相同体积的生理盐水,连续用药8周。组织学评估肿瘤坏死程度,免疫组化检测移植瘤中血管内皮生长因子(VEGF)的表达,Westernblot和免疫组化检测生长抑素受体2(SSTR2)的表达。结果:奥曲肽(0.1～1000nmol/L)作用24h,不影响HepG2细胞增殖。奥曲肽组裸鼠肝癌移植瘤重[(7.15±2.96)g]高于对照组[(4.21±3.11)g],移植瘤坏死体积[(81.86%±0.05)%]大于对照组[(43.75±0.06)%],两组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组明显不同的是,奥曲肽组移植瘤中未见VEGF表达。两组移植瘤组织血窦中SSTR2表达无显著性差异(P>0.05)。结论:在肝癌细胞活跃增殖条件下,奥曲肽通过移植瘤血窦中SSTR2介导,仅仅抑制肿瘤血管生成,可致裸鼠肝癌显著坏死的良好效应。
- 陈爽谢艳王春晖唐承薇
- 关键词：奥曲肽HEPG2细胞移植瘤
- 蛋白质摄入量在酒精性胰腺损伤中的作用被引量：6
- 2006年
- 目的探讨在长期饮酒的基础上摄入不同量的蛋白质对胰腺腺泡细胞结构和功能的影响。方法Wistar大鼠分为酒精组(酒精+常规蛋白质组、酒精+高蛋白质组、酒精+低蛋白质组)和对照组,观察6个月。在光镜和电镜下观察胰腺腺泡细胞结构变化,用比色法检测胰腺组织匀浆淀粉酶和脂肪酶的含量,TUNEL法检测腺泡细胞凋亡,免疫组化检测胰腺组织切片中COX-2的变化。结果与对照组相比,酒精组大鼠胰腺腺泡细胞可见髓样结构形成。酒精+常规蛋白质组腺泡细胞损伤最轻,酒精+高蛋白质组胰腺腺泡细胞内线粒体普遍肿胀,酒精+低蛋白质组主要表现为粗面内质网明显扩张,甚至部分细胞胞质溶解坏死。对照组淀粉酶含量为(6532.87±100.11)U/g组织、脂肪酶含量为(10193.06±206.27)U/g组织,与对照组比较,各酒精组淀粉酶及脂肪酶含量均有不同程度的降低(P<0.01)。对照组胰腺腺泡细胞凋亡指数为(0.31±0.10)%,酒精+低蛋白质组胰腺腺泡细胞凋亡指数明显增加(P<0.01)。对照组COX-2的ILD为0.09±0.02,酒精+低蛋白质组胰腺腺泡细胞胞质COX-2的ILD为0.22±0.03,表达明显增加(P<0.01)。结论长期酒精摄入导致胰腺腺泡细胞退行性变,饮食中适量的蛋白质摄入对延缓胰腺病变发展十分重要。过高或过低蛋白质摄入都将促进腺泡细胞结构的破坏,加速酒精性胰腺损伤的进程。
- 周旭春唐承薇刘纯伦
- 关键词：胰腺腺泡细胞退行性变
- 罗非昔布与奥曲肽联合应用增强抑制人胃癌细胞株的生长被引量：12
- 2004年
- 探讨罗非昔布联合奥曲肽能否增强对胃癌生长的抑制及初步机制。采用3H 胸腺嘧啶掺入观察药物对胃癌细胞DNA合成的影响。应用中效原理分析两药联用的效应性质。观察罗非昔布联合奥曲肽对人胃癌裸鼠原位移植瘤生长的作用。免疫组化检测胃癌PCNA表达 ,TUNEL法检测细胞凋亡。罗非昔布联合奥曲肽在体外能协同抑制胃癌细胞的DNA合成。罗非昔布对胃癌的抑瘤率为 89 7% ,显著低于联合组 (98 8% ) (P <0 0 1)。罗非昔布使体外或体内胃癌细胞PCNA指数下降 6 3%或 4 3% ,联合奥曲肽后下降 83 3%或 79 3% (P <0 0 5 )。罗非昔布组胃癌移植瘤细胞凋亡指数为 (4 6 6 0± 3 4 2 ) % ,显著高于对照组 (8 5 6± 2 34) % (P <0 0 1) ,显著低于联合组 (78 2±6 5 ) % (P <0 0 1)。罗非昔布联合奥曲肽通过增加胃癌细胞凋亡及抑制细胞增殖从而增强对胃癌生长的抑制。
- 刘纯伦唐承薇周旭春王春晖
- 关键词：罗非昔布奥曲肽胃癌免疫组化
- 奥曲肽对胃癌细胞转录活化蛋白-1的抑制作用被引量：31
- 2002年
- 背景与目的:生长抑素是一种多功能神经肽,其本身及其类似物能抑制多种内分泌肿瘤及某些胃肠肿瘤的生长,但是否能抑制胃癌的生长并不清楚。因此,本研究拟探讨生长抑素类似物奥曲肽对胃癌细胞生长的影响及其机制。方法:不同浓度的奥曲肽作用于人胃癌SGC-7901细胞24h后,用免疫印迹法检测奥曲肽对SGC-7901细胞中c-Fos、ERK蛋白表达的影响。建立人胃癌细胞裸鼠原位移植瘤模型,奥曲肽治疗8周,观察奥曲肽对胃癌生长的影响;免疫组化法检测裸鼠人胃癌组织c-Fos和ERK表达的变化。在此基础上,采用EMSA技术检测奥曲肽对胃癌细胞AP-1活化的影响。结果:1×10-5mol/L奥曲肽可明显降低胃癌细胞的3H-TdR的掺入;奥曲肽能抑制人胃癌细胞裸鼠原位移植瘤的生长,抑瘤率为62.3%。SGC-7901胃癌细胞经不同浓度奥曲肽作用后,其c-Fos和ERK的表达水平均有不同程度下降;组织标本检测亦有类似变化。EMSA分析显示,胃癌细胞有基础水平的AP-1活化,20%血清能刺激AP-1的结合力,奥曲肽能抑制这种刺激作用。结论:奥曲肽通过抑制胃癌c-Fos、ERK蛋白的表达而抑制AP-1的结合活性,从而抑制胃癌的生长。
- 王春晖唐承薇
- 关键词：奥曲肽胃癌生长抑素类似物激活蛋白-1细胞外信号调节激酶
- 塞来昔布联合奥曲肽对人胃癌多药耐药细胞生长的影响被引量：11
- 2004年
- 背景与目的:环氧合酶-2(cyclooxygenase,COX-2)抑制剂塞来昔布及奥曲肽(octreotide)均对肿瘤细胞有抑制作用,本研究旨在探讨塞来昔布及其与奥曲肽联合对人胃癌多药耐药细胞株SGC7901/ADR生长的影响。方法:塞来昔布组:塞来昔布浓度为1×10-4～1×10-8mol/L;奥曲肽组:奥曲肽浓度为1×10-5～1×10-9mol/L;合用组:塞来昔布在上述浓度范围内加1×10-6mol/L的奥曲肽;对照组:无血清RPMI-1640培养液。比较各实验组对SGC7901、SGC7901/ADR细胞生长的影响。采用3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法检测细胞的增殖;免疫细胞化学检测增殖细胞核抗原(proliferatingcellnuclearantigen,PCNA)的表达;DNA末端原位标记染色法(TUNEL法)及流式细胞仪检测细胞凋亡。结果:塞来昔布较对照组明显降低SGC7901/ADR细胞的3H-TdR掺入,掺入值分别为(471.3±79.7)cpm及(917.5±130.8)cpm,塞来昔布与奥曲肽联合应用时,3H-TdR掺入值较单独用药(220.0±19.7)cpm下降53.3%。两药联合对SGC7901/ADR细胞DNA合成的抑制效应与塞郑文斌,等.塞来昔布联合奥曲肽来昔布的浓度呈显著正相关(r=0.996,P<0.001)。单用塞来昔布或联合用药都能明显降低SGC7901/ADR细胞PCNA的表达。单用塞来昔布时SGC7901/ADR细胞凋亡率为32.9%,当其与奥曲肽合用。
- 郑文斌王春晖强鸥唐承薇
- 关键词：多药耐药环氧合酶-2塞来昔布奥曲肽
- 塞来昔布联合奥曲肽抑制人胃癌生长的临床研究被引量：5
- 2005年
- 目的探讨环氧合酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布联合生长抑素类似物奥曲肽在人体内对胃癌生长的抑制作用。方法51例胃癌患者随机分为对照组15例,术前不用药物;塞来昔布组18例,术前口服塞来昔布0.2g,每天1次,共7d;联合组18例,术前口服塞来昔布0.2g+奥曲肽100μg皮下注射,每天1次,共7d。术中切除标本送组织学研究,分析胃癌组织坏死、炎性细胞浸润及纤维组织增生情况。免疫组化法检测胃癌组织微血管密度(MVD)及胃癌细胞COX-2表达情况,DNA末端原位标记染色法检测胃癌细胞凋亡。实时荧光定量逆转录聚合酶链反应法检测术前内镜活检的胃癌组织生长抑素受体(SSTR)的mRNA表达量。结果与对照组比较,联合组胃癌组织坏死差异有统计学意义(P<0.05),纤维组织增生明显(P<0.05),胃癌细胞凋亡率(7.06%)高于对照组(6.23%),差异有统计学意义(P<0.05)。联合组肿瘤组织中的MVD(20.44)较对照组(24.87)明显减少(P<0.05),而各组COX-2表达差异无统计学意义(P>0.05)。所有胃癌组织均有SSTR-1,SSTR-2,SSTR-3的mRNA表达。结论塞来昔布联合奥曲肽对人体内胃癌生长具有明显抑制作用。
- 黄茂涛陈志新魏兵张波王春晖黄明慧唐承薇
- 关键词：胃肿瘤塞来昔布奥曲肽
- 塞来昔布联合奥曲肽抑制胃癌转移的体内试验研究被引量：12
- 2006年
- 目的探讨塞来昔布联合奥曲肽能否抑制人胃癌细胞转移。方法75例胃癌患者被随机分为3组,每组25例。(1)对照组:术前不用任何抗肿瘤药物。(2)塞来昔布组:术前口服塞来昔布200mg/d,7d。(3)联合组:术前口服塞来昔布200mg/d(7d)+奥曲肽100μg/d(皮下注射7d)。免疫组化显示胃癌上皮性钙黏附蛋白(E-Cad)及基质金属蛋白酶(MMP)的表达,免疫印迹法定量检测胃癌组织MMP-2及MMP-9蛋白表达。术后胃癌组织经消化、免疫磁珠分离而得原代胃癌细胞,用改良的BodyenChamber膜侵袭系统比较3组术后胃癌细胞运动能力。结果胃癌组织E-Cad异常表达率在联合组(28·0%)及塞来昔布组(44·0%)明显低于对照组(56·0%,P<0·05)。3组MMP-2、MMP-9蛋白条带面积光密度积分值分别为99±20、260±15、314±11及89±13、180±13、241±12,联合组及塞来昔布组也都明显低于对照组(P<0·05)。联合组胃癌细胞迁移力较对照组低了38%(P<0·05)。结论塞来昔布联合奥曲肽有助于抑制胃癌细胞在人体内的转移。
- 黄茂涛陈志新魏兵张波王春晖黄明慧唐承薇
- 关键词：胃肿瘤肿瘤转移奥曲肽塞来昔布
