国家教育部博士点基金(20040246035)
- 作品数：3 被引量：18H指数：3
- 相关作者：丁正同王坚邬剑军蒋雨平杜望春更多>>
- 相关机构：复旦大学复旦大学上海医学院更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会资助项目国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 光照对视网膜色素上皮细胞分泌多巴胺功能的影响被引量：8
- 2007年
- 目的:检测体外培养的猪视网膜色素上皮(RPE)细胞多巴胺(DA)分泌水平,观察光照和多次传代对其分泌DA功能的影响。方法:酶消化法获得猪RPE细胞。纯化并鉴定后观察原代RPE细胞的生长曲线。第2代细胞分为正常培养组、光照组和遮光组进行培养。高效液相色谱法检测DA量。ELISA法测定其分泌脑源性神经营养因子(BDNF)、胶质源性神经生长因子(GDNF)的水平。结果:免疫细胞化学鉴定显示原代RPE细胞纯度高,生长曲线显示第1～4天为其指数生长期。DA分泌在传代后第2天开始检测到,第4天达高峰以后缓慢下降并趋稳定。多次传代后DA分泌量无显著变化。光照刺激24h后DA分泌增加,HVA、GDNF和BDNF变化不显著。结论:猪RPE细胞体外生长旺盛,易于纯化和传代。能够持续分泌DA且不受多次传代的影响。光照刺激可以使RPE分泌DA增加。
- 张厚亮任惠民王坚丁正同邬剑军蒋雨平
- 关键词：多巴胺光照
- 藻酸钠-多聚赖氨酸-藻酸钠微囊化牛视网膜色素上皮细胞多巴胺分泌特性的研究被引量：6
- 2005年
- 目的检测体外培养的牛视网膜色素上皮(RPE)细胞多巴胺分泌特点,并观察多次传代及微囊包裹对细胞存活率和多巴胺分泌的影响.方法酶消化法原代培养牛RPE细胞.纯化、鉴定后观察细胞的生长曲线.用高压静电成囊装置制备藻酸钠-多聚赖氨酸-藻酸钠(APA)微囊化细胞.台盼蓝染色法检测囊内细胞存活率.高效液相色谱-电化学法检测多巴胺含量.结果生长曲线显示第1～4天为其指数生长期.多巴胺分泌在2 h开始检测到,48 h达高峰以后缓慢下降并趋稳定.多次传代后多巴胺分泌量差异无统计学意义.微囊化细胞多巴胺分泌量在第1～4天与非微囊化组比较显著降低(P＜0.01),但在第5～8天差异无统计学意义.微囊内细胞总数在观察的21 d内逐渐增加,虽然囊内存活率逐渐降低,但囊内活细胞数及多巴胺分泌量在第14、21天趋于稳定.结论牛RPE细胞体外生长旺盛,易于纯化和传代.它能够持续分泌多巴胺且不受多次传代及微囊包裹的影响.体外培养21 d后仍检测到囊内细胞的存活及多巴胺的分泌.牛RPE细胞是一种具有一定前景的帕金森病细胞移植的供体.
- 杜望春王坚丁正同邬剑军蒋雨平
- 关键词：多聚赖氨酸微囊化上皮细胞多巴胺帕金森病
- 微囊化牛视网膜色素上皮细胞移植治疗帕金森大鼠的研究被引量：5
- 2007年
- 目的:观察微囊化牛视网膜色素上皮细胞(RPE)移植治疗帕金森病(PD)大鼠的疗效。方法:酶消化法原代培养牛RPE细胞,纯化、传代后用高压静电微胶囊成型装置制作海藻酸钠-多聚赖氨酸微囊化细胞,将其立体定向移植入6-OHDA大鼠PD模型的右侧纹状体,移植分为NS组、RPE组、空微囊组(APA组)和微囊化RPE组(RPE-APA组)。观察移植后:阿朴吗啡诱导的旋转行为变化、移植侧纹状体中多巴胺和高香草酸含量的变化、移植区HE染色及TH免疫组化染色。结果:RPE-APA组阿朴吗啡诱发的旋转次数在移植后第2周开始减少,减少幅度为39.29%(与APA组相比,P<0.05),至第4周减少更加明显,减少幅度为:56.89%(与第2周相比,P<0.05),改善现象一直持续到第14周。行为学出现改善的大鼠纹状体多巴胺和高香草酸含量的增加同其阿朴吗啡诱发的旋转次数的减少相符合。行为学有改善的大鼠囊内细胞TH染色呈弱阳性,微囊周边的纹状体可见TH阳性纤维密度较APA组高。结论:微囊化牛RPE细胞对6-OHDA大鼠PD模型有治疗作用,是一种前景良好的新型供体。
- 杜望春王坚丁正同邬剑军蒋雨平
- 关键词：视网膜细胞移植
