国家转基因植物研究与产业化专项(J2002-B-006)
- 作品数：22 被引量：271H指数：11
- 相关作者：韩烈保曾会明张振霞刘君杨中艺更多>>
- 相关机构：北京林业大学中山大学韩山师范学院更多>>
- 发文基金：国家转基因植物研究与产业化专项国家高技术研究发展计划教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 高羊茅愈伤组织诱导及植株再生的研究被引量：19
- 2006年
- 对高羊茅Festuca arundinacea4个品种的成熟种子进行了愈伤组织诱导及植株再生的研究,建立了高羊茅的组织培养体系。结果表明:1)外植体种子的消毒程序以“次氯酸钠(活性氯≥5%)1 h+无菌水搅拌去皮”最佳;2)4个高羊茅品种以“千年盛世”在愈伤诱导中优势最突出;3)“千年盛世”愈伤诱导的适宜培养基为:MS+9 mg/L 2,4-D+300 mg/L水解酪蛋白;4)愈伤组织再生培养基中6-BA的适宜浓度为0.05 mg/L,KT的适宜浓度为0.2 mg/L。
- 王维飞韩烈保曾会明
- 关键词：高羊茅愈伤组织植株再生2,4-D6-BAKT
- 以基因枪法转化日本结缕草获得转基因植株被引量：20
- 2006年
- 将含有DREB1A和gus基因的双基因载体质粒包裹在金粉上,以基因枪轰击日本结缕草胚性愈伤组织,以gus基因的瞬时表达研究日本结缕草基因枪转化参数.结果表明,在1 100 psi压力下6 cm的轰击距离、每皿轰击2次的转化效果最好,而金粉和质粒用量对转化效率影响不显著;经过筛选和再生培养,检测到gus基因的稳定表达,并获得日本结缕草潮霉素抗性株系,PCR-Southern杂交证实外源DREB1A基因已整合到日本结缕草基因组中.
- 齐春辉韩烈保梁小红曾会明刘君
- 关键词：日本结缕草基因枪转化转基因植株DREB1AGUS基因
- 影响草地早熟禾(Poa pratensis L.)基因枪转化的关键因素研究被引量：7
- 2006年
- 将含有DREB1A基因的表达载体,通过基因枪法转化草地早熟禾的胚性愈伤组织,探讨了金粉沉淀剂、金粉直径等因素对转化的影响,同时通过不同浓度潮霉素(Hygromycin,简称Hy)对未转化愈伤组织的筛选,获得最佳筛选浓度。结果表明,适合于草地早熟禾基因枪轰击的条件为Ca(NO3)2+PEG4000包被质粒DNA;1μm金粉作为质粒DNA的载体;合适的轰击高度为6cm、轰击次数为1次、无渗透处理。采用Hy作为草地早熟禾转基因植株抗生素筛选标记时,Baron品种愈伤组织继代的临界筛选浓度为100mg/L。
- 韩烈保信金娜刘君曾会明
- 关键词：草地早熟禾DREB1A基因基因枪
- 多年生黑麦草转基因育种研究进展被引量：11
- 2004年
- 回顾了多年生黑麦草组培再生体系的建立和遗传转化的研究历程和结论,分析了利用转基因技术进行草坪草育种存在的问题,并对进一步的研究做出展望。
- 陈季琴韩烈保
- 关键词：多年生黑麦草基因转化
- 空间条件对多年生黑麦草(子1代)植株的影响
- 2007年
- “神舟”四号飞船搭载多年生黑麦草超级德比(Derby Supreme)干种子在地面种植收获的子1代种子,与未搭载收获的子1代种子为对照,对发芽率、株高、分蘖数等指标进行测定,并对表型有差异的植株进行同工酶分析。结果表明,空间条件对多年生黑麦草子1代种子发芽率影响不明显,对株高、分蘖数影响较明显,且多年生黑麦草子1代植株POD酶在酶谱特征上存在明显的差异。
- 张振环韩烈保尹淑霞
- 关键词：空间环境过氧化物同工酶
- 草地早熟禾愈伤组织诱导及植株再生被引量：12
- 2004年
- 以成熟种子和胚轴为外植体诱导草地早熟禾愈伤组织,比较草地早熟禾四个品种的愈伤诱导情况和不同6-BA浓度、愈伤年龄等因素对愈伤组织分化能力的影响。结果表明:成熟种子的出愈率与胚性愈伤诱导率均高于胚轴;MS+2,4—D(2mg/L)+6-BA(0.1mg/L)培养基为草地早熟禾Mardona品种较为合适的愈伤培养基,其诱导率为58.3%;MS+BA(3mg/L)+KT(0.2mg/L)为较为适合的分化培养基,再生率高达70%;随着继代次数的增加,草地早熟禾分化能力能够继续保持。选择致密、易碎、生长迅速的愈伤继代能够保持草地早熟禾的胚性,可以为遗传转化提供长期良好的植物材料。
- 信金娜韩烈保刘君罗莉李雪
- 关键词：草地早熟禾愈伤分化
- 农杆菌介导GUS基因对多年生黑麦草转化的研究被引量：10
- 2007年
- 通过检测愈伤组织中GUS基因的瞬间表达，研究农杆菌LBA4404／pCAMBIA1301介导多年生黑麦草的转化体系。通过对多年生黑麦草瞬间表达率的比较，确立了其遗传转化的最佳优化条件。研究发现，多年生黑麦草不同品种的转化率在25％～45％之间变化。多年生黑麦草遗传转化最佳优化条件是预培养10d的胚性愈伤组织、浓度为0．5～0．8OD的农杆菌菌液以及2d共培养时间。在共培养基中添加100μmol／L乙酰丁香酮能有效地提高植物瞬间表达率。两种侵染处理方法比较结果为滤纸滴加法比浸泡法更优。转化后对愈伤组织的干燥处理能抑制农杆菌过度繁殖，能改善愈伤状态，有利于提高转化率。
- 张振霞刘萍杜雪玲苏乔杨中艺
- 关键词：多年生黑麦草农杆菌转化GUS基因
- γ射线辐射对高羊茅种子发芽及酶活性的影响被引量：54
- 2006年
- 用60Coγ射线辐射处理高羊茅的3个品种千年盛世、知音和猎狗5号的干种子,观测辐射对种子发芽的影响,测定种子萌发过程中的SOD、POD和PPO酶的活性。结果表明,50Gy的辐射对高羊茅种子的萌发具有促进作用,较高剂量的辐射对高羊茅种子的萌发有抑制作用,且随着辐射剂量的加大,抑制作用增强。萌发过程中3种酶的活性均随辐射剂量的增加先升高后降低。高羊茅的适宜辐射诱变剂量为150Gy。
- 王月华韩烈保尹淑霞王金来程晓霞
- 关键词：高羊茅种子发芽酶活性
- 高等植物启动子克隆方法的研究进展被引量：15
- 2007年
- 启动子是植物基因工程中一个重要的研究对象,文章简述了启动子的定义、分类和启动子的研究策略,从组成型启动子、组织特异型启动子和诱导型启动子3个方面介绍了它们的功能和结构的研究现状。启动子的克隆对于构建基因工程载体,表达目的蛋白有着重要的意义。着重介绍了启动子克隆的方法,从常用的利用启动子探针型载体筛选启动子到PCR方法的应用,及此后相继出现的一些基于PCR法的克隆启动子技术,像I-PCR,P-PCR,SSP-PCR,YADE,TAIL-PCR等,为克隆启动子提供了更可靠,更合理的方法。
- 王莹韩烈保曾会明
- 关键词：启动子基因工程克隆PCR
- 结缕草胁迫诱导型启动子Rd29A的克隆及功能鉴定被引量：1
- 2011年
- 以结缕草基因组DNA为模板,根据已报道Rd29A启动子序列设计了一对特异引物,在优化的PCR反应条件下扩增出了Rd29A启动子的基因片段,通过序列分析与文献报道的基因序列有41.65%的同源性。在GenBank上的登录号为EU346948。利用GFP基因作为报告基因,构建了用于比较鉴定所克隆启动子活性的pB IG(35S-GFP)和pB IRG(Rd29A-GFP)两个植物表达载体,进而采用基因枪法对洋葱表皮细胞进行遗传转化,检测Rd29A启动子在受体细胞中调控基因表达的活性。结果表明,克隆到的Rd29A启动子活性强于组成型的35S启动子,利用GFP瞬时表达的分析方法有效的筛选到用于进行草坪草抗逆育种的启动子。
- 王莹罗国坤韩烈保
- 关键词：GFP基因基因枪法启动子活性分析
