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p53上调凋亡调控因子对不同p53表型胶质瘤细胞生长的影响被引量：1: 2013年; 目的观察p53上调凋亡调控因子（PUMA）对不同p53表型人类脑胶质瘤细胞系生长的影响，并探讨其可能的作用机制。方法构建PUMA腺病毒（Ad—PUMA）及空载体腺病毒（Ad．DsRed），分别转染胶质瘤细胞系U251（p53突变型）及SHG-44（p53野生型），CCK-8法检测各组细胞增殖能力；流式细胞术检测各组细胞凋亡率；Westernblot法检测PUMA及凋亡相关蛋白bcl-2、Bax的表达；Caspase活性检测试剂盒检测Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的活性。结果在p53状态不同的胶质瘤细胞系U251及SHG-44中，Ad．PUMA转染组与空载体组及空白对照组比较，均显现出细胞增殖抑制效应抑制率分别为（50．89±4．73）％和（44．45±5．33）％，P〈O．05]以及促凋亡作用凋亡率分别为（44．89±5．08）％和（31．67±7．32）％，P〈0．051；Westernblot结果显示，Ad—PUMA组胶质瘤细胞转染后，可见PUMA蛋白表达升高，同时伴随抗凋亡蛋白bcl-2表达降低及促凋亡蛋白Bax表达增强（P〈0．05）；Caspase活性检测结果显示Ad—PUMA组Caspase-3、Caspase-9活性增加（P〈0．05），而Caspase-8活性未见明显改变（P〉0．05）。结论无论p53表型如何，PUMA均可抑制胶质瘤细胞增殖，促进其凋亡，其机制可能是通过线粒体凋亡途径即上调Bax，抑制bcl-2表达，进而激活Caspase-9实现的，Ad—PUMA有望成为胶质瘤基因治疗的新靶点。; 王新星苗旺王宏勤刘晓东范益民; 关键词：神经胶质瘤 P53 细胞增殖细胞凋亡

重组腺病毒P53上调凋亡调控因子增强胶质瘤细胞对替莫唑胺敏感性的体内研究被引量：2: 2011年; 目的通过体内实验探讨外源性p53上调凋亡调控因子（PUMA）对人类脑胶质瘤细胞生长的影响及其增强胶质瘤细胞对替莫唑胺（TMZ）敏感性的机制。方法建立人类脑胶质瘤细胞株U87MG裸鼠皮下移植瘤模型，将胶质瘤裸鼠用随机区组法随机分为四组，于建模2周后，分别自腹腔注射0．9％NaCl溶液100μl（对照组）、2×108pfu／100μlAd—PUMA（PUMA组）、TMZ10mg／kg（TMz组）和2×108pfu／100μlAd—PUMA＋TMZ10mg／kg（联合组），每组8只。治疗20d后处死裸鼠，剖腹测量原位肿瘤体积、抑瘤率。TUNEL检测肿瘤细胞凋亡情况及计算凋亡指数（AI）。半定量RT-PCR和Westernblot法检测DNA损伤修复蛋白6-氧-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶（MGMT）mRNA和MGMT蛋白表达情况。结果治疗20d时对照组、PUMA组、TMZ组、联合组诱发肿瘤瘤体积分别为（3．684±O．09）、（2．634±0．13）、（2．13±0．07）、（0．97±0．02）cm3，四组体积进行两两比较差异有统计学意义（P均〈0．05）。治疗组抑瘤率分别为28．5％、42．1％、73．6％，两两比较差异有统计学意义（P均〈0．05）。TUNEL染色并计算AI：对照组（2．0±1．2）％、Ad．PUMA组（11．44-2．6）％、TMZ组（7．6±3．2）％、联合组（20．64-8．6）％，进行两两比较差异有统计学意义（P均〈0．05）。半定量RT—PCR和Western blot法检测显示MGMTmRNA和MGMT蛋白在TMZ组中表达最高，与其他三组比较差异有统计学意义（P均〈0．05）。结论Ad．PUMA联合TMZ具有协同抑制胶质瘤生长作用，其机制可能与Ad—PUMA促进凋亡和抑制MGMT表达有关。; 刘晓东王宏勤苗旺赵和千范益民郝解贺; 关键词：神经胶质瘤替莫唑胺重组腺病毒

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山西省卫生厅科技攻关计划项目(20100105)

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