江苏省农业科技自主创新基金(CX[10]109) 作品数:9 被引量:47 H指数:5 相关作者: 李维林 吴文龙 张春红 王小敏 闾连飞 更多>> 相关机构: 中国科学院植物研究所 山东农业大学 南京中山植物园 更多>> 发文基金: 江苏省农业科技自主创新基金 江苏省科技基础设施建设计划项目 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
利用简并引物克隆黑莓、树莓肌动蛋白基因片段及表达分析 被引量:4 2011年 采用同源克隆法,利用设计的一对肌动蛋白(actin)基因简并引物,从黑莓、树莓和悬钩子杂种3个悬钩子植物品种均得到一条743 bp的actin cDNA片段,推测编码247个氨基酸。序列比对发现,克隆的actin基因推导的氨基酸序列和其他植物的肌动蛋白氨基酸序列具有高度保守性,经数据库搜索后将来自黑莓和树莓品种的actin cDNA片段在GenBank中登录,登录号分别为HQ439558和HQ439559。不同来源的植物actin蛋白系统进化树的聚类结果表明,树莓和悬钩子杂种亲缘关系较为密切。actin基因在3个悬钩子植物品种不同组织中的RT-PCR分析结果表明,其在检测的不同组织中均有一定程度的表达量,可能都属于组成型表达的肌动蛋白基因。研究结果为利用actin基因作为内参进一步研究黑莓和树莓其他基因的丰度奠定基础。 张春红 王小敏 王鲁北 吴文龙 李维林关键词:悬钩子 肌动蛋白基因 半定量RT-PCR ‘卡伊娃’黑莓性状表现与栽培技术要点 被引量:1 2013年 从美国引进黑莓品种‘卡伊娃’,在南京地区试栽,表现生长结果优良。平均单果重12.67g。含可溶性固形物10%左右,果实酸甜爽口,鲜食和加工皆宜。一般单株产量8.61kg,折合666.7m2产量为1067~1200kg。 吴文龙 闾连飞 李维林 赵慧芳 王小敏关键词:黑莓 性状表现 栽培技术 黑莓品种‘Arapaho’离体叶片不定芽诱导影响因素分析及再生体系建立 被引量:6 2012年 以黑莓(Rubus spp.)品种‘Arapaho’无菌苗叶片为外植体,通过正交和单因素实验分别研究了基本培养基类型、6-BA和IBA质量浓度以及暗培养时间、外植体的叶位和接种方式对不定芽诱导的影响,并研究了IBA质量浓度对不定芽生根的影响;在此基础上,初步建立了黑莓品种‘Arapaho’离体叶片的再生体系。正交实验结果表明:基本培养基类型对叶片不定芽诱导率及平均不定芽数的影响最大,而IBA质量浓度对叶片不定芽诱导率及6-BA质量浓度对平均不定芽数的影响较小;适宜‘Arapaho’叶片不定芽诱导的最佳培养基为含有2.0 mg.L-1 6-BA和1.0 mg.L-1 IBA的MS培养基。单因素实验结果表明:暗培养时间、外植体的叶位及接种方式对不定芽诱导率有显著影响;最适宜的暗培养时间为21 d;植株中、上部叶片的再生能力较强,其中第3和第4位叶的不定芽诱导效果最佳;叶面朝上接种更有利于不定芽的诱导。在含0.2 mg.L-1IBA的MS培养基中,不定芽生根率达100.0%,且根数多、长势良好。黑莓品种‘Arapaho’离体叶片的再生体系为:以无菌苗的第3和第4位叶为外植体,经过适当修剪后叶面朝上接种于含有2.0 mg.L-16-BA和1.0 mg.L-1 IBA的MS培养基上,暗培养21 d后置于光照条件下培养30 d;将不定芽转接到含有0.5 mg.L-16-BA和0.3 mg.L-1 NAA的MS培养基上进行继代培养;当不定芽高约2 cm时转接到含有0.2 mg.L-1IBA的MS培养基上进行生根培养,最终获得完整植株。 王鲁北 张春红 王小敏 吴文龙 李维林关键词:黑莓 离体叶片 不定芽诱导 悬钩子属植物肌动蛋白基因片段的克隆与表达 被引量:5 2011年 目的:克隆悬钩子属植物肌动蛋白基因(actin),为研究该物种中其他基因的表达和调控提供内标基因。方法:利用一对特异性引物从黑莓、悬钩子杂种和树莓品种中克隆actin cDNA片段,对其进行序列分析和半定量RT-PCR表达分析。结果:从3个品种中均获得一条783 bp actin cDNA片段,编码260个氨基酸,3条actin片段与其他植物核苷酸序列的同源性都在82%以上,与其他植物氨基酸序列同源性也均在95%以上;树莓和悬钩子杂种品种的actin核苷酸和氨基酸序列同源性均达99%,系统进化分析也发现两者亲缘关系较近些;表达分析发现actin基因在各品种不同组织中均有一定的表达量。结论:首次克隆了悬钩子属植物肌动蛋白基因actin,将来自黑莓和树莓品种的序列登录在GenBank,登录号分别为HQ439556和HQ439557。 张春红 王小敏 王鲁北 吴文龙 李维林关键词:悬钩子 肌动蛋白 克隆 半定量RT-PCR 黑莓杂交F_1代初选优株的调查与分析 被引量:5 2012年 为了选择黑莓优良单株以进一步培育其优良品系和品种,对20株黑莓杂交F1代优选植株的生长与结实性状进行了调查统计与分析。结果发现,各植株除了叶绿素SPAD值的差异较小外,其他性状指标之间的差异都较大,其中单株结果数量、平均单果质量和株产量的变异系数都在40%左右。文中还以枝蔓刺性状、果实大小和株产量为主要考察指标,优选出了候选优良品系单株6个,它们分别是:无刺、果大、丰产、中熟类型的6-6-3,无刺、早熟类型的5-8-2、6-8-1、7-10-6,有刺、果特大、生长势强、早熟类型的1-11-1,有刺、果大、叶色较深、晚熟的3-6-1。 王小敏 吴文龙 张春红 胡淑英 闾连飞 李维林关键词:黑莓 杂交育种 F1代 不同处理方式对黑莓‘Kiowa’种子发芽的影响 被引量:10 2012年 研究了7种不同化学药剂结合不同时间的低温层积处理后黑莓‘Kiowa’品种种子的萌发特性,探索打破种子休眠的有效方法。结果表明,对种皮具有软化或腐蚀作用的NaClO、浓H2SO4和H2O2对黑莓种子发芽具有明显的促进效应,而GA3、PEG6000、KNO3、NaOH促进效果不明显,表明种皮障碍是影响其萌发的主要因素,而且以20%NaClO的处理发芽率最高。低温层积时间越长越好,以90~120天为宜。以NaClO处理并低温沙藏90天的种子发芽试验表明,不同浓度NaClO处理的种子发芽率在萌发过程中均呈现先急剧增加再缓慢增加直至恒定的趋势,其中以培养20天时达到高峰期。 张春红 胡淑英 吴文龙 闾连飞 李维林关键词:化学处理 层积处理 发芽率 世界黑莓产业发展和研究现状及前景 被引量:13 2012年 在查阅大量文献资料的基础上,结合作者的研究成果,对国内外黑莓(Rubus spp.)产业发展及研究现状进行了综述,并分析了存在的问题,阐述了中国黑莓产业的发展优势和产业化前景。目前黑莓在全世界的种植面积约为20 035 hm2,年产量1.5×105~2.0×105 t,栽培区域遍及各大洲,其中塞尔维亚的黑莓种植面积位居世界第一,美国的黑莓年产量居世界第一,亚洲仅中国种植黑莓;近几年来,罗马尼亚、波兰、墨西哥、智利、匈牙利、中国以及美国的黑莓种植面积增长较快;因黑莓极不易贮存,绝大多数鲜果用于加工。国外以常规育种技术为主、分子技术为辅培育出许多黑莓品种,栽培技术已经非常成熟,成功实现了机械化采收,并逐步推广黑莓的有机生产体系和大棚栽培技术。国外黑莓生产中面临的主要问题是经济、冻害和病虫害等。黑莓于1986年引入中国,从1994年开始推广,至2010年种植面积约4 500 hm2,主要集中在江苏省的溧水县、赣榆县和溧阳市,90%以上鲜果加工成速冻果出口。在国外引种和国内野生种质资源收集的基础上,中国的研究者开展了黑莓的选种和育种研究,并培育和筛选出适宜于本地种植的黑莓优良品种;黑莓的栽培、加工技术研究也取得了显著的成果,并研制出一些加工产品。当前中国黑莓产业主要面临主栽品种单一、农药残留量超标、栽培条件差等方面的问题,制约了黑莓产业的发展。由于黑莓适于低山丘陵栽培,具有结果早、见效快、营养价值高等优势,在中国具有广阔的发展前景。 李维林 吴文龙 张春红 闾连飞 王小敏 束怀瑞关键词:黑莓 黑莓杂交后代单株主要生长及结果性状的变异分析 被引量:2 2013年 对黑莓(Rubus spp.)6个品种9个杂交组合(‘Chester’בKiowa’、‘Kiowa’בNavaho’、‘Triple Crown’בKiowa’、‘Kiowa’בHull’、‘Triple Crown’בChester’、‘Arapaho’בHull’、‘Navaho’בKiowa’、‘Hull’בKiowa’和‘Kiowa’בKiowa’)的131株后代实生苗的主要生长性状(包括刺密度、叶绿素相对含量、分枝数量、主枝和侧枝的直径以及自然株高)和结实性状(包括结果株数、单株果穗数量、每穗果实数量和单株果实数量)进行了观测,并对这些性状的变异状况进行了比较分析。结果表明:在获得的131株杂交后代单株中,有92株具刺植株和121株结果植株,具刺和结果植株的数量分别占后代总株数的70.23%和92.37%。131株杂交后代刺密度、分枝数量、主枝直径、侧枝直径和自然株高的平均值分别为1.51 cm-1、15.43、1.31 cm、0.74 cm和61.07 cm,变异系数分别为78.81%、52.69%、25.19%、20.27%和38.91%;121株杂交后代结果单株的果穗数量、每穗果实数量和单株果实数量的平均值分别为27.05、4.92和145.98,变异系数分别为67.63%、50.83%和91.20%;在不同杂交组合间后代单株的这些指标变异均较大,且与亲本相比,杂交后代的枝蔓生长量和结果数量退化明显且分离严重。杂交后代叶片叶绿素相对含量(Spad)的平均值为45.36,变异系数仅为1.46%,变异幅度较小且与亲本的差异不明显,说明黑莓叶片叶绿素含量性状的遗传力较高且分离小。在无刺品种‘Triple Crown’与具刺品种‘Kiowa’杂交组合的40株杂交后代单株中具刺单株比例达到90%,且其他具刺亲本杂交组合的后代也多数具刺,表明黑莓的刺性状为显性遗传且具有数量遗传特征。 吴文龙 张春红 王小敏 胡淑英 闾连飞 李维林关键词:黑莓 杂交后代 生长性状 结实性状 “Arapaho”黑莓叶片与叶柄愈伤组织的诱导 被引量:6 2011年 以黑莓品种"Arapaho"无菌苗的叶片、叶柄为外植体,研究了植物生长调节剂、基本培养基和光照条件对愈伤组织诱导的影响。结果表明,在MS培养基中单加NAA、2,4-D、6-BA或者TDZ,都可以使黑莓"Arapaho"的叶片、叶柄产生愈伤组织,但是植物生长调节剂及其浓度不同,使出愈时间、愈伤组织诱导率以及愈伤组织大小和形态等有差异;基本培养基类型和光照时间长短对黑莓叶片、叶柄愈伤诱导无明显影响。 王鲁北 张春红 王小敏 胡淑英 李维林 吴文龙关键词:黑莓 叶片 叶柄 愈伤组织