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兔骨髓基质干细胞的分离培养和鉴定及转化生长因子β1的基因瞬时转染研究被引量：9: 2006年; 目的：通过研究兔骨髓基质干细胞（BMSC）的体外获取方法、生物学鉴定以及新型靶向性非病毒载体介导转化生长因子β1（TGF-β1）基因在BMSC中的瞬时转染和表达，为下一步的骨组织工程基因治疗研究奠定基础。方法：取4周龄新西兰大白兔骨髓，通过密度梯度离心法和全骨髓培养法获取BMSC，通过倒置相差显微镜、BrdU标记染色观察其形态学特征和生长状况，免疫组化观察其表面抗原表达情况。固相合成法合成含RGD肽K16GRGDSPC（K16-RGD）。以K16-RGD为载体介导TGF-β1基因转染兔BMSC，免疫组化检测其瞬时转染和表达·效率。结果：分离培养的细胞在第10-12代以前生长性状稳定，增殖能力强。免疫组化检测兔BMSC表达CD90、CD44，但不表达CD34、CD45、CD11b和层黏连蛋白Laminine。与全血培养法相比较，密度梯度离心法获取的BMSC纯度更高。K16-RGD介导TGF-β1基因瞬时转染效率可达（21．6±4．3）％。结论：分离培养的细胞成分较为单一，具有干细胞特性；TGF-β1基因能在BMSC中转染和表达，为下一步利用BMSC、K16．RGD和TGF-β1基因进行骨组织工程基因治疗研究奠定了基础。; 潘海涛郑启新郭晓东刘勇; 关键词：骨髓基质干细胞转化生长因子-Β1基因转染

含RGD肽基因导入系统介导绿色荧光蛋白基因转染骨髓基质干细胞的瞬时表达检测被引量：4: 2006年; 目的评价以整合素为靶向的新型非病毒载体系统——含RGD肽基因导入系统K16GRGDSPC(记作K16R-GD)作为基因转染载体的可行性。方法固相合成法合成K16R-GD,以其为载体与不同比例的增强型绿色荧光蛋白质粒(pEGFP)混合转染兔骨髓基质干细胞(BMSCs),72h后用荧光显微镜观察转染效率及瞬时表达情况。结果转染效率与K16R-GD和质粒的比例有关,转染体系中K16R-GD(μg):pEGFP(μg)为3:1时EG FP有最高的表达效率。结论含RGD肽K16R-GD能有效介导外源基因在BM-SCs内的转染和表达,为下一步利用K16R-GD作为载体构建载基因仿生基质材料进行骨缺损修复研究奠定了基础。; 潘海涛郑启新郭晓东刘勇宋玉林; 关键词：绿色荧光蛋白基因基因转染骨髓基质干细胞

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国家自然科学基金(302000633047083)