河北省教育厅科研基金(2006302)
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
- 相关作者：李欣孙树汉高福禄窦志杰更多>>
- 相关机构：第二军医大学承德医学院承德医学院附属医院更多>>
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- 相关领域：生物学更多>>
- 人膜联蛋白A5重组质粒的构建及其在宫颈癌细胞系SiHa细胞中的转染与表达
- 2008年
- 目的:构建膜联蛋白A5(ANXA5)的重组表达质粒,转染宫颈癌细胞并检测其表达。方法:自行设计引物,引入BamHI和XhoI的酶切位点,PCR法从pJLA503-ANXA5中获得ANXA5基因;将pcDNA3.1质粒用BamHI和XhoI双酶切后,用T4连接酶将其与ANXA5基因连接,并经测序证实基因序列正确后,用磷酸钙共沉淀法转染宫颈癌细胞系SiHa细胞,并用Western blot方法检测细胞中ANXA5蛋白的过表达。结果:重组质粒中ANXA5基因序列正确,转染重组质粒后的SiHa细胞过表达ANXA5蛋白。结论:成功构建了pcDNA3.1-ANXA5重组质粒,转染肿瘤细胞后可过表达ANXA5蛋白,为研究ANXA5在肿瘤细胞中的作用奠定了基础。
- 李欣高福禄窦志杰孙树汉
- 关键词：膜联蛋白A5重组质粒SIHA细胞
