广东省科技攻关计划(2005B36001054)
- 作品数：3 被引量：16H指数：3
- 相关作者：贝抗胜吴礼杨廖家成孙庆文苏宝金更多>>
- 相关机构：汕头大学粤北人民医院复旦大学更多>>
- 发文基金：广东省科技攻关计划深圳市宝安区科技计划社会公益项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人骨膜细胞体外成骨分化的基因表达和功能检测被引量：3
- 2011年
- 目的探讨并鉴定骨膜细胞经骨形成蛋白7（BMP7）诱导分化为成骨细胞的基因表达和细胞功能。方法成人胫骨骨膜常规体外细胞培养法，分实验组和对照组，分别加入BMP7加成骨辅助剂和单纯成骨辅助剂进行体外培养。CCK-8法检测细胞增殖活性，第5、10、15和20天分别采用Real陆ne-PCR检测骨钙素基因表达，ELISA法检测上清液碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）、骨钙素（osteoealein，OCN）及骨桥蛋白（osteopontin，OPN）的水平，甲苯胺蓝染色检测糖胺聚糖（GAG），RealTime-PCR检测Ⅱ型胶原基因，比色法检测细胞ALP活性，ALP染色法检测ALP，VonKossa染色法检测钙结节。结果两组骨钙素基因表达及上清液ALP、骨钙素、骨桥蛋白的含量均增高，实验组与对照组差异有统计学意义（P〈0．05）。两组细胞的ALP和钙结节染色阳性率增高，实验组与对照组差异有统计学意义（P〈0．05）。甲苯胺蓝染色阳性率及Ⅱ型胶原基因表达表现为先高后低，实验组与对照组差异有统计学意义（P〈0．05）。结论骨膜细胞在BMP7诱导下体外大量增殖和分化成骨，表达出明显的成骨特异基因，并具有合成分泌成骨特异蛋白的功能；成骨化过程中，除直接分化成骨外，还存在部分细胞先经软骨形成再钙化成骨的现象；经骨膜细胞．BMP7途径在体外获取大量成骨细胞可用于组织工程的体外构骨及临床应用。
- 贝抗胜杜志坡熊英辉廖家成苏宝金吴礼杨孙庆文
- 关键词：细胞培养技术骨膜细胞成骨分化细胞功能
- 骨形态发生蛋白7诱导骨膜细胞碱性磷酸酶的表达被引量：5
- 2013年
- 背景:关于骨形态发生蛋白 7 作为刺激因子诱导细胞成骨的报道目前较少见。目的:观察骨膜细胞经骨形态发生蛋白 7 诱导后碱性磷酸酶的表达。方法:取材于成人胫骨骨膜,常规细胞培养法行骨膜细胞体外培养,分为实验组和对照组,分别加入骨形态发生蛋白 7 加成骨细胞培养辅助剂和单纯成骨细胞培养辅助剂,相差显微镜观察骨膜细胞形态特征及超微结构。每组分别在第 7,14,21 天设 3 个时间点,每个时间点设 3 个样本,采用碱性磷酸酶试剂盒法检测成骨细胞特异性标志物碱性磷酸酶表达情况。结果与结论:骨膜细胞经分组培养后,第 7 天时,实验组和对照组骨膜细胞均有明显增殖,碱性磷酸酶的可被检测出,但量不多,细胞外形为梭形,实验组比对照组检测的碱性磷酸酶数量稍多;第 14 天时,实验组及对照组骨膜细胞均显著增殖,细胞外形由梭形变为宽梭形,实验组比对照组检测的碱性磷酸酶数量明显增多。第 21 天时,实验组及对照组骨膜细胞均增殖,其中实验组细胞增殖明显,细胞外形为宽梭形,实验组比对照组检测的碱性磷酸酶数量显著增多。经过统计学分析由骨形态发生蛋白 7 诱导的骨膜细胞的成骨标志物碱性磷酸酶阳性率明显高于对照组(P < 0.01)。提示骨膜细胞具有良好的成骨和再生能力, 骨形态发生蛋白 7 能诱导骨膜细胞加强碱性磷酸酶的表达,能诱导骨膜细胞向成骨细胞转化。
- 廖家成贝抗胜连银川
- 关键词：骨组织构建骨形态发生蛋白骨膜细胞碱性磷酸酶
- 骨形成蛋白信号转导及调控被引量：8
- 2012年
- 背景:骨形成蛋白属于转化生长因子β超家族成员,具有很强的诱导成骨能力。目的:对骨形成蛋白功能、信号转导及调控机制及其信号通路异常与人类疾病的关系进行综述。方法:由第一作者用计算机检索中国期刊全文数据库(CNKI:2010)Medline(1999/2010)数据库,检索词分别为"骨形成蛋白、骨形成蛋白受体、Smad蛋白、信号转导、信号调控"和"Bone morphogenetic proteins,Bone morphogenetic proteins receptors,Smads,Signal transduction,Signaling regulation"。从骨形成蛋白的结构与功能,骨形成蛋白信号传导通路及调控,骨形成蛋白信号通路异常与人类疾病3方面进行总结。共检索到110篇文章,按纳入和排除标准对文献进行筛选,共纳入47篇文章。结果与结论:骨形成蛋白主要通过Smad依赖性和Smad非依赖性2条信号转导途径发挥作用,此过程受到细胞内外许多蛋白的调控,此外骨形成蛋白信号通路异常与人类某些疾病密切相关。
- 吴礼杨贝抗胜
- 关键词：骨形成蛋白SMAD蛋白信号转导信号调控
