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大豆品种吉林35胚尖再生体系的建立及对农杆菌的敏感性被引量：3: 2012年; 为建立一个简便、高效、稳定的大豆胚尖再生体系,以吉林35为材料,胚尖为外植体,研究氯气、升汞、酒精3种消毒方法对不定芽出芽率的影响和6-BA对不定芽再生率的影响。同时,为检测吉林35的农杆菌易感性,对平安8、东农42、吉林47和吉林35四个大豆品种进行gus基因组织化学染色。研究表明,酒精消毒法对种子伤害较小,可以保证较高的出芽率。6-BA对不定芽再生作用显著,单独使用或配合IBA使用均可获得较高的再生率。gus基因组织化学染色结果表明吉林35的农杆菌易感性强,明显优于其它品种。吉林35胚尖外植体再生率较高且对农杆菌较敏感,是遗传转化良好的受体材料。; 闫帆孙昕翟莹雷婷张庆林苏连泰王英李景文王庆钰; 关键词：大豆出芽率再生率易感性

农杆菌介导大豆遗传转化研究进展及转基因作物现状被引量：6: 2009年; 利用转基因技术将目的基因导入植物受体细胞,使目的基因在植物受体中表达,从而获得优良性状的植株,达到快速培育植物新品种的目的。将植物基因工程技术与常规育种技术相结合,在培育优质、高产和抗逆植物新品种中具有巨大潜力。目前,在各种转基因物种中,大豆仍是难转化的作物之一,建立有效的转化系统是改良大豆品质性状和研究大豆功能基因的先决条件。综述农杆菌介导大豆遗传转化分子机理,影响大豆遗传转化因素,提高大豆转化效率的最新研究进展及转基因大豆生产现状。; 练云梁慧珍王树峰余永亮王庭峰位艳丽; 关键词：大豆农杆菌转基因作物

快速检测大豆籽粒中十二种异黄酮组分的HPLC方法被引量：14: 2009年; 【目的】利用高效液相色谱(HPLC)技术快速检测大豆异黄酮组分,为大豆的异黄酮标记辅助育种提供重要依据。【方法】以大豆异黄酮12种组分为标准样品,利用HPLC技术结合吸收波峰鉴定的方法进行异黄酮组分的分析。【结果】不同异黄酮苷元组分黄豆苷元(daidzein)、大豆黄素(glycitein)和染料木素(genistein)分别具有不同的最大紫外光谱吸收波长,分别位于250、257和260nm左右。采用YMC-C18反相色谱柱,以含0.1%(v/v)乙酸13%～30%(v/v)的乙腈为流动相,在35℃柱温条件下,经梯度洗脱,结合紫外吸收检测,可以准确地定性和定量鉴定出12种不同异黄酮组分。【结论】该方法样品用量少,检测异黄酮含量准确、快速,适合大量样本分析。; 孙君明孙宝利韩粉霞闫淑荣杨华菊池彰夫; 关键词：MAX 异黄酮 HPLC

拟南芥胱硫醚-γ-合成酶(D-AtCGS)抗血清制备及对D-AtCGS转基因大豆的检测被引量：1: 2011年; 构建了N端缺失拟南芥CGS基因(D-AtCGS)的原核表达载体,对其进行了原核表达、蛋白纯化和抗血清制备,并利用获得的抗血清对国家大豆改良中心北京分心中心获得的组成型表达、种子特异性表达的D-AtCGS转基因大豆及转全长AtCGS(F-AtCGS)和D-ATCGS的豆科模式植物百脉根进行了Western blot检测,结果表明:各供试转基因材料的检测信号明显高于野生型对照,最终成功建立了AtCGS转基因大豆的Western blot检测方法,该研究可为AtCGS的表达分析和转基因植物检测提供良好的技术支持。; 王义鹏于洋孙石许艳丽侯文胜; 关键词：原核表达抗血清制备

大豆硬脂酸-ACP脱饱和酶基因启动子的克隆及其表达活性分析被引量：6: 2011年; 以吉豆2号基因组为模板,通过TAILPCR方法,扩增得到大豆硬脂酸-ACP脱饱和酶基因启动子片段SACPD-Cp。PLACE在线启动子预测分析表明,该序列中含有多种典型的种子特异性表达序列元件。将SACPD-Cp片段取代pCAMBIA1301质粒中的CaMV35S启动子,构建表达载体pCAM-SACPD-Cp,通过农杆菌介导法在大豆组织中进行瞬时表达,GUS组织化学染色和荧光定量研究其表达特性。结果表明,SACPD-Cp驱动GUS基因在种子中的表达活性是CaMV35S启动子的93.01%;SACPD-Cp启动子与现已知启动子无同源性,仅在大豆种子中检测到GUS活性,而在根、茎和叶组织中均未检测到GUS活性,证实SACPD-Cp是一个新的种子特异性启动子。; 张庆林赵艳李晓薇翟莹张艳王英李景文王庆钰; 关键词：大豆

大豆逆境诱导基因GmPRP的克隆与表达被引量：6: 2011年; 通过对大豆吉林32未成熟胚表达谱的分析,利用RT-PCR技术从大豆中克隆了一个新的脯氨酸富集蛋白基因,命名为GmPRP。GmPRP的开放阅读框长396bp,其分子量13.79kD,具有131个氨基酸残基,等电点8.96,其DNA序列无内含子。GmPRP蛋白序列N端含有一段信号肽,中间为脯氨酸富集区,C端为半胱氨酸富集区。该蛋白与四季豆和木豆的PRP同源性最高,具有较近的亲缘关系。GmPRP的683bp启动子序列含有10种与逆境相关的顺式作用元件,分别为ABRE-like、G-box、W-box、GT-1、MYB、MYC、BIHD10s、DPBF、SEBF和WRKY。实时荧光定量PCR分析表明,该基因表达量在大豆的根和叶中最高,在茎和胚中其次,在花中最低,且受干旱、高盐、低温、机械伤害及SA(水杨酸)、ETH(乙烯)、ABA(脱落酸)、MeJA(茉莉酸甲酯)的诱导上调表达。; 翟莹雷婷婷闫帆黄开猛李晓薇张庆林张海军苏连泰孙昕王英李景文王庆钰; 关键词：大豆逆境胁迫启动子

转SCMRP基因大豆“中间试验”农艺性状调查被引量：2: 2013年; 摘要：对已获得的含高甲硫氨酸转基N大豆株系BX3—24、BX38—32、受体品种绥农147L对照品种合丰50进行产量性状、形态性状和品质性状等方面的农艺性状调查及统计学分析。结果表明，在单株荚数、百粒重、结荚习性、花色、叶形等方面，两个转基因大豆株系与受体品种和对照品种相比均无明显差异，而在株高方面，两个转基因大豆株系显著高于受体品种8～21cm；在品质性状上，与受体品种相比，两个转基因大豆株系蛋白含量有所下降。; 朱延明张凤柏锡才华纪巍贾蓓; 关键词：转基因大豆形态性状品质性状

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国家科技重大专项(2008ZX08004-003)