上海市科学技术委员会资助项目(014119018)
- 作品数：2 被引量：12H指数：2
- 相关作者：马天乐谭继宏钟捷乔敏敏涂水平更多>>
- 相关机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会资助项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 生存素基因突变体诱导胃癌细胞有丝分裂障碍的实验研究被引量：7
- 2003年
- 目的 观察生存素基因突变体质粒 (Cys84Ala)对胃癌细胞有丝分裂过程中细胞动力学行为的影响。方法 应用基因重组技术构建Cys 84Ala ,以脂质体转染的方法将质粒DNA转入胃癌细胞株 ,应用免疫组化法检测胃癌组织中生存素基因表达 ,流式细胞仪检测胃癌细胞凋亡及细胞周期 ,West ernblot检测胃癌细胞中多聚ADP核糖聚合酶 (PARP)和细胞色素C蛋白的表达 ,免疫荧光染色检测有丝分裂危象情况。结果 Cys84Ala可通过抑制野生型生存素基因的功能诱导胃癌细胞凋亡 ,增加cas pase 3活性 ,促进PARP裂解和细胞色素C的释放 ,亦可导致胃癌细胞发生有丝分裂障碍而死亡。 结论 Cys84Ala能通过不同的途径诱导胃癌细胞凋亡和有丝分裂危象 ,并有可能成为胃癌治疗的一个候选基因。
- 孙璟涂水平谭继宏邹冰钟捷马天乐乔敏敏江石湖
- 关键词：生存素基因突变体胃癌癌细胞
- pEGFP-C1-反义生存素重组质粒的构建和转染被引量：5
- 2002年
- 目的 构建pEGFP C1 反义生存素 (survivin)重组质粒 ,并转染入人MKN 45低分化胃腺癌细胞株。观察转染前后生存素基因的表达及对凋亡的影响 ,从基因水平探讨反义生存素核酸治疗胃癌的分子生物学机制 ,为今后利用反义基因治疗肿瘤提供实验和理论依据。方法 应用基因重组技术构建 pEGFP C1 反义生存素重组质粒 ,通过脂质体转染法转染人MKN 45胃腺癌细胞株 ,以流式细胞仪方法检测细胞凋亡 ,以RT PCR技术检测质粒转染前后生存素基因mRNA的表达。结果 pEGFP C1 反义生存素重组质粒转染MKN 45低分化胃腺癌细胞株后细胞凋亡明显增加 ,G2 /M期细胞减少 ,同时生存素基因在mRNA水平被抑制。结论 反义生存素核酸能抑制细胞增殖 ,减少生存素基因的mRNA表达而促进胃癌细胞凋亡目的 构建pEGFP C1 反义生存素 (survivin)重组质粒 ,并转染入人MKN 45低分化胃腺癌细胞株。观察转染前后生存素基因的表达及对凋亡的影响 ,从基因水平探讨反义生存素核酸治疗胃癌的分子生物学机制 ,为今后利用反义基因治疗肿瘤提供实验和理论依据。方法 应用基因重组技术构建 pEGFP C1 反义生存素重组质粒 ,通过脂质体转染法转染人MKN 45胃腺癌细胞株 ,以流式细胞仪方法检测细胞凋亡 ,以RT
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- 关键词：基因重组胃癌细胞凋亡PEGFP-C1重组质粒
