河南省科技发展计划项目(072102310054)
- 作品数：2 被引量：10H指数：2
- 相关作者：王留兴王峰樊青霞何炜刘剑更多>>
- 相关机构：郑州大学第一附属医院郑州大学更多>>
- 发文基金：河南省科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 食管鳞癌EC-9706细胞中mTOR信号通路在TGF-β1介导的EMT中的作用被引量：4
- 2013年
- 目的:探讨食管鳞癌EC-9706细胞中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路活化在转化生长因子β1(transforming growth factor beta1,TGF-β1)介导的上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)中的作用。方法:TGF-β1(终质量浓度为7.5ng/mL)或TGF-β1(终质量浓度为7.5ng/mL)+雷帕霉素(终浓度为200nmol/L)作用食管鳞癌EC-9706细胞后,在倒置显微镜下观察细胞形态的变化,RT-PCR及蛋白质印迹法检测EC-9706细胞中mTOR和E-cadherinmRNA及其蛋白的表达,通过Boyden小室实验检测EC-9706细胞侵袭能力的变化。构建裸鼠食管鳞癌EC-9706细胞移植瘤模型,RT-PCR及蛋白质免疫印迹法检测雷帕霉素作用后,移植瘤组织中mTOR和E-cadherinmRNA及其蛋白的表达。结果:TGF-β1作用后,EC-9706细胞梭形化明显,mTORmRNA及p-mTOR蛋白的表达水平高于未进行任何处理的EC-9706细胞对照组(P<0.05),E-cadherin mRNA及其蛋白的表达水平低于对照组(P<0.05),细胞侵袭能力明显高于对照组(P<0.05);TGF-β1+雷帕霉素组EC-9706细胞mTORmRNA及p-mTOR蛋白的表达水平低于TGF-β1单药作用组(P<0.05),E-cadherin mRNA及其蛋白的表达水平高于TGF-β1单药作用组(P<0.05),细胞侵袭能力较TGF-β1单药作用组明显下降(P<0.05)。雷帕霉素作用后,裸鼠食管鳞癌EC-9706细胞移植瘤组织中mTORmRNA及p-mTOR蛋白的表达水平低于对照组(P<0.05),E-cadherin mRNA及其蛋白的表达水平高于对照组(P<0.05)。结论:食管鳞癌EC-9706细胞中mTOR可能参与TGF-β1介导的EMT的发生,mTOR可能作为食管鳞癌基因治疗中的有效靶点发挥作用。
- 王峰轩小燕彭方慧王留兴樊青霞
- 关键词：转化生长因子Β雷帕霉素靶蛋白上皮间质转化
- 钠氢交换蛋白1基因在体外对食管癌KYSE-70细胞增殖和侵袭作用的影响被引量：6
- 2013年
- 目的:观察钠氢交换蛋白1(Na^+/H^+ exchanger 1,NHE-1)基因对食管癌KYSE-70细胞增殖和侵袭能力的影响。方法:采用实时荧光定量-PCR和蛋白质印迹法检测NHE-1mRNA及其蛋白在人食管癌EC-9706、KYSE-450、EC-1和KYSE-70细胞中的表达情况。将化学合成的靶向NHE-1的小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)体外转染入KYSE-70细胞,实时荧光定量-PCR和蛋白质印迹法检测转染24、48和72h后KYSE-70细胞中NHE-1mRNA及其蛋白的表达,MTT和Boyden小室法检测KYSE-70细胞的增殖及侵袭能力。结果:NHE-1mRNA及其蛋白在KYSE-70细胞中高表达。与阴性对照(转染阴性对照siRNA)及空白对照(未转染的KYSE-70细胞)组相比,靶向NHE-1的siRNA可抑制KYSE-70细胞中NHE-1 mRNA及其蛋白的表达,差异具有统计学意义(P<0.05);与阴性对照组、空白对照组及NHE-1siRNA转染24h组比较,NHE-1siRNA转染48和72h后的KYSE-70细胞体外增殖能力和侵袭能力明显受到抑制,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:干扰NHE-1基因的表达可以抑制食管癌KYSE-70细胞的体外增殖和侵袭能力,NHE-1基因有望成为食管癌基因治疗的重要靶点。
- 刘剑王峰何炜王留兴樊青霞
- 关键词：食管肿瘤肿瘤细胞增殖细胞
