浙江省“钱江人才计划”(2010R10062)
- 作品数：9 被引量：10H指数：2
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- 甘草对H_2O_2诱发人HepG2细胞DNA损伤的保护作用
- 2011年
- 目的探讨甘草对过氧化氢(H2O2)诱发人HepG2细胞DNA损伤的保护作用。方法培养的HepG2细胞经甘草(2,4,8和16 g/L)单独处理或甘草与H2O2(2 g/L+500μmol/L,10 g/L+500μmol/L)同时处理2 h后,分别运用彗星试验(comet assay)结合彗星图像分析软件(CASP)分析细胞尾部DNA百分率变化。结果甘草单独处理的HepG2细胞尾部DNA百分率没有明显变化,与不处理对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05);但甘草与H2 O2同时处理的HepG2细胞尾部DNA百分率显著降低,与H2O2(500μmol/L)单独处理对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。结论甘草本身不能诱发HepG2细胞DNA损伤,但甘草对H2 O2诱发HepG2细胞DNA损伤有保护作用。
- 陈建明葛莉伟王晶范冬薇
- 关键词：甘草H2O2HEPG2细胞彗星试验
- 干扰素-γ对喉癌Hep-2细胞增殖和凋亡的影响被引量：4
- 2011年
- 体外培养的人喉癌细胞系Hep-2细胞用10 ng/ml干扰素-γ处理不同时间后,利用细胞计数、细胞凋亡-DNA Ladder分析及半定量RT-PCR方法,探讨干扰素-γ对Hep-2细胞增殖及凋亡的影响并初步分析其作用分子机制。结果显示,与不处理对照细胞相比,干扰素-γ处理后第2天起Hep-2细胞增殖明显变慢;细胞凋亡分析显示,干扰素-γ处理后Hep-2细胞基因组DNA电泳图谱呈梯状分布;半定量RT-PCR分析显示,干扰素-γ处理诱导Hep-2细胞IFI16基因表达。结果表明,干扰素-γ抑制Hep-2细胞增殖诱导Hep-2细胞凋亡,其机制可能与干扰素-γ诱导IFI16基因表达有关。
- 陈建明赵菁葛莉伟
- 关键词：喉癌干扰素-ΓHEP-2细胞增殖凋亡
- IFI16基因外来表达对喉癌细胞Hep-2的影响被引量：2
- 2012年
- 将RT-PCR扩增得到的IFI16基因构建到真核表达质粒pVR1012中,得到pVR1012-IFI16重组质粒,用脂质体将其转染导入Hep-2细胞。半定量RT-PCR及Western blot检测IFI16基因在Hep-2细胞中的外来表达情况,细胞生长曲线绘制法及MTT法测定IFI16基因外来表达对Hep-2细胞增殖的影响,流式细胞术检测IFI16基因外来表达对Hep-2细胞周期及凋亡的影响。半定量RT-PCR分析结果发现,pVR1012-IFI16重组质粒转染的Hep-2细胞IFI16基因mRNA水平显著升高;Western blot分析结果发现,pVR1012-IFI16重组质粒转染的Hep-2细胞IFI16基因蛋白质表达水平显著升高;细胞生长曲线测定结果发现,第2天开始pVR1012-IFI16重组质粒转染的Hep-2细胞生长变慢,至第3天时pVR1012-IFI16重组质粒转染的Hep-2细胞生长速度明显变慢,与mock转染及空载体转染对照细胞相比差异显著(P<0.05);MTT测定结果发现,pVR1012-IFI16重组质粒转染Hep-2细胞48 h后,其相对活细胞数目显著降低,与mock转染及空载体转染对照细胞相比差异十分显著(P<0.01);流式细胞术检测结果发现,与mock转染及空载体转染对照细胞相比,pVR1012-IFI16重组质粒转染48 h后Hep-2细胞亚G0期细胞比例以及凋亡细胞比例都显著升高。上述研究结果说明,构建得到的pVR1012-IFI16重组质粒能在Hep-2细胞中外来表达IFI16基因,IFI16基因外来表达抑制Hep-2细胞增殖、阻滞Hep-2细胞周期在亚G0期并诱导Hep-2细胞发生凋亡。
- 陈建明赵菁邱明
- 关键词：HEP-2细胞增殖细胞周期凋亡
- pEGFP-IFI16表达载体构建及其表达对Hep-2细胞增殖的影响被引量：1
- 2013年
- RT-PCR扩增的IFI16基因连接到pUCm-T载体并测序鉴定,经测序正确的IFI16基因再连接到pEGFP-C1载体构建pEGFP-IFI16重组质粒,重组质粒pEGFP-IFI16转染Hep-2细胞后用荧光显微镜及半定量RT-PCR分析其表达情况,并用流式细胞仪测定细胞生长曲线分析其表达对Hep-2细胞增殖的影响.结果显示pEGFP-IFI16重组质粒构建正确,转染Hep-2细胞后荧光显微镜下观察到绿色荧光信号,半定量RT-PCR结果显示转染后Hep-2细胞IFI16基因条带亮度明显升高,细胞生长曲线测定结果显示转染后Hep-2细胞从第二天起其增殖速度变慢、至第三天时其增殖速度明显慢于对照细胞的增殖速度.说明成功构建了能在Hep-2细胞中表达EGFP-IFI16融合蛋白的pEGFP-IFI16重组质粒,pEGFP-IFI16重组质粒体表达能抑制Hep-2细胞的增殖.
- 虞游张艳欧赵文铖白坚陈建明
- 关键词：HEP-2细胞
- DNA甲基化模式及其在癌症中的作用被引量：2
- 2013年
- 随着对癌症研究的不断深入,表观遗传调控在癌症发生发展中的作用也越来越受到人们的关注。DNA甲基化作为一种重要的表观遗传修饰机制,在基因表达调控中起着十分重要的作用。该文对DNA甲基化模式及其在癌症中的作用作了综述,并对DNA甲基化作为癌症早期诊断的生物标记以及癌症表观治疗的新策略作了总结和展望。
- 虞游朱涵卢佳伟姚卉卉陈建明
- 关键词：DNA甲基化癌症表观遗传生物标记
- 硫辛酸对甲醛致人HepG2细胞DNA损伤的保护作用被引量：2
- 2010年
- 为探讨硫辛酸对甲醛诱发人HepG2细胞DNA损伤的保护作用,体外培养的HepG2细胞经甲醛(0.25,2.5,25μmol/L)单独处理或甲醛与硫辛酸((5+20),(5+40)μmol/L)同时处理2 h后,分别运用彗星试验(comet assay)结合彗星图像分析软件(CASP)分析细胞尾部DNA百分率(tail DNA%)变化.结果显示:不同浓度甲醛处理后HepG2细胞尾部DNA百分率以浓度依赖性方式显著升高(P<0.01);但甲醛与硫辛酸同时处理后HepG2细胞尾部DNA百分率明显降低并与硫辛酸浓度呈依赖关系,与甲醛单独处理组(5μmol/L)相比差异显著(P<0.05或P<0.01).此结果说明硫辛酸对甲醛诱发的人HepG2细胞DNA损伤有保护作用.
- 陈建明李耀平张国伟邱明
- 关键词：硫辛酸甲醛HEPG2细胞彗星试验
- IFI16基因反义干扰表达载体的构建与鉴定被引量：1
- 2014年
- 为了构建可在人喉癌细胞中稳定表达IFI16基因短发夹RNA(shRNA)的表达载体,设计合成的IFI16基因shRNA片段,连接到经BamHI和EcoRI双酶切的pGreenPuroTMshRNA表达载体中,连接产物转化大肠杆菌后挑取几个抗性菌落,用PCR技术初步进行鉴定,经PCR初步鉴定为重组质粒的一个重组子DNA用测序进一步鉴定,测序结果显示成功构建了IFI16基因shRNA的表达载体pGreenPuro-IFI16shRNA.
- 张艳欧虞游赵文铖朱涵卢佳伟姚卉卉陈建明
- 阿莫西林对人HepG2细胞DNA有短暂损伤作用被引量：1
- 2011年
- 目的为了探讨阿莫西林对人HepG2细胞DNA是否有损伤作用。方法培养的人HepG2细胞经不同浓度(2、10、50和250μmol/L)阿莫西林处理1h或经50μmol/L阿莫西林处理不同时间(20、40、60、120和180min)后,运用单细胞凝胶电泳(SCGE)技术结合彗星图像软件(CASP)分析细胞尾部DNA百分率(tail DNA%)变化情况。结果不同浓度阿莫西林处理后结果显示,HepG2细胞尾部DNA百分率明显升高,至50μmol/L阿莫西林时达到最高值,各浓度处理组与不处理对照组相比差异皆有显著性(P<0.01);而同一浓度(50μmol/L)阿莫西林处理不同时间后结果显示,HepG2细胞尾部DNA百分率逐渐升高,至1h处理时间点时达到最高值,其后随着处理时间延长HepG2细胞尾部DNA百分率逐渐降低。结论阿莫西林对人HepG2细胞DNA有短暂损伤作用,阿莫西林诱发的HepG2细胞DNA损伤可能随时间延长逐渐被HepG2细胞本身修复除去。
- 陈建明范冬薇王晶葛莉伟邱明
- 关键词：阿莫西林HEPG2细胞单细胞凝胶电泳DNA修复
- α-硫辛酸增强吡咯烷二硫代氨基甲酸对Hep-2细胞增殖的抑制作用
- 2014年
- 目的：探讨α-硫辛酸（α-LA）对吡咯烷二硫代氨基甲酸（PDTC）抑制Hep-2细胞增殖的影响。方法体外培养人喉癌细胞系Hep-2细胞，加入α-LA、PDTC或α-LA联合PDTC作用12，24和48h后，用WST-1法和软琼脂集落形成法检测细胞增殖，Hoechst33258染色法和流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期。结果α-LA5~500μmol·L-1对Hep-2细胞增殖无抑制作用，PDTC5-50μmol·L-1能明显抑制Hep-2细胞增殖（P﹤0.05，P﹤0.01），PDTC5μmol·L-1联合α-LA5，10和20μmol·L-1对Hep-2细胞增殖的抑制率明显高于对照组（P﹤0.01）和PDTC单独处理组（P﹤0.05）。PDTC5μmol·L-1与α-LA5μmol·L-1联合用药，在12~48h内对Hep-2细胞增殖的抑制率呈时间依赖性（r＝0.987，P﹤0.05），24h后软琼脂细胞集落形成数与PDTC单独处理（P﹤0.05）和α-LA单独处理组相比明显减少（P﹤0.01）。Hoechst33258染色和流式细胞仪检测结果表明，与PDTC和α-LA单独处理组比较，PDTC5μmol·L-1与α-LA5μmol·L-1联合用药24h凋亡细胞增加，G2/M期细胞百分率增加（P﹤0.05）。结论α-LA可增强PDTC对Hep-2细胞增殖的抑制作用并诱导Hep-2细胞凋亡。
- 张艳欧虞游陈建明
- 关键词：Α-硫辛酸吡咯烷二硫代氨基甲酸HEP-2细胞细胞增殖
